（江蘇專版）2022年高考生物一輪復(fù)習(xí) 第4講 DNA的粗提取與鑒定講義（含解析）（選修1 ）

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1、 （江蘇專版）2022年高考生物一輪復(fù)習(xí) 第4講 DNA的粗提取與鑒定講義（含解析）（選修1 ） 1．判斷下列敘述的正誤 (1)用不同濃度的NaCl溶液反復(fù)溶解與析出DNA可去除蛋白質(zhì)(√) (2)提取DNA時(shí)，如果沒(méi)有雞血材料，可用豬血代替(×) (3)在DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中，用菜花替代雞血作為實(shí)驗(yàn)材料，其實(shí)驗(yàn)操作步驟相同(×) (4)洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度(×) (5)將制備的含有DNA的濾液加入60～75 ℃的恒溫水浴箱中保溫10～15 min，可以將DNA析出(×) (6)實(shí)驗(yàn)中兩次使用蒸餾水的目的不同(√) (7)在DN

2、A的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中，將絲狀物溶解在2 mol/L NaCl溶液中，加入二苯胺試劑即呈藍(lán)色(×) 2．填空識(shí)記實(shí)驗(yàn)原理 (1)粗提取原理：DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同，且不溶于冷酒精。 ①DNA與蛋白質(zhì)在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同。 溶解規(guī)律 2 mol/L NaCl溶液 0.14 mol/L NaCl溶液 DNA 溶解 析出 蛋白質(zhì) NaCl溶液物質(zhì)的量濃度從2 mol/L逐漸降低的過(guò)程中，溶解度逐漸增大 部分發(fā)生鹽析沉淀 溶解 ②DNA與雜質(zhì)對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性不同。 ③DNA不溶于酒精溶液，但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶

3、于酒精，利用這一原理可將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步分離。 (2)鑒定原理： DNA＋二苯胺試劑藍(lán)色。 3．填空掌握操作流程 4．據(jù)圖回答①～④操作的目的分別是什么 ①_____________________________________________________________________， ②_________________________________________________________________， ③_________________________________________________________________

4、_______， ④________________________________________________________________________。 提示：①是使雞血細(xì)胞吸水漲破釋放出核物質(zhì)；②是析出DNA，去除溶于酒精的雜質(zhì)；③是使DNA溶解在2 mol/L NaCl溶液中；④是稀釋NaCl溶液使其濃度接近0.14 mol/L，去除溶于低濃度NaCl溶液的雜質(zhì)。 [題組練透·過(guò)考點(diǎn)] 1．(2014·江蘇高考)下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)敘述，錯(cuò)誤的是(　　) A．酵母和菜花均可作為提取DNA的材料 B．DNA既溶于2 mol/L NaCl溶液也溶于蒸餾

5、水 C．向雞血細(xì)胞液中加蒸餾水?dāng)嚢?，可?jiàn)玻棒上有白色絮狀物 D．DNA溶液加入二苯胺試劑沸水浴加熱，冷卻后變藍(lán) 解析：選C　原則上含DNA的生物材料都可用來(lái)提取DNA，只是選用DNA含量高的生物組織，成功的可能性更大；DNA在2 mol/L NaCl溶液和蒸餾水中溶解度都較大；向雞血細(xì)胞液中加蒸餾水?dāng)嚢瑁u血細(xì)胞會(huì)吸水破裂，但在蒸餾水中不會(huì)析出DNA；DNA溶液加入二苯胺試劑后需沸水浴加熱，待冷卻后溶液變藍(lán)。 2．(2015·江蘇高考，多選)下圖1、2分別為“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中部分操作步驟示意圖，下列敘述正確的是(　　) A．圖1、2中加入蒸餾水稀釋的目的相同 B．圖

