高中生物《第四章 第三節(jié) 酵母細(xì)胞的固定化》課件3 新人教版選修1
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1、湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校2012年上學(xué)期制作 031.生物體的遺傳物質(zhì)是什么?生物體的遺傳物質(zhì)是什么?討論討論湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校2012年上學(xué)期制作 032.真核生物的遺傳物質(zhì)存在于哪里?真核生物的遺傳物質(zhì)存在于哪里?1.生物體的遺傳物質(zhì)是什么?生物體的遺傳物質(zhì)是什么?討論討論湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校2012年上學(xué)期制作 032.真核生物的遺傳物質(zhì)存在于哪里?真核生物的遺傳物質(zhì)存在于哪里?1.生物體的遺傳物質(zhì)是什么?生物體的遺傳物質(zhì)是什么?3.怎樣才能將真核細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)怎樣才能將真核細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì) 分離來(lái)?分離來(lái)?討論討論湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星
2、遠(yuǎn)程學(xué)校湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校2012年上學(xué)期制作 03DNA的粗提取與鑒定的粗提取與鑒定湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校2012年上學(xué)期制作 03用什么材料提取用什么材料提取DNA?為什么?為什么?( (一一) )實(shí)驗(yàn)材料的選?。簩?shí)驗(yàn)材料的選?。汉祥L(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校2012年上學(xué)期制作 03( (一一) )實(shí)驗(yàn)材料的選?。簩?shí)驗(yàn)材料的選取:雞血細(xì)胞做實(shí)驗(yàn)材料。原因:雞血細(xì)胞做實(shí)驗(yàn)材料。原因:1. 雞血細(xì)胞核雞血細(xì)胞核DNA含量豐富,材料易得含量豐富,材料易得2. 雞血細(xì)胞極易吸水脹破雞血細(xì)胞極易吸水脹破3. 植物細(xì)胞外有細(xì)胞壁,其他動(dòng)物細(xì)胞制取植物細(xì)胞外有細(xì)胞壁,其他
3、動(dòng)物細(xì)胞制取DNA有時(shí)需勻漿和離心,對(duì)設(shè)備要求較高,有時(shí)需勻漿和離心,對(duì)設(shè)備要求較高,操作繁瑣,歷時(shí)較長(zhǎng)。操作繁瑣,歷時(shí)較長(zhǎng)。湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校2012年上學(xué)期制作 03(二二)破碎細(xì)胞,獲取含破碎細(xì)胞,獲取含DNA的濾液的濾液1. 若是動(dòng)物細(xì)胞,如何獲取若是動(dòng)物細(xì)胞,如何獲取DNA濾液?濾液?湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校2012年上學(xué)期制作 032. 若是植物細(xì)胞,如何獲取若是植物細(xì)胞,如何獲取DNA濾液?濾液?(二二)破碎細(xì)胞,獲取含破碎細(xì)胞,獲取含DNA的濾液的濾液1. 若是動(dòng)物細(xì)胞,如何獲取若是動(dòng)物細(xì)胞,如何獲取DNA濾液?濾液?湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校湖
4、南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校2012年上學(xué)期制作 03 加入洗滌劑和食鹽的作用分別是?加入洗滌劑和食鹽的作用分別是? 如果研磨不充分,會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生什如果研磨不充分,會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生什么影響?么影響?湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校2012年上學(xué)期制作 03 加入洗滌劑和食鹽的作用分別是?加入洗滌劑和食鹽的作用分別是? 如果研磨不充分,會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生什如果研磨不充分,會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生什么影響?么影響?洗滌劑是一些離子去污劑,能溶解細(xì)胞膜,洗滌劑是一些離子去污劑,能溶解細(xì)胞膜,有利于有利于DNA釋放;食鹽有利于釋放;食鹽有利于DNA溶解溶解湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校2012年上學(xué)
