（浙江選考）2018版高中生物 考前特訓(xùn) 非選擇題集訓(xùn) 題型4 圍繞選修1（含解析）

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1、題型4　圍繞選修1、3展開的命題 3年選考真題 1．(2017·浙江4月選考，32)(加試題)回答下列(一)、(二)小題： (一)回答與泡菜腌制和亞硝酸鹽測(cè)定有關(guān)的問題： (1)制作泡菜時(shí)，為縮短發(fā)酵周期，腌制前可加入乳酸菌。取少量酸奶，用無菌蒸餾水稀釋后，再用________蘸取少量的稀釋液，在MRS乳酸菌專用培養(yǎng)基的平板上劃線，以獲得乳酸菌單菌落。下圖所示的劃線分離操作，正確的是________。 (2)泡菜腌制過程中，會(huì)產(chǎn)生有機(jī)酸、醇類和亞硝酸鹽，其中醇類是由____________進(jìn)行厭氧呼吸產(chǎn)生。亞硝酸鹽對(duì)人體有害，為測(cè)定泡菜中亞硝酸鹽含量，從泡菜中提取亞硝酸鹽

2、，與____________________發(fā)生重氮化反應(yīng)，再與N－1－萘基乙二胺偶聯(lián)，形成紫紅色產(chǎn)物。然后用光程為1 cm的________，在550 nm光波下測(cè)定光密度值，與由已知濃度梯度亞硝酸鈉制作的________比對(duì)，計(jì)算樣品中亞硝酸鹽的含量。 (3)已知乳酸菌中的亞硝酸還原酶能降解亞硝酸鹽。在一定的腌制時(shí)間內(nèi)，隨著腌制時(shí)間的延長(zhǎng)，泡菜中亞硝酸鹽含量逐漸降低，是由于在厭氧和________環(huán)境下亞硝酸鹽被亞硝酸還原酶降解。 (二)回答與生態(tài)工程有關(guān)的問題： (1)對(duì)農(nóng)作物秸稈多途徑利用的基本過程示意圖如下，貫穿全過程的核心技術(shù)是__________________技術(shù)。其中“

3、過腹還田”的具體途徑是______________________________________________。將秸稈和動(dòng)物糞便等通過微生物發(fā)酵產(chǎn)生沼氣，這是利用了農(nóng)業(yè)生態(tài)工程中的______________________________技術(shù)。 (2)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上，畜牧業(yè)依賴和受制于種植業(yè)，可以通過種植業(yè)和畜牧業(yè)的__________技術(shù)提高經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益?！巴烁€林”后，林地的增加可以減少____________，更有利于受損生態(tài)系統(tǒng)的恢復(fù)。使用農(nóng)藥能有效控制農(nóng)業(yè)害蟲，但也使生態(tài)系統(tǒng)的____________減少，因此利用生物的____________進(jìn)行生物防治是今后的發(fā)展方向。

4、 2．(2016·浙江4月選考，32)(加試題)回答下列(一)、(二)小題： (一)請(qǐng)回答與“果汁中的果膠和果膠酶”實(shí)驗(yàn)有關(guān)的問題： (1)果膠是細(xì)胞壁的重要組成成分，其化學(xué)本質(zhì)是______(A.蛋白質(zhì)　B．脂質(zhì)　C．核酸　D．多糖)。它在細(xì)胞壁的形成過程中的主要作用是將相鄰的細(xì)胞________在一起。 (2)制取果汁時(shí)，先用果膠酶將果膠分解成________和半乳糖醛酸甲酯等物質(zhì)，再用________酶處理，可得到比較澄清的果汁。用適量且濃度適宜的上述兩種酶處理時(shí)，果汁的出汁率、澄清度與酶的________高低成正相關(guān)。 (3)由于果膠不溶于乙醇，故可用乙醇對(duì)果膠粗提物(經(jīng)酶處

5、理后的混合物)進(jìn)行________處理，從而得到干制品。 (二)兔肝細(xì)胞中的基因E編碼代謝甲醛的酶，擬利用基因工程技術(shù)將基因E轉(zhuǎn)入矮牽牛中，以提高矮牽牛對(duì)甲醛的代謝能力，請(qǐng)回答： (1)從兔肝細(xì)胞中提取mRNA，在________酶的作用下形成互補(bǔ)DNA，然后以此DNA為模板擴(kuò)增得到基因E。在相關(guān)酶的作用下，將基因E與Ti質(zhì)粒連接在一起，形成________，再導(dǎo)入用氯化鈣處理的________，侵染矮牽牛葉片。將被侵染的葉片除菌后進(jìn)行培養(yǎng)，最終得到轉(zhuǎn)基因矮牽牛。其中培養(yǎng)過程正確的是(　　) A．葉片在含適宜濃度生長(zhǎng)素的培養(yǎng)基上分化形成愈傷組織 B．愈傷組織在含細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素配比較

6、高的培養(yǎng)基上形成芽 C．再生的芽在細(xì)胞分裂素含量較高的培養(yǎng)基上生根 D．愈傷組織在含適宜濃度植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的培養(yǎng)基上脫分化形成再生植株 (2)取轉(zhuǎn)基因矮牽牛葉片，放入含MS液體培養(yǎng)基和適宜濃度甲醛且密封的試管中。將試管置于________上，進(jìn)行液體懸浮培養(yǎng)液。一段時(shí)間后測(cè)定培養(yǎng)基中甲醛的含量，以判斷基因E是否在轉(zhuǎn)基因矮牽牛中正常表達(dá)。培養(yǎng)過程中液體培養(yǎng)基的作用：一是提供營(yíng)養(yǎng)；二是________________，從而使葉片保持正常的形態(tài)。 1年名校模擬 3．(2017·溫州市聯(lián)考)(加試題)卡那霉素和頭孢霉素都有抗菌作用，此外，卡那霉素還對(duì)葡萄細(xì)胞有抑制作用。研究人員將Barnas

7、e基因(雄性不育基因)轉(zhuǎn)入葡萄細(xì)胞，利用卡那霉素和頭孢霉素，通過植物克隆方法成功培育出大粒、無核的葡萄新品種。請(qǐng)回答： (1)構(gòu)建含Barnase基因、β－葡糖苷酸酶基因和卡那霉素抗性基因的重組質(zhì)粒，導(dǎo)入農(nóng)桿菌，在固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)形成______________以便鑒定是否混有雜菌，再用____________將農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)移至LB__________培養(yǎng)基中進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。構(gòu)建重組質(zhì)粒需要用到的工具酶是__________________________、________。 (2)將經(jīng)過________的幼嫩葡萄葉片切成小塊，浸入農(nóng)桿菌懸浮液中，4分鐘后取出(此時(shí)已有較多農(nóng)桿菌附著在葉片小塊上

8、)并接種到固體培養(yǎng)基中。培養(yǎng)至第3天時(shí)，可以看到在葉片小塊周圍出現(xiàn)________和大量菌落。這時(shí)再用頭孢霉素處理葉片小塊，其目的是______(A.抑制葡萄細(xì)胞脫分化　B．促進(jìn)葡萄細(xì)胞再分化　C．殺滅農(nóng)桿菌　D．促進(jìn)農(nóng)桿菌生長(zhǎng))。 (3)將葉片小塊放入卡那霉素培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時(shí)間后，轉(zhuǎn)移至生芽培養(yǎng)基中，待其長(zhǎng)出____________后，再轉(zhuǎn)移至生根培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)形成試管苗?？敲顾嘏囵B(yǎng)基起著________作用，植物克隆的技術(shù)基礎(chǔ)是______________。 (4)在卡那霉素培養(yǎng)基中，由于轉(zhuǎn)化細(xì)胞對(duì)周圍的非轉(zhuǎn)化細(xì)胞有保護(hù)作用，獲得的試管苗中可能存在假的轉(zhuǎn)基因試管苗，因此還需對(duì)試管