6、1中完成過(guò)濾之后保留濾液 C．圖2中完成過(guò)濾之后棄去濾液 D．在圖1雞血細(xì)胞液中加入少許嫩肉粉有助于去除雜質(zhì) 解析：選BCD　圖1中加入蒸餾水的目的是使雞血細(xì)胞吸水漲破，圖2中加入蒸餾水的目的是調(diào)節(jié)鹽溶液的濃度，使DNA析出。圖1中含有DNA的核物質(zhì)位于濾液中，因此完成過(guò)濾后應(yīng)保留濾液。圖2中析出的DNA在紗布上，因此完成過(guò)濾后應(yīng)棄去濾液。嫩肉粉中含有木瓜蛋白酶，能催化雜質(zhì)蛋白的分解。 [歸納拓展] 1．DNA粗提取實(shí)驗(yàn)中的三個(gè)注意點(diǎn) (1)本實(shí)驗(yàn)不能用哺乳動(dòng)物成熟紅細(xì)胞作實(shí)驗(yàn)材料，原因是哺乳動(dòng)物成熟紅細(xì)胞無(wú)細(xì)胞核。 (2)因DNA容易被玻璃容器吸附，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中最好使用塑料的燒杯

7、和試管，減少提取過(guò)程中DNA的損失。 (3)每次用玻璃棒攪拌時(shí)都要沿同一方向，防止打碎DNA分子。 2．DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中的“2、3、4” (1)加蒸餾水2次： ①加到雞血細(xì)胞液中，使血細(xì)胞吸水漲破； ②加到含DNA的2 mol/L的NaCl溶液中，使NaCl溶液的濃度下降到0.14 mol/L，使DNA析出。 (2)用紗布過(guò)濾3次： ①過(guò)濾血細(xì)胞破裂液，得到含細(xì)胞核物質(zhì)的濾液； ②濾取0.14 mol/L的NaCl溶液中析出的DNA(黏稠物)； ③過(guò)濾溶有DNA的2 mol/L的NaCl溶液。 (3)用NaCl溶液4次： ①加2 mol/L的NaCl溶液，溶解提

8、取的細(xì)胞核物質(zhì)； ②用0.14 mol/L的NaCl溶液使DNA析出； ③用2 mol/L的NaCl溶液，溶解濾取的DNA黏稠物； ④用2 mol/L的NaCl溶液，溶解絲狀物用于鑒定DNA。 [課堂鞏固練—小試身手] 1．(2013·江蘇高考)某同學(xué)用洋蔥進(jìn)行DNA粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn)，操作錯(cuò)誤的是 (　　) A．加入洗滌劑后用力進(jìn)行快速、充分的研磨 B．用蛋白酶純化過(guò)濾后的研磨液中的DNA C．加入酒精后用玻璃棒輕緩攪拌 D．加二苯胺試劑搖勻后沸水浴加熱 解析：選A　加入洗滌劑后研磨動(dòng)作要輕緩、柔和，否則會(huì)產(chǎn)生許多泡沫，不利于后續(xù)步驟的操作；蛋白酶能夠分解蛋白質(zhì)

9、，因此能起到純化DNA的目的；加入酒精和用玻璃棒攪拌時(shí)，動(dòng)作要輕緩，以免引起DNA分子的斷裂，導(dǎo)致DNA分子不能形成絮狀沉淀；DNA可與二苯胺試劑在沸水浴條件下作用顯藍(lán)色。 2．下列關(guān)于“DNA粗提取和鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是(　　) A．酵母菌、菜花和豬的成熟紅細(xì)胞都可作為提取DNA的材料 B．在酒精溶液中，某些蛋白質(zhì)的溶解度比DNA大 C．在研磨植物細(xì)胞時(shí)加入洗滌劑是為了溶解DNA D．在50～60 ℃的水浴中，DNA遇二苯胺試劑后即呈藍(lán)色 解析：選B　豬的成熟紅細(xì)胞沒(méi)有細(xì)胞核和眾多細(xì)胞器，不含DNA，不能作為提取DNA的材料；某些蛋白質(zhì)溶于酒精溶液，而DNA不溶；研磨植物細(xì)

10、胞時(shí)加入洗滌劑是為了瓦解細(xì)胞膜；沸水浴中，DNA遇二苯胺試劑呈藍(lán)色。 3．下面為“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的一些重要操作示意圖，據(jù)圖回答下列有關(guān)該實(shí)驗(yàn)的問(wèn)題： (1)正確的操作順序是______________________________。 (2)上圖C、E步驟都加入蒸餾水，但其目的不同，分別是____________和_________。 (3)上圖A步驟中所用酒精必須經(jīng)過(guò)____________才能使用，該步驟的目的是______________________________。 (4)為鑒定A中所得到的絲狀物的主要成分為DNA，可滴加____________試劑，沸水

