狂犬病實(shí)驗(yàn)室診斷分析:重慶狂犬疫苗抗體檢測(cè)

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1、泓域健康/重慶狂犬抗體檢測(cè) 狂犬病實(shí)驗(yàn)室診斷分析 一、 狂犬病實(shí)驗(yàn)室診斷 病人發(fā)病后(死亡前)可采集其唾液(間隔3-6小時(shí),至少采集3份)、腦脊液、血清及頸后帶毛囊的小塊皮膚;病人死后最好采集其腦組織標(biāo)本(小腦和腦干)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。 直接免疫熒光法是狂犬病診斷的金標(biāo)準(zhǔn),可以快速、敏感、特異地檢測(cè)人和動(dòng)物腦組織中的病毒抗原。臨床病例活體組織標(biāo)本(如頸后部皮膚毛囊)亦可進(jìn)行DFA檢測(cè)。直接快速免疫組化法及酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法亦可特異檢測(cè)狂犬病病毒抗原。 病毒核酸檢測(cè)可用于早期診斷,以逆轉(zhuǎn)錄PCR法檢測(cè)體液(唾液、血清等)和腦組織等標(biāo)本,但需要嚴(yán)格的質(zhì)量控制以保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。腦組織及唾液

2、等病毒含量高的樣本還可進(jìn)行病毒分離。細(xì)胞培養(yǎng)分離所需時(shí)間(1-2天)遠(yuǎn)少于小鼠顱內(nèi)接種分離法所需時(shí)間(10-21天),且前者的生物安全風(fēng)險(xiǎn)遠(yuǎn)小于后者。 未接種過(guò)疫苗的患者,發(fā)病早期幾乎沒(méi)有中和抗體產(chǎn)生,到發(fā)病晚期(通常在臨床癥狀出現(xiàn)后7-8天),病毒在腦內(nèi)大量增殖后突破血腦屏障進(jìn)入血液,刺激機(jī)體產(chǎn)生低水平的中和抗體。通過(guò)病毒中和試驗(yàn)檢測(cè)病人血清或腦脊液中的中和抗體,可作為狂犬病診斷的依據(jù)之一。 世界衛(wèi)生組織(WHO)推薦的抗狂犬病病毒中和抗體標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法包括快速熒光灶抑制試驗(yàn)(RFFIT)和小鼠腦內(nèi)中和試驗(yàn)(MNT)。由于RFFIT法無(wú)需使用小鼠,所用時(shí)間短(24小時(shí)),目前已被廣泛采用。

3、RFFIT方法也是我國(guó)現(xiàn)行藥典規(guī)定的檢測(cè)狂犬病病毒中和抗體的標(biāo)準(zhǔn)方法之一。此外,常用的狂犬病病毒中和抗體檢測(cè)方法還有熒光抗體病毒中和試驗(yàn)(FAVNT)。用ELISA法測(cè)定的抗狂犬病病毒糖蛋白抗體滴度與用病毒中和試驗(yàn)測(cè)定的結(jié)果有一定的相關(guān)性(約80%符合率),但相應(yīng)試劑盒尚未普及。 此外,還可以通過(guò)檢測(cè)中和抗體,監(jiān)測(cè)暴露前抗體背景及暴露后疫苗注射的免疫效果。WHO狂犬病專家咨詢委員會(huì)認(rèn)為:中和抗體水平等于或高于0.5IU/ml時(shí),接種者才具備了有效的保護(hù)能力;如果發(fā)現(xiàn)中和抗體水平低于0.5IU/ml,應(yīng)進(jìn)行加強(qiáng)免疫,至達(dá)到有效保護(hù)水平為止。分析 二、 中國(guó)RABV的動(dòng)物系統(tǒng)發(fā)育與進(jìn)化分析

4、科研人員從177個(gè)陽(yáng)性腦組織樣本中總共擴(kuò)增到了108個(gè)完整的N基因。在這些樣本中,科研人員分析并選擇了代表不同年份,動(dòng)物種類,疫情程度和地點(diǎn)的78種,連同來(lái)自中國(guó)以及鄰國(guó)和其他國(guó)家的222種參考序列進(jìn)行系統(tǒng)發(fā)育特征分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn),中國(guó)動(dòng)物RABV分布在4個(gè)主要的進(jìn)化枝中:亞洲(Asian),世界性(Cosmospolitan),北極相關(guān)(Arctic-related)和印度次大陸(IndianSubcontinent),以及這些進(jìn)化分枝中不同的子分枝。其中,亞洲進(jìn)化枝是最普遍的進(jìn)化枝,廣泛分布于中國(guó)和東南亞國(guó)家,具有豐富的遺傳多樣性,主要通過(guò)狗傳播。通過(guò)查閱文獻(xiàn)研究人員發(fā)現(xiàn),雪貂獾(ferrt