9、苗的__________________基因的表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行生化檢測(cè)，才能鑒別出真正的轉(zhuǎn)基因試管苗。 (5)最后，對(duì)轉(zhuǎn)基因試管苗還需進(jìn)行逐漸________濕度的鍛煉，使之適應(yīng)自然環(huán)境。 4．(2017·杭州建人高復(fù)學(xué)校月考)(加試題)回答下列(一)、(二)小題： (一)如圖為果酒和果醋的制作流程，回答下列問題： (1)從自然菌樣中篩選較理想的醋化醋桿菌進(jìn)行純化培養(yǎng)，通常采用______________________________________________法接種，接種之前要對(duì)接種工具進(jìn)行__________________________，避免接種工具上可能存在的微生物污染

10、培養(yǎng)基。 (2)由果酒轉(zhuǎn)變成果醋的制作時(shí)，需要改變的環(huán)境條件是________________________和溫度控制住30～35 ℃。寫出由果酒釀制成果醋過程的總反應(yīng)式：______________________________。 (3)若在果汁中含有醋化醋桿菌，在果酒發(fā)酵旺盛時(shí)，醋化醋桿菌__________(填“能”或“不能”)將果汁中的糖發(fā)酵為醋酸，理由是______________________________________________ __________________________。 (4)在用果汁制作果酒的過程中，發(fā)酵瓶溶液中pH的變化是______。

11、 A．增大 B．不變 C．減小 D．先減小后增大 (二)回答下列關(guān)于生物工程的有關(guān)問題： (1)基因工程的核心是__________________；將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞采用最多的方法是______________，將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是______________。 (2)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)中，誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的化學(xué)方法一般是用__________________作為誘導(dǎo)劑來誘導(dǎo)細(xì)胞融合；動(dòng)物細(xì)胞工程中________________技術(shù)是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)，動(dòng)物細(xì)胞工程的一項(xiàng)重要應(yīng)用是單克隆抗體的制備，與普通抗體相比單克隆抗體的最主要優(yōu)點(diǎn)是_____

12、_____________________________。 (3)若對(duì)囊胚進(jìn)行胚胎分割，要注意______________________________，否則會(huì)影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。 5．(2017·教育綠評(píng)聯(lián)盟3月)(加試題)回答下列(一)、(二)小題： (一)已知某細(xì)菌的兩種突變類型細(xì)菌Ⅰ和細(xì)菌Ⅱ的營(yíng)養(yǎng)條件和菌落特征都相同，但細(xì)菌Ⅰ能分解有機(jī)物A而不能分解有機(jī)物B，細(xì)菌Ⅱ能分解有機(jī)物B而不能分解有機(jī)物A。現(xiàn)有這兩種類型細(xì)菌的混合液樣品，要將其分離，有人設(shè)計(jì)了一種方案，部分操作步驟如下圖。 (1)步驟一使用的是________培養(yǎng)基，其中含有細(xì)菌生長(zhǎng)所需的水、無機(jī)

13、鹽、碳源和氮源等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，此外還必須加入________，以利于對(duì)不同菌種進(jìn)行分離操作。 (2)步驟一采用________法接種，此接種法可使接種細(xì)菌逐漸稀釋，經(jīng)適宜條件培養(yǎng)，可形成單個(gè)、獨(dú)立的________，最終可能得到純種的細(xì)菌；要進(jìn)行上述接種操作，必須在________及酒精燈火焰附近進(jìn)行，以避免雜菌污染。 (3)步驟三中，若對(duì)其中某瓶培養(yǎng)液中A、B兩種有機(jī)物含量進(jìn)行測(cè)定，當(dāng)培養(yǎng)液中檢測(cè)出如下的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，其中能說明培養(yǎng)液只有細(xì)菌Ⅰ的是________。 A．化合物A與B含量都明顯下降 B．化合物A含量明顯下降，B含量基本不變 C．化合物A含量基本不變，B含量明顯下降 D．化

14、合物A、B含量都基本不變 (二)綠色城市的重要標(biāo)志之一是實(shí)現(xiàn)垃圾的“減量化、資源化和無害化”。下圖是垃圾資源化、無害化處理的一種方案： (1)該生態(tài)系統(tǒng)中屬于分解者的生物有______________。該生態(tài)工程主要利用了________________的原理。 (2)從資源與環(huán)境的角度來看，④、⑤途徑優(yōu)于③途徑的主要原因是__________________和減少環(huán)境污染等。 (3)該生態(tài)系統(tǒng)中能利用發(fā)酵技術(shù)產(chǎn)生沼氣開發(fā)生物能，從該角度看，應(yīng)屬于________的生態(tài)工程。 A．物質(zhì)循環(huán)利用 B．清潔及可再生能源系統(tǒng)組合利用 C．山區(qū)小流域綜合治理與開發(fā) D．節(jié)水和廢水處

15、理與利用 (4)種植業(yè)和________是人類食物生產(chǎn)系統(tǒng)的兩大支柱，兩者結(jié)合的優(yōu)化設(shè)計(jì)需要按照__________________規(guī)律進(jìn)行綜合優(yōu)化，使系統(tǒng)從總體上獲得最佳的經(jīng)濟(jì)效益、生態(tài)效益和社會(huì)效益。 6．(2017·杭州學(xué)軍中學(xué)9月)(加試題)回答下列生物科技及其實(shí)踐的相關(guān)問題： (1)培育轉(zhuǎn)基因抗蟲棉時(shí)為構(gòu)建重組DNA分子通常需要用同種限制性核酸內(nèi)切酶分別切割________________________________和________。將重組DNA轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌時(shí)，可以用________處理農(nóng)桿菌，使重組DNA易于導(dǎo)入。 (2)科學(xué)家利用番茄葉細(xì)胞和馬鈴薯葉細(xì)胞雜交培育“番茄

16、—馬鈴薯”植株的過程中，首先用________________酶解除去掉植物細(xì)胞的細(xì)胞壁，以使植物原生質(zhì)體相互分離；在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中，使細(xì)胞分離開來的酶是____________________。 (3)進(jìn)行早期胚胎的體外培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)液中除了含有各種有機(jī)鹽類、維生素、氨基酸、核苷酸等營(yíng)養(yǎng)成分外，還要添加激素和________。 (4)分離細(xì)菌時(shí)通常用固體培養(yǎng)基，原因是________________________________________ _____________________________________________________________________

17、___。 與微生物培養(yǎng)基相比，植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基常需添加生長(zhǎng)素和____________________，這些植物激素一般需要事先單獨(dú)配制成______保存?zhèn)溆谩Ｊ褂眠^的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過________處理后才能丟掉，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。 (5)一定濃度的淀粉溶液經(jīng)過固定化酶柱后，可使淀粉水解成糊精，若用______________________測(cè)試，流出物呈________色，表明水解產(chǎn)物糊精生成。 7．(2017·十校聯(lián)盟高三3月)(加試題)回答下列(一)(二)小題： (一)請(qǐng)回答果醋制作和醋化醋桿菌擴(kuò)大培養(yǎng)及篩選的相關(guān)問題： (1)醋化醋桿菌在________條件下

18、才能將乙醇轉(zhuǎn)化為醋酸，因此需要持續(xù)往發(fā)酵瓶中通入足量的________。 (2)底物充足條件下，醋酸發(fā)酵液pH值變化是________(A.持續(xù)變大　B．先變大后穩(wěn)定　C．持續(xù)變小　D．先變小后穩(wěn)定)。 (3)對(duì)醋化醋桿菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)所需的液體培養(yǎng)基(1 L)配方為：蛋白胨3 g、酵母提取物5 g、________25 g和蒸餾水，并調(diào)pH至________，再用__________________法進(jìn)行滅菌。若要分離醋化醋桿菌，還需在上述的培養(yǎng)基中加入適量的________。 (二)請(qǐng)回答利用基因工程生產(chǎn)人胰島素的相關(guān)問題： (1)先從人體________細(xì)胞中獲取控制人胰島素合成的