11、浴，如果出現(xiàn)________，則該絲狀物的主要成分為DNA。 解析：兩次加入蒸餾水的作用：第一次是使雞血細(xì)胞吸水漲破，DNA從細(xì)胞中釋放出來(lái)進(jìn)入濾液；第二次是使溶解于物質(zhì)的量濃度為2 mol/L的NaCl溶液中的DNA析出，與雜質(zhì)分離。本題還涉及DNA的鑒定，DNA可在沸水浴條件下與二苯胺試劑作用，被染成藍(lán)色。 答案：(1)C→B→E→D→A　(2)加速血細(xì)胞的破裂　降低NaCl溶液的濃度，使DNA析出　(3)充分冷卻　提取含雜質(zhì)少的DNA　(4)二苯胺　藍(lán)色 [課下模擬練—自我檢測(cè)] 一、選擇題 1．鑒定DNA的試劑是(　　) A．斐林試劑　　　　　 B．蘇丹Ⅲ染液 C．雙縮脲

12、試劑 D．二苯胺試劑 解析：選D　鑒定DNA用的試劑是二苯胺，蘇丹Ⅲ染液用于鑒定脂肪，斐林試劑用于鑒定可溶性還原糖，雙縮脲試劑用于鑒定蛋白質(zhì)。 2．在提取DNA的過(guò)程中，最好使用塑料試管和燒杯，目的是(　　) A．不易破碎 B．減少提取過(guò)程中DNA的損失 C．增加DNA的含量 D．容易刷洗 解析：選B　DNA易被玻璃器皿吸附，使用塑料試管和燒杯，可以減少DNA的損失。 3．(2018·江蘇高考)關(guān)于還原糖、蛋白質(zhì)和DNA的鑒定實(shí)驗(yàn)，下列敘述正確的是(　　) A．在甘蔗莖的組織樣液中加入雙縮脲試劑，溫水浴后液體由藍(lán)色變成磚紅色 B．在大豆種子勻漿液中加入斐林試劑，液體由藍(lán)色

13、變成紫色 C．提取DNA時(shí)，在切碎的洋蔥中加入適量洗滌劑和食鹽，充分研磨，過(guò)濾并棄去濾液 D．將DNA粗提物溶解在2 mol/L NaCl溶液中，加入二苯胺試劑，沸水浴后液體由無(wú)色變成藍(lán)色 解析：選D　甘蔗莖的組織樣液中含有大量的蔗糖，蔗糖屬于非還原性糖，與斐林試劑在50～65 ℃的水浴加熱條件下不會(huì)產(chǎn)生磚紅色沉淀；大豆種子的勻漿液中含有大量的蛋白質(zhì)，鑒定蛋白質(zhì)時(shí)應(yīng)使用雙縮脲試劑，雙縮脲試劑在常溫下能與蛋白質(zhì)發(fā)生反應(yīng)，生成紫色的絡(luò)合物；提取DNA時(shí)，植物細(xì)胞需要先用洗滌劑瓦解細(xì)胞膜，在切碎的洋蔥中加入適量的洗滌劑和食鹽，進(jìn)行充分的研磨，過(guò)濾后收集濾液；在沸水浴條件下，DNA與二苯胺試劑反

14、應(yīng)呈現(xiàn)藍(lán)色。 4．下列有關(guān)DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是(　　) A．取材：雞血細(xì)胞。原因：有細(xì)胞核，其他動(dòng)物的血細(xì)胞都沒(méi)有細(xì)胞核 B．粗提?。翰煌瑵舛鹊腘aCl溶液。原因：DNA在其中的溶解度不同 C．提純：95%的冷酒精。原因：DNA溶于酒精，蛋白質(zhì)等雜質(zhì)不溶于酒精 D．鑒定：二苯胺試劑。原因：DNA溶液加入二苯胺試劑即呈藍(lán)色 解析：選B　除了哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞，其他動(dòng)物的血細(xì)胞都有細(xì)胞核。DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同，從而粗提取DNA。DNA不溶于酒精，蛋白質(zhì)等雜質(zhì)溶于酒精，進(jìn)而提純DNA。DNA溶液加入二苯胺試劑后需沸水浴加熱才會(huì)呈藍(lán)色。 5．