5、ebadger)RABV具有豐富的遺傳多樣性,但這僅在中國(guó)有報(bào)道。印度次大陸的進(jìn)化枝在中國(guó)還沒(méi)有被發(fā)現(xiàn),直到2017年在靠近尼泊爾的西藏邊境地區(qū)發(fā)現(xiàn)了由一只當(dāng)?shù)亓骼斯芬娜祟惒±?,仍然是迄今為止在中?guó)確認(rèn)的唯一的印度次大陸分支RABV。 緊接著,研究人員利用對(duì)于不同亞類的時(shí)間排序,重新定位了1969-2018年期間分離的具有代表性的1,118個(gè)中國(guó)毒株。其中55個(gè)中國(guó)RABV序列在1969年(最早提交)至2003年分離。自2004年開(kāi)始進(jìn)行官方狂犬病監(jiān)測(cè)后,提交給GenBank的基因序列表明,大多數(shù)狂犬病爆發(fā)是由亞洲毒株(93.3%)引起的,其他3種毒株的參與有限。在亞洲類群中,SEA1亞

6、類群在中國(guó)狂犬病毒株中占主導(dǎo)地位(70.1%),其次是SEA2(16.7%)。 此外,緬甸、泰國(guó)、老撾和越南的許多SEA3毒株在遺傳上接近中國(guó)云南和廣西流通的一些毒株,這表明SEA3毒株可能由中國(guó)傳播至接壤的國(guó)家和地區(qū)。在中國(guó)與哈薩克斯坦、俄羅斯、蒙古和韓國(guó)之間的邊境地區(qū)也發(fā)現(xiàn)了同樣的傳播跡象。這種相似性令人擔(dān)憂,因?yàn)橹袊?guó)周圍有14個(gè)毗鄰的國(guó)家,所有這些國(guó)家都有狂犬病流行,在這些國(guó)家中,人們尚未對(duì)狂犬病的遺傳多樣性和系統(tǒng)發(fā)育特征進(jìn)行充分研究。 在中國(guó),狂犬病是一個(gè)重大的公共衛(wèi)生問(wèn)題,2015-2018年更是導(dǎo)致每年幾百人死亡。超過(guò)95%的人類狂犬病病例來(lái)源于患狂犬病的狗。相比之下,中國(guó)報(bào)告

7、的動(dòng)物狂犬病病例數(shù)卻遠(yuǎn)低于人類狂犬病病例數(shù);僅有幾個(gè)省、自治區(qū)或直轄市的動(dòng)物狂犬病病例報(bào)告給國(guó)家獸醫(yī)當(dāng)局,且報(bào)告中國(guó)動(dòng)物傳染病月度信息的唯一官方雜志是《獸醫(yī)通報(bào)(VeterinaryBulletin)》。即便如此,這類零星的研究仍表明野生動(dòng)物狂犬病在赤狐(VulpesVulpes),貉(Nyctereutesprocyonoides)和鼬獾中都有增加。 三、 狂犬疫苗市場(chǎng)需求大,前景廣闊 (一)國(guó)內(nèi)寵物管理規(guī)模持續(xù)擴(kuò)大 在單身經(jīng)濟(jì)、居民收入增加和資本的共同推動(dòng)下,我國(guó)寵物市場(chǎng)規(guī)模持續(xù)擴(kuò)張,其中城鎮(zhèn)犬貓市場(chǎng)的規(guī)模達(dá)到2490億元,同比增長(zhǎng)20.6%,城鎮(zhèn)犬貓數(shù)量合計(jì)11235萬(wàn)只,其中貓5

8、806萬(wàn)只,犬5429萬(wàn)只。據(jù)相關(guān)研究機(jī)構(gòu)預(yù)測(cè):2022年中國(guó)寵物數(shù)量可達(dá)2.2億只,我國(guó)城鎮(zhèn)寵物(犬貓)主達(dá)到6844萬(wàn)多人。雖然我國(guó)寵物數(shù)量基數(shù)大,但是寵物疫苗市場(chǎng)滲透率不足3%,與國(guó)外發(fā)達(dá)國(guó)家40%的水平還有很大差距,行業(yè)整體處于培育階段。 隨著人們飼養(yǎng)寵物習(xí)慣的逐漸興起,我國(guó)寵物數(shù)量呈逐年增長(zhǎng)趨勢(shì),未來(lái)隨寵物市場(chǎng)規(guī)模的擴(kuò)大、犬貓等寵物咬傷潛在風(fēng)險(xiǎn)的提升以及暴露前免疫知識(shí)的普及,人用狂犬病疫苗潛在市場(chǎng)將進(jìn)一步提升。 (二)狂犬病至今尚無(wú)特效治療方法,狂犬疫苗產(chǎn)品市場(chǎng)前景廣闊 狂犬病是世界上病死率最高的疾病,一旦發(fā)病,病死率接近100%,至今尚無(wú)特效治療方法。國(guó)內(nèi)狂犬病疫苗屬于剛性疫