19、mRNA，然后在________酶催化下合成人胰島素基因。 (2)構(gòu)建重組DNA分子通常需要________的限制性核酸內(nèi)切酶分別切割目的基因和載體，然后用DNA連接酶使兩者連接在一起。 (3)大腸桿菌的________會(huì)阻礙重組DNA進(jìn)入細(xì)胞，通常使用氯化鈣處理大腸桿菌。 (4)為檢測(cè)目的基因是否在大腸桿菌中高效穩(wěn)定表達(dá)，最簡(jiǎn)單有效的方法是________(A.檢測(cè)大腸桿菌中有無人胰島素基因　B．檢測(cè)培養(yǎng)基中葡萄糖濃度　C．檢測(cè)大腸桿菌中人胰島素基因mRNA含量　D．檢測(cè)培養(yǎng)基中胰島素含量)。人胰島素基因能在大腸桿菌中表達(dá)是因?yàn)槿撕痛竽c桿菌共用__________________。

20、(5)胰島素除了用于治療糖尿病之外，還可以用來提高動(dòng)物________形成率。 8．(2017·稽陽(yáng)聯(lián)誼學(xué)校3月)(加試題)回答下列(一)、(二)小題： (一)炭疽桿菌能引起人畜患炭疽病。對(duì)炭疽病疑似患者，可通過甲圖所示鑒定炭疽桿菌的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行確診，其中實(shí)驗(yàn)組中的噬菌體能特異性地侵染炭疽桿菌。 (1)若要從炭疽病疑似患者體內(nèi)分離出炭疽桿菌，可將患者皮膚膿胞滲出物稀釋后滴于培養(yǎng)基表面，用無菌玻璃刮刀涂勻，該接種方法稱為________。乙圖所示的四種菌落分布圖中，該接種方法不能得到的是________。 (2)制備甲圖中的液體培養(yǎng)基時(shí)需采取__________________法滅菌

21、。接種可疑菌后，需將三角瓶置于35 ℃下的搖床上______培養(yǎng)24小時(shí)，可疑菌會(huì)大量繁殖，液體培養(yǎng)基變渾濁。 (3)甲圖中，對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組試管同時(shí)培養(yǎng)6小時(shí)后，若實(shí)驗(yàn)組液體培養(yǎng)基的渾濁度比對(duì)照組____(高/低)，則可明確疑似患者被炭疽桿菌感染；反之則排除。此判斷的依據(jù)是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________ ______________

22、__________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (二)印度沙漠貓是一種珍稀貓科動(dòng)物，通過胚胎工程技術(shù)，可以讓家貓代孕而繁育，主要步驟如下圖所示。 (1)步驟甲、乙分別是指______________、______________。 (2)卵巢經(jīng)超數(shù)排卵處理后，要使用超聲監(jiān)視器確定____的位置，插入穿刺針吸取其液體，取出________，在體外進(jìn)行人工培養(yǎng)得到成熟的卵

23、細(xì)胞。 (3)若在早期細(xì)胞培養(yǎng)過程中，發(fā)現(xiàn)某個(gè)細(xì)胞出現(xiàn)變異性狀，科研人員提取這個(gè)細(xì)胞進(jìn)行單獨(dú)培養(yǎng)，此種培養(yǎng)方法稱為________________。培養(yǎng)過程中，下列哪種細(xì)胞比較難以克??？________。 A．有限細(xì)胞系 B．無限細(xì)胞系 C．轉(zhuǎn)化細(xì)胞系 D．腫瘤細(xì)胞系 3年選考真題 1．(2016·浙江10月選考，32)(加試題)回答下列(一)(二)小題： (一)請(qǐng)回答從土壤中分離產(chǎn)脲酶細(xì)菌和脲酶固定化實(shí)驗(yàn)的有關(guān)問題： (1)LB固體培養(yǎng)基：取適量的蛋白胨、酵母提取物、NaCl，加入一定量的蒸餾水溶解，再加________，滅菌備用。 (2)尿素固體培養(yǎng)基：先將適宜

24、濃度的尿素溶液用______滅菌過的G6玻璃砂漏斗過濾，因?yàn)镚6玻璃砂漏斗__________________，故用于過濾細(xì)菌。然后將尿素溶液加入到已經(jīng)滅菌的含有酚紅的培養(yǎng)基中，備用。 (3)取適量含產(chǎn)脲酶細(xì)菌的10－4、10－5兩種土壤稀釋液，分別涂布接種到LB固體培養(yǎng)基和尿素固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)48 h，推測(cè)固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落數(shù)最少的是____(A.10－5稀釋液＋尿素固體培養(yǎng)基　B．10－5稀釋液＋LB固體培養(yǎng)基　C．10－4稀釋液＋尿素固體培養(yǎng)基　D．10－4稀釋液＋LB固體培養(yǎng)基)。 在尿素固體培養(yǎng)基上產(chǎn)脲酶細(xì)菌菌落周圍出現(xiàn)______，其原因是細(xì)菌產(chǎn)生的脲酶催化尿素分解產(chǎn)生_

25、_____所致。 (4)制備固定化脲酶時(shí)，用石英砂吸附脲酶，裝柱。再用蒸餾水洗滌固定化酶柱，其作用是________________________________________________________________________。 (二)某小組欲進(jìn)行煙草原生質(zhì)體分離與培養(yǎng)的研究。請(qǐng)回答： (1)原生質(zhì)體的分離：在無菌條件下，取煙草無菌苗的葉片，放入含有0.5 mol/L甘露醇(維持較高滲透壓)的________混合液處理，經(jīng)過離心純化后獲得原生質(zhì)體。 (2)原生質(zhì)體的培養(yǎng)：將原生質(zhì)體進(jìn)行培養(yǎng)，重新長(zhǎng)出細(xì)胞壁，形成胚性細(xì)胞。此時(shí)，應(yīng)該________培養(yǎng)基中甘露醇濃度，以

26、利于胚性細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)形成細(xì)胞團(tuán)，然后經(jīng)兩條途徑形成再生植株。途徑一：細(xì)胞團(tuán)經(jīng)球形胚、______和胚狀體，最后發(fā)育成植株。途徑二：細(xì)胞團(tuán)增殖為愈傷組織，然后在發(fā)芽培養(yǎng)基上誘導(dǎo)出芽，切割芽經(jīng)過生根后形成完整植株。上述發(fā)芽培養(yǎng)基中含量相對(duì)較高的激素是________，胚性細(xì)胞的主要特點(diǎn)是：________(A.液泡小、細(xì)胞核小　B．液泡大，細(xì)胞核大　C．液泡大，細(xì)胞核小　D．液泡小、細(xì)胞核大)。 (3)為了對(duì)煙草的某些性狀進(jìn)行改良，分離得到兩種煙草的原生質(zhì)體后，通過________________方法將它們的遺傳物質(zhì)組合在一起，經(jīng)培養(yǎng)獲得具有新性狀的再生植株。提取再生植株的DNA，采用_____

27、_________擴(kuò)增相關(guān)基因，來鑒定遺傳物質(zhì)是否成功重組。 2．(2015·浙江10月選考，32)(加試題)科研人員擬將已知的花色基因(目的基因)轉(zhuǎn)入矮牽牛的核基因組中，培育新花色的矮牽牛。請(qǐng)回答： (1)為了獲得大量的目的基因，將其與含有抗生素抗性基因的質(zhì)粒DNA形成重組DNA，再與經(jīng)________(A.氯化鈣　B．氯化鈉　C．蔗糖　D．葡萄糖)處理的大腸桿菌液混合，使重組DNA進(jìn)入大腸桿菌。用______的玻璃刮刀將稀釋后的大腸桿菌液______接種到含有抗生素的固體培養(yǎng)基上，經(jīng)培養(yǎng)形成________，再進(jìn)行鑒定和擴(kuò)大培養(yǎng)。 (2)從擴(kuò)大培養(yǎng)的大腸桿菌中提取含有目的基因的DNA