15、在DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中，將獲得的含有DNA的黏稠物分別按下表處理3次，則DNA主要集中在標(biāo)號(hào)(　　) 操作 黏稠物 濾液 2 mol·L－1的NaCl溶液攪拌過(guò)濾 ① ② 0.14 mol·L－1的NaCl溶液攪拌過(guò)濾 ③ ④ 95%的冷酒精攪拌過(guò)濾 ⑤ ⑥ A.①③⑤ B．②③⑤ C．①④⑥ D．②④⑥ 解析：選B　DNA在2 mol·L－1的NaCl溶液中溶解度大，過(guò)濾后DNA存在于濾液中；DNA在0.14 mol·L－1的NaCl溶液中溶解度低，攪拌過(guò)濾后存在于黏稠物中；DNA不溶于95%的冷酒精，攪拌過(guò)濾后存在于黏稠物中。 6．如圖是“DNA粗提

16、取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中的兩個(gè)操作步驟示意圖，下列相關(guān)敘述正確的是(　　) A．圖1中溶液a是0.14 mol·L－1的NaCl溶液 B．圖1所示操作的原理是DNA能溶于酒精，而蛋白質(zhì)等雜質(zhì)不溶 C．圖2所示實(shí)驗(yàn)操作中有一處明顯錯(cuò)誤，可能導(dǎo)致試管2中藍(lán)色變化不明顯 D．圖2試管1的作用是證明2 mol·L－1 NaCl溶液遇二苯胺出現(xiàn)藍(lán)色 解析：選C　圖1中是將絲狀物溶解，溶液a是2 mol·L－1的NaCl溶液；加入冷卻的酒精的目的是除雜，原理是DNA不溶于冷酒精，而雜質(zhì)蛋白能溶于酒精；圖2操作中的錯(cuò)誤是試管2中未將DNA溶于2 mol·L－1的NaCl溶液中，可能導(dǎo)致試管2藍(lán)色變化不

17、明顯；圖2試管1的作用是證明2 mol·L－1NaCl溶液遇二苯胺不會(huì)出現(xiàn)藍(lán)色。 7．(2019·南通二模)下列是“肝臟細(xì)胞DNA粗提取”實(shí)驗(yàn)的兩個(gè)關(guān)鍵操作步驟，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(　　) A．步驟1中，加入檸檬酸鈉緩沖液的目的是維持pH的穩(wěn)定 B．步驟1中，冰浴處理的主要原理是低溫下DNA水解酶容易變性 C．步驟2中，異戊醇的作用可能是使與DNA結(jié)合的蛋白質(zhì)因變性而沉淀 D．步驟2中，離心后應(yīng)取上清液，因?yàn)镈NA在2mol·L－1NaCl溶液中溶解度比較大 解析：選B　步驟1中，加入檸檬酸鈉緩沖液的目的是維持pH的穩(wěn)定；步驟1中，冰浴處理的主要原理是降低DNA的溶解度，使DNA

18、析出；步驟2中，異戊醇的作用可能是使與DNA結(jié)合的蛋白質(zhì)因變性而沉淀；DNA在2 mol·L－1的NaCl溶液中溶解度最大，因此加固體NaCl使溶液濃度達(dá)到2 mol·L－1后再離心過(guò)濾取上清液。 8．(2019·淮陰、海門(mén)四校聯(lián)考)關(guān)于DNA的實(shí)驗(yàn)，敘述正確的是(　　) A．DNA溶液與二苯胺試劑混合，沸水浴后生成藍(lán)色產(chǎn)物 B．PCR的每個(gè)循環(huán)一般依次經(jīng)過(guò)變性→延伸→復(fù)性三步 C．用兔的成熟紅細(xì)胞可提取DNA D．用甲基綠吡羅紅將細(xì)胞染色，細(xì)胞質(zhì)呈綠色，細(xì)胞核呈紅色 解析：選A　DNA溶液與二苯胺試劑混合，沸水浴后生成藍(lán)色產(chǎn)物；PCR的每個(gè)循環(huán)一般依次經(jīng)過(guò)變性→復(fù)性→延伸三步；兔