9、苗。近年來(lái),國(guó)內(nèi)人用狂犬病疫苗每年的批簽發(fā)總數(shù)量維持在6,000-8,000萬(wàn)支,即1,200-1,600萬(wàn)人份,整體批簽發(fā)量基數(shù)較大。我國(guó)人用狂犬病疫苗市場(chǎng)規(guī)模從2015年的16.8億元增長(zhǎng)至2018年的28.4億元,期間年復(fù)合增長(zhǎng)率保持19.1%的較高增速,國(guó)際權(quán)威機(jī)構(gòu)Frost&Sullivan預(yù)計(jì)到2023年我國(guó)人用狂犬病疫苗市場(chǎng)規(guī)模將達(dá)到42.5億元。 四、 狂犬病疫苗批簽發(fā)量呈現(xiàn)平穩(wěn)波動(dòng)的態(tài)勢(shì) 由于狂犬病患病高死亡率,狂犬病疫苗使用接種尤為剛性,人用狂犬病疫苗是我國(guó)常年批簽發(fā)量較大的疫苗品種之一。近年來(lái),國(guó)內(nèi)狂犬疫苗每年的批簽發(fā)總量維持在6000-8000萬(wàn)支,即1200-16

10、00萬(wàn)人份(4-5針/人份),2020年我國(guó)全年批簽發(fā)各類狂犬疫苗大約8238萬(wàn)劑,較2019年同期增長(zhǎng)40.04%。2021年第一季度,狂犬病疫苗批簽發(fā)量為1439萬(wàn)支,同比增長(zhǎng)30.19%。 五、 狂犬病病死率高危害極大 狂犬病是一種危害極大的病毒性人畜共患病,它是有史以來(lái)病死率最高的疾病(病死率為100%),狂犬病在全世界絕大多數(shù)國(guó)家均有流行,世界衛(wèi)生組織估計(jì)全球每年因狂犬病死亡達(dá)5.9萬(wàn)人。根據(jù)中國(guó)疾控中心統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示,2020年,中國(guó)人間狂犬病發(fā)病數(shù)為202例,死亡人數(shù)為188人,病死率較高。2021年1月至3月,中國(guó)人間狂犬病發(fā)病書(shū)為13人,死亡12人,病死率較高。 六、 凍

11、干人用狂犬病疫苗(Vero細(xì)胞)批簽發(fā)量較多 按照培養(yǎng)基質(zhì)分品種進(jìn)行統(tǒng)計(jì),目前Vero細(xì)胞狂犬病疫苗是主流產(chǎn)品。凍干人用狂犬病疫苗(Vero細(xì)胞)的批簽發(fā)量為6201.29萬(wàn)支,市占率為75.27%;人用狂犬病疫苗(Vero細(xì)胞)的批簽發(fā)量為1103.18萬(wàn)支,市占率為13.39%;地鼠腎細(xì)胞狂犬病疫苗的批簽發(fā)量為534.57萬(wàn)支,市占率為6.49%;最后是人二倍體細(xì)胞狂犬病疫苗的批簽發(fā)量為399.31萬(wàn)支,市占率為4.85%。 由此來(lái)看,二代狂犬病疫苗(Vero細(xì)胞基質(zhì))仍然占據(jù)主導(dǎo)地位,三代狂犬病疫苗(人二倍體細(xì)胞基質(zhì))正在逐步崛起。 七、 狂犬疫苗企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)格局:遼寧成大批簽發(fā)量較多 從供應(yīng)企業(yè)來(lái)看,遼寧成大憑借產(chǎn)能優(yōu)勢(shì)占據(jù)著過(guò)半的市場(chǎng)份額。我國(guó)生產(chǎn)狂犬疫苗的企業(yè)有遼寧成大、廣州諾誠(chéng)、寧波榮安、河南遠(yuǎn)大等。 其中遼寧成大占據(jù)狂犬疫苗市場(chǎng)的批簽發(fā)量占比達(dá)到47.2%;其次,寧波榮安與大連雅立峰的批簽發(fā)量占比分別為24.7%和7.5%;此外,成都康華三代狂犬疫苗的批簽發(fā)量占比為4.7%。

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