28、，用__________________分別切割含目的基因的DNA和農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒，然后用DNA連接酶連接，形成重組DNA并導(dǎo)入農(nóng)桿菌。 (3)取田間矮牽牛的幼嫩葉片，經(jīng)自來水沖洗，先用70%______浸泡，再用5%次氯酸鈉浸泡，最后用__________________清洗，作為轉(zhuǎn)基因的受體材料。 (4)將消毒后的矮牽牛葉片剪成小片，在含有目的基因的農(nóng)桿菌溶液中浸泡后，取出并轉(zhuǎn)移至加有適當(dāng)配比生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的MS培養(yǎng)基(含蔗糖、瓊脂和抗生素，下同)上，使葉小片先脫分化形成______________________。再將其轉(zhuǎn)移至另一培養(yǎng)基誘導(dǎo)形成芽，芽切割后轉(zhuǎn)移至____________

29、(A.LB培養(yǎng)基　B．MS培養(yǎng)基＋適宜濃度NAA　C．MS培養(yǎng)基＋適宜濃度BA　D．NAA/BA小于1的MS培養(yǎng)基)上生根，形成完整植株。 (5)取出試管苗，在適宜的光照、溫度和80%以上的________等條件下進(jìn)行煉苗。提取葉片組織的DNA，采用PCR技術(shù)__________目的基因，鑒定目的基因是否成功導(dǎo)入。 (6)為判斷本研究是否達(dá)到預(yù)期目的，可比較轉(zhuǎn)基因植株和非轉(zhuǎn)基因植株的______性狀。 1年名校模擬 3．(2017·寧波市十校9月聯(lián)考)(加試題)如下表是4組生物學(xué)實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基。請(qǐng)回答下列問題： 組別 培養(yǎng)基 a 無機(jī)鹽、蔗糖、維生素和甘氨酸等有機(jī)物、瓊脂 b

30、葡萄糖、NaCl、K2HPO4、尿素、酚紅、水、瓊脂糖 c 蛋白胨、酵母提取物、NaCl、水、瓊脂 d 葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素、動(dòng)物血清等 (1)進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)選用____培養(yǎng)基(填組別)。在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，首先，將動(dòng)物體內(nèi)的一部分組織取出，經(jīng)過機(jī)械消化或____________消化，使其分散成單個(gè)的細(xì)胞。如果是培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞，則首先需要在培養(yǎng)皿底部制備一層細(xì)胞，稱為________________，這層細(xì)胞具有______________的特點(diǎn)。胚胎干細(xì)胞是一種未分化細(xì)胞，具有__________性和__________核型。 (2)分離以尿素為氮源的細(xì)菌應(yīng)選用培養(yǎng)基

31、b。在含有________酶的細(xì)菌菌落周圍會(huì)出現(xiàn)________________，這是由于尿素被分解產(chǎn)生的__________使pH升高，酚紅指示劑產(chǎn)生顏色變化。變色區(qū)域越大，表明該菌株利用尿素的能力________。該實(shí)驗(yàn)用的分離方法是____________。 (3)用培養(yǎng)基a進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，則培養(yǎng)基還需要加入______________。 (4)下表對(duì)應(yīng)關(guān)系中，錯(cuò)誤的是________。 選項(xiàng) 對(duì)象 方法 A 培養(yǎng)基c G6玻璃砂漏斗 B 培養(yǎng)皿 高壓蒸汽滅菌 C 超凈臺(tái) 紫外燈照射 D 自然生長(zhǎng)的莖段 70%乙醇和5%次氯酸鈉 4.(2017·

32、杭州市建人高復(fù)學(xué)校月考)(加試題)回答下列(一)、(二)小題： (一)為了增強(qiáng)秸稈發(fā)酵效果，提高秸稈的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，研究人員從牛胃中篩選纖維素酶高產(chǎn)菌株，并對(duì)其降解纖維素能力進(jìn)行了研究。請(qǐng)回答有關(guān)的問題： (1)纖維素是植物多糖，它在植物細(xì)胞中的作用是______(A.能源物質(zhì)　B．貯能物質(zhì)　C．結(jié)構(gòu)組成成分　D．將不同的細(xì)胞粘連在一起)。該菌株在生態(tài)系統(tǒng)中能促進(jìn)__________循環(huán)。 (2)用________培養(yǎng)基來鑒定和分離纖維素酶高產(chǎn)菌株，在將培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到三角瓶或試管中時(shí)必須用________，以防止培養(yǎng)基沾到三角瓶壁或試管壁上。為了測(cè)定纖維素酶高產(chǎn)菌株的數(shù)量可以用________

33、____法在培養(yǎng)基上進(jìn)行測(cè)定。 (3)剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物，但并不與纖維素降解產(chǎn)物發(fā)生這種反應(yīng)。研究人員在剛果紅培養(yǎng)基平板上，篩選到了幾株有透明圈的菌落。透明圈的大小與纖維素酶的____________有關(guān)。 (二)利用基因工程技術(shù)將突變的IPA1基因轉(zhuǎn)入水稻細(xì)胞中從而獲得某水稻新品種。 (1)培育該轉(zhuǎn)基因水稻新品種的核心是構(gòu)建__________，該過程需要用到的工具酶有________________________________。本實(shí)驗(yàn)中常用CaCl2處理土壤農(nóng)桿菌，其目的是增加其______________的通透性，便于重組質(zhì)粒的導(dǎo)入。 (2)在含目的基因的水稻細(xì)胞培

34、育成植株過程中可以將含有愈傷組織的培養(yǎng)物放在搖床上，通過____________培養(yǎng)分散成單細(xì)胞。在該水稻的培養(yǎng)過程中，相關(guān)敘述正確的是______。 A．配制只含有適當(dāng)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基，倒在滅菌試管中凝固成半固體 B．從滅菌的根、莖或葉上切取一些小組織塊，進(jìn)行培養(yǎng) C．這種單細(xì)胞具有細(xì)胞質(zhì)豐富、液泡大、細(xì)胞核大的特征 D．水稻體細(xì)胞與這種單細(xì)胞的全能性表達(dá)程度大不相同 (3)利用水稻細(xì)胞制備原生質(zhì)體時(shí)，需在0.5～0.6 mol/L的甘露醇溶液中進(jìn)行處理，該溶液濃度與水稻細(xì)胞中的________濃度相當(dāng)。 5．(2017·“七彩陽(yáng)光”新高考研究聯(lián)盟)(加試題)回答下列(一)、(二

35、)小題： (一)為從養(yǎng)豬場(chǎng)周圍土壤中分離產(chǎn)脲酶的微生物，進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)。 (1)培養(yǎng)基的制備：本實(shí)驗(yàn)需在LB固體培養(yǎng)基和尿素固體培養(yǎng)基上進(jìn)行接種，因尿素________，只能用________過濾。下列對(duì)本實(shí)驗(yàn)選用的尿素固體培養(yǎng)基和LB固體培養(yǎng)基的敘述，錯(cuò)誤的是(　　) A．都要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌 B．都含有N源 C．都要添加瓊脂糖 D．都要添加酚紅指示劑 (2)制備細(xì)菌懸液：在無菌條件下，將土樣加到含有適量________的三角瓶中，振蕩搖勻，并以此方法制備不同濃度的土壤稀釋液。 (3)接種：本實(shí)驗(yàn)采用的接種方法是______________________________