19、的成熟紅細(xì)胞中沒(méi)有DNA；用甲基綠吡羅紅試劑對(duì)人的口腔上皮細(xì)胞染色，細(xì)胞核呈綠色，細(xì)胞質(zhì)呈紅色。 9．如圖為“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中部分操作步驟示意圖，下列有關(guān)敘述正確的是(　　) A．DNA在常溫下遇到二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色 B．圖中加入蒸餾水的目的是稀釋鹽溶液使DNA析出 C．DNA在2 mol/L的鹽溶液中溶解度比較小 D．加入酒精后需用玻璃棒快速來(lái)回?cái)嚢? 解析：選B　DNA溶液加入二苯胺試劑，在沸水浴加熱的條件下會(huì)變藍(lán)；在DNA濃鹽溶液中加入蒸餾水的目的是稀釋鹽溶液，降低DNA的溶解度，使DNA析出；DNA在2 mol/L的鹽溶液中溶解度比較大；加入酒精后需用玻璃棒攪

20、拌，動(dòng)作要輕緩，以免加劇DNA分子斷裂，導(dǎo)致DNA分子不能形成絮狀沉淀。 10．若從植物細(xì)胞中提取DNA，發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)效果不好，如看不到絲狀沉淀物、用二苯胺鑒定時(shí)不顯示顏色反應(yīng)等，其不可能的原因是(　　) A．植物細(xì)胞中DNA含量低　 B．研磨不充分 C．過(guò)濾不充分 D．95%冷酒精的量過(guò)少 解析：選A　研磨不充分、過(guò)濾不充分均會(huì)使細(xì)胞核內(nèi)的DNA釋放不完全，提取的DNA量變少；若用于沉淀DNA的酒精量過(guò)少，也會(huì)導(dǎo)致DNA的沉淀量變少。 11．“DNA粗提取”實(shí)驗(yàn)中，應(yīng)盡可能避免DNA斷裂和降解。下列相關(guān)操作正確的是(　　) A．以菜花為材料進(jìn)行研磨時(shí)，可以適當(dāng)加熱以促進(jìn)DNA溶解

21、 B．向DNA溶液中迅速加入蒸餾水，使DNA快速析出 C．將絲狀物溶解到2 mol·L－1NaCl溶液中后，加水析出 D．向DNA溶液中加入冷卻的酒精并沿同一方向緩慢攪拌 解析：選D　以菜花為材料進(jìn)行研磨時(shí)要加洗滌劑和食鹽，不能加熱，否則DNA水解酶活性會(huì)上升，會(huì)加速分解DNA；向DNA溶液中加蒸餾水要緩慢，使DNA充分析出；將絲狀物溶解到2 mol·L－1 NaCl溶液中的目的是為了進(jìn)行鑒定，應(yīng)該加入二苯胺試劑，不是加水；向DNA溶液中加入冷酒精并沿同一方向緩慢攪拌析出DNA，防止DNA斷裂。 12．(2019·鹽城模擬)下列有關(guān)利用新鮮的菜花進(jìn)行DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的

22、是(　　) A．向菜花組織中加入蒸餾水并攪拌可釋放核DNA B．加入洗滌劑和食鹽的作用分別是瓦解細(xì)胞膜和溶解DNA C．利用DNA不溶于冷酒精的原理可進(jìn)一步提純DNA D．含DNA的氯化鈉溶液與二苯胺在常溫下混合呈藍(lán)色 解析：選BC　菜花細(xì)胞為植物細(xì)胞，有細(xì)胞壁保護(hù)，因此加蒸餾水不會(huì)吸水漲破。加入洗滌劑的作用是瓦解細(xì)胞膜，加入食鹽的作用是溶解DNA。DNA在冷酒精中的溶解度很低，蛋白質(zhì)在冷酒精中的溶解度較高，因此可以利用DNA不溶于冷酒精的原理進(jìn)一步提純DNA。含DNA的氯化鈉溶液與二苯胺在沸水浴下混合呈藍(lán)色。 13．(多選)如圖為“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中的一些操作過(guò)程。相關(guān)