36、__________________。 (二)某研究小組利用下圖所示的現(xiàn)代生物科學(xué)技術(shù)生產(chǎn)藥用蛋白——人組織纖溶酶原激活物(htPA)。請(qǐng)回答： (1)構(gòu)建重組DNA分子時(shí)，通常用__________________切割htPA基因與載體，形成______________________，再通過DNA連接酶連接。 (2)為獲取更多的實(shí)驗(yàn)用受精卵，要對(duì)供卵母羊注射相應(yīng)激素，使其________，獲得較多的卵母細(xì)胞。采集的精子需要經(jīng)過________處理，才具備受精能力。 (3)若想獲得更多轉(zhuǎn)htPA基因母羊，還可以對(duì)含有htPA基因的胚胎進(jìn)行______________。然后再通過_

37、_____________技術(shù)可獲得較多后代。 (4)下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是(　　) A．載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞和促進(jìn)目的基因的表達(dá) B．大腸桿菌質(zhì)粒是基因工程最常用的載體 C．若目的基因的序列是未知的，可選用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因 D．DNA連接酶催化形成氫鍵和磷酸二酯鍵的形成 6．(2017·寧波九校高三上期末聯(lián)考)(加試題)回答下列(一)、(二)小題： (一)利用紫甘薯制酒可以提高其經(jīng)濟(jì)附加值。請(qǐng)回答： (1)在工廠化生產(chǎn)時(shí)，為提高紫甘薯的利用率，可加入果膠酶和淀粉酶，其中果膠酶可來自________________等微生物。由于酶在水溶液

38、中不穩(wěn)定，因此常將酶固定在某種介質(zhì)上制成________。 (2)果膠酶可將紫甘薯勻漿中的果膠水解為________。 A．半乳糖醛酸和葡萄糖 B．半乳糖和果糖 C．麥芽糖 D．半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯 (3)紫甘薯勻漿流經(jīng)α－淀粉酶柱后，取適量流出的液體，經(jīng)脫色后加入KI－I2溶液，結(jié)果液體呈紅色。表明該液體中含有________。 (4)在發(fā)酵前，為使酵母菌迅速發(fā)生作用，取適量的干酵母，加入溫水和________。 (5)下圖表示發(fā)酵液溫度對(duì)酒精濃度的影響。據(jù)圖判斷，最佳溫度是________。 (二)科學(xué)家將魚抗凍蛋白基因轉(zhuǎn)入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在

39、相對(duì)寒冷的環(huán)境中生長(zhǎng)。質(zhì)粒上有Pst Ⅰ、Sma Ⅰ、Hind Ⅲ、Alu Ⅰ等四種限制性核酸內(nèi)切酶切割位點(diǎn)，下圖是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過程的示意圖(ampr為抗氨芐青霉素基因)，其中①～④是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過程中的相關(guān)步驟，Ⅰ、Ⅱ表示相關(guān)結(jié)構(gòu)或細(xì)胞。請(qǐng)據(jù)圖作答： (1)在構(gòu)建重組DNA時(shí)，可用一種或多種限制性核酸內(nèi)切酶進(jìn)行切割，為了避免目的基因和載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，在此實(shí)驗(yàn)中應(yīng)該選用限制性核酸內(nèi)切酶__________________分別對(duì)________________________、__________進(jìn)行切割，切割后產(chǎn)生的DNA片段分別為________、___

40、_____種。 (2)培養(yǎng)基中的氨芐青霉素會(huì)抑制番茄愈傷組織細(xì)胞的生長(zhǎng)，要利用該培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入魚的抗凍蛋白基因的番茄細(xì)胞，應(yīng)使Ⅰ重組DNA中含有________________作為標(biāo)記基因。 (3)研究人員通常采用____________法將魚抗凍蛋白基因?qū)敕鸭?xì)胞內(nèi)。 7．(2017·臺(tái)州市期末)(加試題)回答下列(一)(二)小題： (一)在農(nóng)村，泡菜的制作方法是：先對(duì)新鮮的蔬菜進(jìn)行整理、清潔，然后放入徹底清洗并用白酒擦過的泡菜壇中，再向壇中加入鹽水、香辛料及一些“陳泡菜水”。密封后置于陰涼處，適宜環(huán)境溫度為28～30 ℃。請(qǐng)回答： (1)用白酒擦拭泡菜壇的目的是_______

41、_。 (2)此過程中起主要作用的微生物是________(A.乳酸菌＋假絲酵母　B．乳酸菌＋醋化醋桿菌　C．酵母菌＋霉菌　D．酵母菌＋醋化醋桿菌)，這些微生物利用蔬菜中的糖類和其他物質(zhì)進(jìn)行發(fā)酵，產(chǎn)物有____________等，其中也包括亞硝酸。 (3)某同學(xué)想測(cè)定制作的泡菜中亞硝酸鹽的含量，需要先用亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液繪制______________，再通過測(cè)定泡菜勻漿的______________進(jìn)行計(jì)算。 (4)若要獲得優(yōu)良乳酸菌菌種，純化菌種時(shí)，更易分離得到單菌落的接種方法是________________，培養(yǎng)時(shí)還需提供________條件。 (二)干擾素是抗病毒的特效藥，干擾素

42、基因缺失的個(gè)體，免疫力嚴(yán)重下降?？茖W(xué)家設(shè)計(jì)了以下流程，利用胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)對(duì)干擾素基因缺失的患者進(jìn)行基因治療。請(qǐng)回答： (1)上圖中進(jìn)行的是________(填“體內(nèi)”或“體外”)基因治療，①過程中利用的生物工程技術(shù)手段稱為________。若導(dǎo)入的干擾素基因序列為已知，則可通過________獲取。 (2)ES細(xì)胞是由囊胚中的____________分離出來的一類細(xì)胞，具有____________性，可以將其培養(yǎng)成人體各種組織器官。在培養(yǎng)過程中常被用作飼養(yǎng)層細(xì)胞的一般是________________________。 (3)下列關(guān)于上述操作中的敘述，正確的是________

43、。 A．①②操作體現(xiàn)了上皮細(xì)胞具有全能性 B．③過程可以用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法進(jìn)行基因?qū)? C．完成基因?qū)氲募?xì)胞就具有了合成并分泌干擾素的能力 D．基因治療依據(jù)的變異原理是基因重組 8．(2017·嘉興市3月)(加試題)回答下列(一)、(二)小題： (一)泡菜是人們喜愛的食品，但在腌制的過程中會(huì)產(chǎn)生一定量的亞硝酸鹽，危害人們的健康。研究人員檢測(cè)了不同濃度的食鹽、不同發(fā)酵階段的泡菜中的亞硝酸鹽含量，結(jié)果如下圖所示。 請(qǐng)回答： (1)制作泡菜時(shí)如希望發(fā)酵快一些，可將蔬菜放在______中浸泡1分鐘后入壇。發(fā)酵壇中還可加一些白酒，加白酒的目的是增加醇香感和____________。

44、(2)據(jù)圖分析，下列敘述錯(cuò)誤的是(　　) A．腌制泡菜的最佳食鹽用量約為5% B．過多的食鹽可能會(huì)抑制發(fā)酵作用 C．腌制初期泡菜的亞硝酸鹽含量上升 D．食用泡菜最安全的是腌制后3～9天 (3)在利用光電比色法測(cè)定泡菜亞硝酸鹽含量時(shí)，在樣品溶液中加入顯色劑會(huì)生成________色產(chǎn)物。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)，可以亞硝酸鈉的質(zhì)量為橫坐標(biāo)，以______________為縱坐標(biāo)。對(duì)樣品和標(biāo)準(zhǔn)溶液的測(cè)定中，要用光程相同的________。 (二)我國(guó)目前臨床使用的乙肝疫苗大多為基因工程疫苗，其有效成分是一種叫做乙肝表面抗原的蛋白質(zhì)(S蛋白)，對(duì)應(yīng)的基因?yàn)閟基因。請(qǐng)回答： (1)在構(gòu)建重組DNA分

45、子時(shí)，要用限制性核酸內(nèi)切酶處理____________，并用____________酶使兩者結(jié)合。將重組DNA分子導(dǎo)入到哺乳動(dòng)物細(xì)胞，經(jīng)篩選得到工程細(xì)胞。 (2)在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，工程細(xì)胞在生長(zhǎng)過程中有______現(xiàn)象，需要定期使用________酶處理，以便于分瓶培養(yǎng)。 (3)為提高工程細(xì)胞培養(yǎng)的成功率，下列措施中不能采用的是(　　) A．取單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng) B．加入胰島素 C．二氧化碳培養(yǎng)箱 D．加入動(dòng)物血清 (4)由于哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)較難，成本較高，近些年科學(xué)家們又發(fā)明了“乳腺生物發(fā)生器”，進(jìn)而從轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的乳汁中提取所需產(chǎn)品。在這種技術(shù)中，作為重組DNA分子受體細(xì)胞的一般

46、是________。 答案精析 題組特訓(xùn)一 1．(一)(1)接種環(huán)　B　(2)假絲酵母　對(duì)氨基苯磺酸　比色杯　標(biāo)準(zhǔn)曲線　(3)酸性 (二)(1)物質(zhì)的良性循環(huán)　秸稈－家畜－糞便－農(nóng)作物　潔凈可再生的新能源開發(fā)　(2)合理優(yōu)化　水土流失　生物多樣性　種間關(guān)系 2．(一)(1)D　粘合　(2)半乳糖醛酸　果膠甲脂　活性　(3)沉淀 (二)(1)逆轉(zhuǎn)錄　重組DNA分子　農(nóng)桿菌　B　(2)搖床　維持滲透壓 解析　(一)(1)果膠是由半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯組成，其化學(xué)本質(zhì)屬于多糖。果膠起著將植物細(xì)胞粘合在一起的作用。(2)果膠酶能將果膠分解成半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯等物質(zhì)，要使果汁更

47、澄清，應(yīng)同時(shí)使用果膠酶和果膠甲酯酶。用適量且濃度適宜的上述兩種酶處理時(shí)，果汁的出汁率、澄清度與酶的活性高低成正相關(guān)。(3)由于果膠不溶于乙醇，故可用乙醇對(duì)果膠粗提取物(經(jīng)酶處理后的混合物)進(jìn)行沉淀處理，從而得到干制品。 (二)(1)以mRNA為模板合成DNA的過程為逆轉(zhuǎn)錄過程，這一過程需要在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化下進(jìn)行。獲得目的基因后，需在限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶的作用下，將目的基因與載體(Ti質(zhì)粒)連接形成重組DNA分子，再將其導(dǎo)入受體細(xì)胞。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，先將重組DNA導(dǎo)入經(jīng)氯化鈣處理的農(nóng)桿菌，再用導(dǎo)入目的基因的農(nóng)桿菌感染植物細(xì)胞，最終將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞內(nèi)。導(dǎo)入

48、目的基因的植物細(xì)胞經(jīng)組織培養(yǎng)過程形成轉(zhuǎn)基因植物。組織培養(yǎng)過程中，葉片在含適宜濃度的生長(zhǎng)素的培養(yǎng)基上脫分化形成愈傷組織，然后在含細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素配比較高的培養(yǎng)基上形成芽，繼而在生長(zhǎng)素含量高的培養(yǎng)基上生根，最后形成完整的植株，愈傷組織形成植株的過程中發(fā)生細(xì)胞的分化。(2)植物組織培養(yǎng)過程中，將愈傷組織等細(xì)胞置于搖床上，進(jìn)行液體懸浮培養(yǎng)，形成多個(gè)分散的細(xì)胞。培養(yǎng)過程中培養(yǎng)液一方面為植物細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)，另一方面維持一定的滲透壓，從而使葉片保持正常的形態(tài)。 3．(1)單菌落　接種環(huán)　液體　限制性核酸內(nèi)切酶　DNA連接酶 (2)消毒　愈傷組織　C　(3)叢狀苗　篩選　植物組織培養(yǎng) (4)β－葡糖苷酸

49、酶　(5)降低 解析　(1)構(gòu)建含Barnase基因、β－葡糖苷酸酶基因和卡那霉素抗性基因的重組質(zhì)粒，抗性基因是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶。將菌種接種在液體培養(yǎng)基中需要用接種環(huán)接種。(2)幼嫩葡萄葉片需要經(jīng)過消毒后切成小塊，以防雜菌污染，離體植物組織或細(xì)胞在培養(yǎng)基中脫分化成愈傷組織。頭孢霉素都有抗菌作用，用頭孢霉素處理葉片小塊，目的是殺滅附著在葉片上的農(nóng)桿菌。(3)植物組織培養(yǎng)過程中包括脫分化成愈傷組織，再分化成胚狀體，轉(zhuǎn)移到生芽培養(yǎng)基中，待其長(zhǎng)出叢壯苗再轉(zhuǎn)移至生根培養(yǎng)基上。卡那霉素和頭孢霉素都有抗菌

50、作用，卡那霉素培養(yǎng)基起著篩選作用。 (4)重組質(zhì)粒含有Barnase基因、β－葡糖苷酸酶基因和卡那霉素抗性基因，因此對(duì)試管苗的β－葡糖苷酸酶基因的表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行生化檢測(cè)，就能鑒別出真正的轉(zhuǎn)基因試管苗。 (5)對(duì)轉(zhuǎn)基因試管苗還需進(jìn)行逐漸降低濕度的鍛煉，防止根部細(xì)胞厭氧呼吸產(chǎn)生大量酒精，引起酒精中毒現(xiàn)象，出現(xiàn)爛根。 4．(一)(1)劃線分離法或涂布分離　灼燒(滅菌)處理　(2)有氧(通入無菌空氣或通入氧氣)　C2H5OH＋O2―→CH3COOH＋H2O (3)不能　在果酒發(fā)酵旺盛時(shí)，發(fā)酵環(huán)境中無氧　(4)C (二)(1)基因表達(dá)載體的構(gòu)建　農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法　顯微注射法　(2)聚乙二醇(PEG)

51、　動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)　特異性強(qiáng)、靈敏度高，并可大量制備　(3)將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等進(jìn)行分割 解析　(一)(1)純化培養(yǎng)微生物時(shí)常采用劃線分離法或涂布分離法接種；對(duì)接種工具常采用灼燒滅菌處理。 (2)醋化醋桿菌是嗜氧菌和嗜溫菌，因此由果酒轉(zhuǎn)變成果醋的制作時(shí)，需要改變的環(huán)境條件是通入氧氣和溫度控制在30～35 ℃。由果酒釀制成果醋過程的總反應(yīng)式為：C2H5OH＋O2―→CH3COOH＋H2O。 (3)果酒發(fā)酵旺盛時(shí)為無氧環(huán)境，而醋化醋桿菌是嗜氧菌，因此若在果汁中含有醋化醋桿菌，在果酒發(fā)酵旺盛時(shí)，醋化醋桿菌不能將果汁中的糖發(fā)酵為醋酸。 (4)在用果汁制作果酒的過程中，酵母菌除了產(chǎn)生酒精外，還會(huì)產(chǎn)生二氧化