23、敘述正確的是(　　) A．實(shí)驗(yàn)過(guò)程中正確的操作順序是③→②→⑤→④→① B．實(shí)驗(yàn)⑤步驟中加入蒸餾水直到溶液中有絲狀物析出為止 C．若改用植物材料需先用洗滌劑破壞細(xì)胞壁再吸水漲破 D．將粗提取的DNA溶解在2 mol/L的NaCl中加入二苯胺試劑加熱鑒定 解析：選AD　分析題圖，①表示用95%的酒精對(duì)DNA進(jìn)行進(jìn)一步純化；③②表示破碎細(xì)胞，獲取含DNA的濾液；④⑤表示去除濾液中的雜質(zhì)，所以實(shí)驗(yàn)過(guò)程中正確的操作順序是③→②→⑤→④→①；實(shí)驗(yàn)⑤步驟中加入蒸餾水直到析出的絲狀物不再增加為止；若改用植物材料需研磨破壞細(xì)胞壁，同時(shí)加入洗滌劑瓦解細(xì)胞膜；可以將粗提取的DNA溶解在2 mol/L

24、的NaCl溶液中，然后加入二苯胺試劑進(jìn)行加熱鑒定。 14．(多選)研究人員比較了不同貯藏條件對(duì)棉葉DNA純度及提取率(提取率越高，獲得的DNA越多)的影響，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)下圖。下列有關(guān)敘述正確是(　　) A．提純DNA時(shí)可加入酒精去除不溶的蛋白質(zhì)、酚類等物質(zhì) B．新鮮棉葉提取的DNA純度最高，提取DNA的量也最多 C．木瓜蛋白酶和不同濃度的NaCl溶液均可用于提純DNA D．用二苯胺試劑鑒定，顏色最深的是冷凍3 d處理后提取的DNA 解析：選CD　提純DNA時(shí)可加入酒精去除可溶的蛋白質(zhì)、酚類等物質(zhì)；新鮮棉葉提取的DNA純度最高，冷凍3 d時(shí)提取DNA的量最多，二苯胺試劑鑒定顏色最深

25、；木瓜蛋白酶可以去除蛋白質(zhì)，不同濃度的NaCl溶液可去除與DNA溶解度不同的雜質(zhì)。 二、非選擇題 15．(2019·無(wú)錫檢測(cè))血液作為一種常見(jiàn)的臨床檢測(cè)材料，如何從血液中快速、高效地分離和提取基因組DNA，對(duì)于臨床血液檢驗(yàn)與分析非常重要，科研人員對(duì)比分析了超聲波處理法(方法A)、高鹽法(方法B)、改良高鹽法(方法C)等三種快速提取大鼠全血基因組DNA的方法，實(shí)驗(yàn)過(guò)程如圖，請(qǐng)分析回答： (1)多組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)，用大鼠全血為實(shí)驗(yàn)材料提取的DNA含量總是很少，原因是_______________________________________________________________

26、_________。 (2)常規(guī)細(xì)胞破碎方法是_______________________________________________。 三種實(shí)驗(yàn)方法所需時(shí)間均較短，主要在樣品處理和細(xì)胞破碎環(huán)節(jié)進(jìn)行了優(yōu)化，就三種方法而言，細(xì)胞破碎較理想的為_(kāi)_____________。 (3)方法B得到的溶液中RNA含量高于DNA，分析原因是蛋白酶K的加入可能抑制了________的活性。 (4)步驟②中加入NaCl的目的是__________________________________________， 步驟③中加入異丙醇的作用是__________。 (5)得到含DNA的溶液后進(jìn)行鑒

27、定，需向其中加入____________，沸水浴加熱，________后變藍(lán)。 解析：(1)因哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞中無(wú)細(xì)胞核和線粒體，也就沒(méi)有DNA，因此用大鼠全血為實(shí)驗(yàn)材料提取的DNA含量總是很少。(2)常規(guī)細(xì)胞破碎方法是加入蒸餾水，使細(xì)胞吸水漲破。與方法A、B相比，方法C破碎細(xì)胞的效率高、成本低，是細(xì)胞破碎較理想的方法。(3)方法B得到的溶液中RNA含量高于DNA，其原因可能是蛋白酶K的加入抑制了RNA酶的活性。(4)步驟②中加入NaCl的目的是溶解DNA，步驟③中加入異丙醇的作用是使DNA析出。(5)得到含DNA的溶液后進(jìn)行鑒定，需向其中加入二苯胺，沸水浴加熱，冷卻后變藍(lán)。 答案：(