52、碳，二氧化碳會(huì)與水反應(yīng)生成弱酸，因此發(fā)酵瓶溶液中pH減小。 (二)(1)基因工程的核心是基因表達(dá)載體的構(gòu)建；將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法。 (2)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)中，誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的化學(xué)方法一般是聚乙二醇(PEG)作為誘導(dǎo)劑來誘導(dǎo)細(xì)胞融合；動(dòng)物細(xì)胞工程中動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)；動(dòng)物細(xì)胞工程的一項(xiàng)重要應(yīng)用是單克隆抗體的制備，與普通抗體相比，單克隆抗體的最主要優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高，并可大量制備。 (3)若對(duì)囊胚進(jìn)行胚胎分割，要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等進(jìn)行分割，否則影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。

53、 5．(一)(1)LB固體　瓊脂　(2)劃線分離　(單)菌落　超凈臺(tái)　(3)B (二)(1)蚯蚓、蒼蠅、細(xì)菌(微生物)　物質(zhì)循環(huán)利用　(2)可以充分地利用垃圾中的物質(zhì)(或?qū)ξ镔|(zhì)的良性循環(huán)和多途徑利用)　(3)B　(4)畜牧業(yè)　生態(tài)和經(jīng)濟(jì) 6．(1)含目的基因的DNA片段　Ti質(zhì)?！aCl2　(2)纖維素酶和果膠　胰蛋白酶　(3)血清　(4)固體培養(yǎng)基容易形成固定的菌落，便于進(jìn)行篩選　細(xì)胞分裂素　母液　滅菌　(5)淀粉指示劑溶液　紅 解析　(1)基因工程中，構(gòu)建基因表達(dá)載體需要用同一種限制性核酸內(nèi)切酶對(duì)目的基因(含目的基因的DNA片段)和載體(Ti質(zhì)粒)進(jìn)行切割，然后用DNA連接酶進(jìn)行連

54、接。將重組DNA轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌時(shí)，需要對(duì)大腸桿菌用氯化鈣處理，使其成為感受態(tài)，便于導(dǎo)入。(2)植物體細(xì)胞雜交過程中，先用纖維素酶和果膠酶將植物細(xì)胞壁去掉，獲得原生質(zhì)體；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，將細(xì)胞分散開來。(3)早期胚胎培養(yǎng)的培養(yǎng)液成分有：無機(jī)鹽、有機(jī)鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營(yíng)養(yǎng)成分，以及血清等物質(zhì)。(4)固體培養(yǎng)基容易形成固定的菌落，便于進(jìn)行篩選，所以分離細(xì)菌時(shí)通常用固體培養(yǎng)基；植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基常需添加生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素，由于不同的過程兩種激素的比例不同，所以這些植物激素一般需要事先單獨(dú)配制成母液保存?zhèn)溆?。使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過滅菌處理后才能丟掉

55、，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。(5)淀粉水解后，用淀粉指示劑溶液測(cè)試，流出物呈紅色，表明水解產(chǎn)物糊精生成。 7．(一)(1)有氧　經(jīng)過濾的空氣　(2)D　(3)甘露醇　7.0　高壓蒸汽滅菌　瓊脂 (二)(1)胰島β　逆轉(zhuǎn)錄　(2)相同　(3)細(xì)胞壁　(4)D　一套遺傳密碼　(5)細(xì)胞克隆 解析　(一)(1)醋化醋桿菌是需氧型細(xì)菌，所以只有在有氧條件下才能將乙醇轉(zhuǎn)化為醋酸，因此需要持續(xù)往發(fā)酵瓶中通入足量的經(jīng)過濾的空氣。 (2)底物充足條件下，醋酸發(fā)酵液在有氧條件下不斷產(chǎn)生醋酸，使pH值不斷減小，但減小到一定程度之后，會(huì)導(dǎo)致醋化醋桿菌無法繼續(xù)產(chǎn)生醋酸，所以最后穩(wěn)定，綜上所述，選D。 (3)對(duì)醋化

56、醋桿菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)所需的液體培養(yǎng)基(1 L)配方為：蛋白胨3 g、酵母提取物5 g、甘露醇25 g和蒸餾水，并調(diào)pH至7.0，再用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌。若要分離細(xì)菌，必需用固體培養(yǎng)基，所以應(yīng)在上述的培養(yǎng)基中加入適量的凝固劑——瓊脂。 (二)(1)由于胰島素只能在胰島β細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，胰島素基因才會(huì)轉(zhuǎn)錄出相應(yīng)的mRNA。為了通過基因工程制取胰島素，若采用逆轉(zhuǎn)錄法獲得目的基因，必須先從人體胰島β細(xì)胞中獲取控制人胰島素合成的mRNA，然后在逆轉(zhuǎn)錄酶催化下合成人胰島素基因。 (2)構(gòu)建重組DNA分子時(shí)，為了保證目的基因能與載體連接，通常需要相同的限制性核酸內(nèi)切酶分別切割目的基因和載體，然后用DNA連

57、接酶使兩者連接在一起。 (3)為了增大大腸桿菌的細(xì)胞壁的通透性，通常使用氯化鈣處理大腸桿菌。 (4)如果目的基因在大腸桿菌中高效穩(wěn)定表達(dá)，最簡(jiǎn)單有效的檢測(cè)方法是檢測(cè)培養(yǎng)基中胰島素含量，所以選D。人胰島素基因能在大腸桿菌中表達(dá)是因?yàn)槿撕痛竽c桿菌共用一套遺傳密碼。 (5)胰島素除了用于治療糖尿病之外，還可以用來提高動(dòng)物細(xì)胞克隆形成率。 8．(一)(1)涂布分離法　D　(2)高壓蒸汽滅菌　振蕩　(3)低　噬菌體侵染炭疽桿菌，炭疽桿菌數(shù)量下降 (二)(1)受精或受精作用　胚胎移植　(2)卵泡　卵母細(xì)胞(或次級(jí)卵母細(xì)胞)　(3)克隆培養(yǎng)法或細(xì)胞克隆　A 解析　(一)(1)涂布分離法是將菌液進(jìn)

58、行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。由圖中四種菌落分布情況可知，A、B和C是采用涂布分離法得到的，而D是采用劃線分離法得到的。 (2)制備圖甲中的液體培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)該用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌，以殺死微生物及芽孢。接種可疑菌后，35 ℃培養(yǎng)24小時(shí)，細(xì)菌大量繁殖，液體培養(yǎng)基變渾濁。 (3)對(duì)照組試管中應(yīng)加入等量生理鹽水，與實(shí)驗(yàn)組同時(shí)培養(yǎng)6小時(shí)后，若實(shí)驗(yàn)組液體培養(yǎng)基的渾濁度比對(duì)照組低，則可明確疑似患者被炭疽桿菌感染；反之則排除。此實(shí)驗(yàn)依據(jù)的原理是實(shí)驗(yàn)組中的噬菌體能特異性地侵染炭疽桿菌，使細(xì)菌死亡，溶液變澄清。 (二)(1)步驟甲為受精作用，步驟乙為

59、胚胎移植。 (2)卵巢經(jīng)超數(shù)排卵處理后，要使用超聲監(jiān)視器確定卵泡的位置，插入穿刺針吸取其液體，取出卵母細(xì)胞(或次級(jí)卵母細(xì)胞)。 (3)提取這個(gè)細(xì)胞進(jìn)行單獨(dú)培養(yǎng)，此種培養(yǎng)方法稱為克隆培養(yǎng)法或細(xì)胞克隆。有限細(xì)胞系由于增殖能力有限(10～50代)，轉(zhuǎn)化細(xì)胞系具有較強(qiáng)的適應(yīng)能力，容易克隆。 題組特訓(xùn)二 1．(一)(1)瓊脂(糖)　(2)高壓蒸汽　孔徑小，細(xì)菌不能濾過　(3)A　紅色環(huán)　氨(或NH3)　(4)除去游離的脲酶 (二)(1)果膠酶、纖維素酶　(2)降低　心形胚　細(xì)胞分裂素　D (3)原生質(zhì)體融合　PCR方法 2．(1)A　滅菌　涂布　菌落　(2)限制性核酸內(nèi)切酶　(3)乙醇　無

60、菌水　(4)愈傷組織　B　(5)濕度　擴(kuò)增　(6)花色 解析　(1)將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞需要利用鈣離子處理使受體細(xì)胞變成感受態(tài)細(xì)胞。因此為了獲得大量的目的基因，將其與含有抗生素抗性基因的質(zhì)粒DNA形成重組DNA，再與經(jīng)氯化鈣處理的大腸桿菌液混合，使重組DNA進(jìn)入大腸桿菌。用滅菌的玻璃刮刀將稀釋后的大腸桿菌液涂布接種到含有抗生素的固體培養(yǎng)基上，經(jīng)培養(yǎng)形成菌落，再進(jìn)行鑒定和擴(kuò)大培養(yǎng)。 (2)基因工程的工具酶包括限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶。 (3)取田間矮牽牛的幼嫩葉片，經(jīng)自來水沖洗，先用70%乙醇浸泡，再用5%次氯酸鈉浸泡，最后用無菌水清洗，作為轉(zhuǎn)基因的受體材料。(4)將消毒后的矮牽

61、牛葉片剪成小片，在含有目的基因的農(nóng)桿菌溶液中浸泡后，取出并轉(zhuǎn)移至加有適當(dāng)配比生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的MS培養(yǎng)基(含蔗糖、瓊脂和抗生素，下同)上，使葉小片先脫分化形成愈傷組織。再將其轉(zhuǎn)移至另一培養(yǎng)基誘導(dǎo)形成芽，芽切割后轉(zhuǎn)移至MS培養(yǎng)基＋適宜濃度NAA上生根，形成完整植株。 (5)取出試管苗，在適宜的光照、溫度和80%以上的濕度等條件下進(jìn)行煉苗。提取葉片組織的DNA，采用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，鑒定目的基因是否成功導(dǎo)入。 (6)為判斷本研究是否達(dá)到預(yù)期目的，可比較轉(zhuǎn)基因植株和非轉(zhuǎn)基因植株的花色性狀。 3．(1)d　胰蛋白酶(或“胰酶”)　飼養(yǎng)層　抑制分化，促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育 全能　二倍體　(2)脲　紅色環(huán)帶

62、　NH3　越強(qiáng)　涂布分離法 (3)植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑(或“植物激素”)　(4)A 解析　(1)進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)要選用液體培養(yǎng)基，因此應(yīng)選擇d培養(yǎng)基。在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，首先，將動(dòng)物體內(nèi)的一部分組織取出，經(jīng)過機(jī)械消化或胰蛋白酶(或“胰酶”)消化，使其分散成單個(gè)的細(xì)胞。如果是培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞，則首先需要在培養(yǎng)皿底部制備一層胚胎成纖維細(xì)胞，稱為飼養(yǎng)層，這層細(xì)胞具有抑制分化，促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育的特點(diǎn)。胚胎干細(xì)胞是一種未分化細(xì)胞，具有全能性和二倍體核型。 (2)分離以尿素為氮源的細(xì)菌應(yīng)選用以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基，因此應(yīng)選擇培養(yǎng)基b。在含有脲酶的細(xì)菌菌落周圍會(huì)出現(xiàn)紅色環(huán)帶，這是由于尿素被分解產(chǎn)生的NH3使pH升

63、高，酚紅指示劑產(chǎn)生顏色變化，變色區(qū)域越大，表明該菌株利用尿素的能力越強(qiáng)。該實(shí)驗(yàn)用的分離方法是涂布分離法。 (3)進(jìn)行植物組織培養(yǎng)時(shí)，需要在培養(yǎng)基中加入植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑(或“植物激素”)。 (4)若要用于分離以尿素為氮源的微生物，培養(yǎng)基中應(yīng)不含其他氮源，并且培養(yǎng)基應(yīng)為加入瓊脂糖的固體培養(yǎng)基，因此可選擇標(biāo)號(hào)b作基本培養(yǎng)基，加上封口膜后滅菌，待冷卻后加入經(jīng)過G6玻璃漏斗過濾(使之無菌)的尿素溶液，搖勻待用，A錯(cuò)誤；培養(yǎng)皿應(yīng)該選用高壓蒸汽滅菌法，B正確；超凈臺(tái)應(yīng)該用紫外燈照射來消毒，C正確；自然生長(zhǎng)的莖段應(yīng)該用70%乙醇和5%次氯酸鈉進(jìn)行消毒，D正確。 4．(一)(1)C　碳(物質(zhì))　(2)固體　

64、三角漏斗　涂布分離　(3)數(shù)量、活性 (二)(1)重組DNA分子　限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶　細(xì)胞壁　(2)液體懸浮　D　(3)細(xì)胞液 解析　(一)(1)纖維素是植物多糖，它是植物細(xì)胞壁的組成成分，即植物細(xì)胞結(jié)構(gòu)組成成分。該菌株能夠水解纖維素為葡萄糖，因此在生態(tài)系統(tǒng)中能促進(jìn)碳(物質(zhì))循環(huán)。 (2)用固體培養(yǎng)基來鑒定和分離纖維素酶高產(chǎn)菌株，在將培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到三角瓶或試管中時(shí)必須用三角漏斗，以防止培養(yǎng)基沾到三角瓶壁或試管壁上。為了測(cè)定纖維素酶高產(chǎn)菌株的數(shù)量可以用涂布分離法在培養(yǎng)基上進(jìn)行測(cè)定。 (3)剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物，但并不與纖維素降解產(chǎn)物發(fā)生這種反應(yīng)。研究人員在剛果紅培養(yǎng)基平

65、板上，篩選到了幾株有透明圈的菌落。透明圈的大小與纖維素酶的數(shù)量、活性有關(guān)。 (二)(1)基因工程的核心步驟是構(gòu)建重組DNA分子，該過程首先要用同種限制性核酸內(nèi)切酶切割目的基因和外源DNA分子，其次需要用DNA連接酶將目的基因與載體連接形成重組DNA分子。本實(shí)驗(yàn)中常用CaCl2處理土壤農(nóng)桿菌，其目的是增加其細(xì)胞壁的通透性，使之成為感受態(tài)細(xì)胞，便于重組質(zhì)粒的導(dǎo)入。 (2)在含目的基因的水稻細(xì)胞培育成植株過程中可以將含有愈傷組織的培養(yǎng)物放在搖床上，通過液體懸浮培養(yǎng)分散成單細(xì)胞。配制含有適當(dāng)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的培養(yǎng)基，A錯(cuò)誤；從消毒的根、莖或葉上切取一些小組織塊，B錯(cuò)誤；這種單細(xì)胞具有細(xì)胞質(zhì)

66、豐富、液泡小、細(xì)胞核大的特征，C錯(cuò)誤；水稻體細(xì)胞比這種單細(xì)胞的全能性表達(dá)程度要小，D正確。 (3)利用水稻細(xì)胞制備原生質(zhì)體時(shí)，需在0.5～0.6 mol/L的甘露醇溶液中進(jìn)行處理，該溶液濃度與水稻細(xì)胞中的細(xì)胞液濃度相當(dāng)，這樣可以維持一定的滲透壓，保持原生質(zhì)體的形態(tài)。 5．(一)(1)加熱會(huì)分解　G6玻璃砂漏斗　D (2)無菌水　(3)涂布法(或涂布分離法) (二)(1)相同限制性核酸內(nèi)切酶　相同的粘性末端 (2)超數(shù)排卵　獲能　(3)胚胎分割　胚胎移植　(4)B 解析　從土壤中分離目的微生物的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株?；蚬こ碳夹g(shù)的基本步驟：目的基因的獲取，方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；重組DNA分子的構(gòu)建，是基因工程的核心步驟，重組DNA分子包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等；將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法；目的基因的