28、1)哺乳動(dòng)物紅細(xì)胞中無(wú)細(xì)胞核和線粒體　(2)加入蒸餾水，使細(xì)胞吸水漲破　方法C　(3)RNA酶　(4)溶解DNA　使DNA析出　(5)二苯胺　冷卻 16．(2019·南通考前卷)CTAB法和SDS法是提取DNA的常用方法，CTAB提取液含有CTAB、EDTA等成分，SDS提取液含SDS、EDTA等成分。CTAB能破壞膜結(jié)構(gòu)，使蛋白質(zhì)變性，提高DNA在提取液中的溶解度；SDS能破壞膜結(jié)構(gòu)，使蛋白質(zhì)變性；EDTA能螯合Mg2＋、Mn2＋，抑制DNA酶的活性。某科研小組為了尋找提取臘梅DNA的優(yōu)良方法，比較了兩種提取DNA的方法，主要操作如下： 實(shí)驗(yàn)測(cè)定結(jié)果如下(表中OD260反映溶液中核酸

29、的濃度，OD280反映溶液中蛋白質(zhì)的濃度。理論上，純DNA溶液的OD260/OD280為1.800，純RNA溶液的OD260/OD280為2.000)。 CTAB SDS OD260 OD280 OD260/ OD280 OD260 OD280 OD260 /OD280 0.033 0.018 1.833 0.006 0.005 1.200 請(qǐng)回答下列問(wèn)題： (1)與常溫下研磨相比，液氮中研磨的優(yōu)點(diǎn)是________________________________；CTAB法和SDS法提取液中都加入EDTA的目的是______________________

30、________。 (2)氯仿－異戊醇密度均大于水且不溶于水，DNA不溶于氯仿－異戊醇，蛋白質(zhì)等雜質(zhì)可溶于氯仿－異戊醇，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中加入氯仿－異戊醇離心后，應(yīng)取①________加異丙醇(異丙醇與水互溶)并離心進(jìn)行純化，利用異丙醇溶液純化DNA的原理是_____________。 (3)兩種方法中，________法提取的DNA較多，其可能原因是_____________________。 (4)兩種方法中，________法提取的DNA純度較低，其含有的主要雜質(zhì)是________。 解析：(1)液氮溫度低，在液氮中研磨，DNA酶活性低，可以降低DNA的分解，使研磨更充分；EDTA能螯合

31、Mg2＋、Mn2＋，抑制DNA酶的活性，減少DNA水解，提高DNA的完整性和總量。(2)氯仿—異戊醇密度均大于水且不溶于水，DNA不溶于氯仿—異戊醇，離心后，氯仿—異戊醇位于試管的底部，DNA溶于上清液中，所以離心后應(yīng)取上清液；含DNA的上清液中加異丙醇離心后取的是沉淀物，說(shuō)明DNA不溶于異丙醇，而雜質(zhì)能溶于異丙醇。(3)從表中數(shù)據(jù)可知，CTAB法提取的DNA的OD260是0.033，而SDS法提取的DNA的OD260是0.006,0.033＞0.006，所以CTAB法提取的DNA較多，根據(jù)CTAB和SDS兩種試劑作用的區(qū)別，可知CTAB提高了DNA在提取液中的溶解度，從而可提取出更多的DNA

32、。(4)從表中數(shù)據(jù)可知，CTAB法提取的DNA的OD260/OD280是1.833，而SDS法提取的DNA的OD260/OD280是1.200，與1.833相比，1.200偏離1.800更多，所以SDS法提取的DNA純度較低，純RNA溶液的OD260/OD280為2.000，比純DNA溶液的OD260/OD280大，而1.200比1.800小，所以主要雜質(zhì)不是RNA，而是蛋白質(zhì)。 答案：(1)研磨充分，低溫抑制酶活性，降低DNA的分解　減少DNA水解，提高DNA的完整性和總量　(2)上清液　DNA不溶于異丙醇，而雜質(zhì)能溶于異丙醇　(3)CTAB　CTAB提高了DNA在提取液中的溶解度，從而能提取出更多的DNA　(4)SDS　蛋白質(zhì)