5、期制作 03 加入洗滌劑和食鹽的作用分別是?加入洗滌劑和食鹽的作用分別是? 如果研磨不充分,會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生什如果研磨不充分,會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生什么影響?么影響?洗滌劑是一些離子去污劑,能溶解細(xì)胞膜,洗滌劑是一些離子去污劑,能溶解細(xì)胞膜,有利于有利于DNA釋放;食鹽有利于釋放;食鹽有利于DNA溶解溶解會(huì)使細(xì)胞核內(nèi)會(huì)使細(xì)胞核內(nèi)DNA釋放不完全,提取釋放不完全,提取DNA量變少,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,導(dǎo)致看不到絲狀量變少,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,導(dǎo)致看不到絲狀沉淀物、用二苯胺鑒定不顯示藍(lán)色等沉淀物、用二苯胺鑒定不顯示藍(lán)色等湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校2012年上學(xué)期制作 03濾液中的雜質(zhì)可能有哪些細(xì)胞成分
6、?濾液中的雜質(zhì)可能有哪些細(xì)胞成分?(三三)去除濾液中的雜質(zhì)去除濾液中的雜質(zhì)湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校2012年上學(xué)期制作 03可能有核蛋白、多糖和可能有核蛋白、多糖和RNA等雜質(zhì)。等雜質(zhì)。(三三)去除濾液中的雜質(zhì)去除濾液中的雜質(zhì)濾液中的雜質(zhì)可能有哪些細(xì)胞成分?濾液中的雜質(zhì)可能有哪些細(xì)胞成分?湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校2012年上學(xué)期制作 03根據(jù)根據(jù)DNA的理化性質(zhì),可以用的理化性質(zhì),可以用哪些方法來(lái)去除濾液中的雜質(zhì)?哪些方法來(lái)去除濾液中的雜質(zhì)?(三三)去除濾液中的雜質(zhì)去除濾液中的雜質(zhì)湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校2012年上學(xué)期制作 03為什么反復(fù)地溶解
7、與析出為什么反復(fù)地溶解與析出DNA,能夠除,能夠除去雜質(zhì)?去雜質(zhì)?(注意:兩種食鹽溶液的注意:兩種食鹽溶液的濃度濃度和和作用作用)(三三)去除濾液中的雜質(zhì)去除濾液中的雜質(zhì)湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校2012年上學(xué)期制作 03(三三)去除濾液中的雜質(zhì)去除濾液中的雜質(zhì)為什么反復(fù)地溶解與析出為什么反復(fù)地溶解與析出DNA,能夠除,能夠除去雜質(zhì)?去雜質(zhì)?(注意:兩種食鹽溶液的注意:兩種食鹽溶液的濃度濃度和和作用作用)用高濃度的鹽溶液能除去高鹽中不能溶用高濃度的鹽溶液能除去高鹽中不能溶解的雜質(zhì);用低鹽濃度使解的雜質(zhì);用低鹽濃度使DNA析出,能除去析出,能除去在低鹽溶液中的雜質(zhì)。因此,反復(fù)溶解與
8、析在低鹽溶液中的雜質(zhì)。因此,反復(fù)溶解與析出出DNA,就能除去與,就能除去與DNA溶解度不同的多種溶解度不同的多種雜質(zhì)。雜質(zhì)。湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校2012年上學(xué)期制作 03析出:析出:濾液濾液+同體積同體積95%冷卻酒精冷卻酒精 白色絲狀物白色絲狀物(四四)DNA的析出的析出湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校2012年上學(xué)期制作 03(五五)DNA的鑒定的鑒定如何鑒定?對(duì)比反應(yīng)是為了證明什么?原理?如何鑒定?對(duì)比反應(yīng)是為了證明什么?原理?湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校2012年上學(xué)期制作 03DNA二苯胺二苯胺 藍(lán)色物藍(lán)色物沸水浴沸水浴(五五)DNA的鑒定的鑒
9、定如何鑒定?對(duì)比反應(yīng)是為了證明什么?原理?如何鑒定?對(duì)比反應(yīng)是為了證明什么?原理?湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校2012年上學(xué)期制作 03三、操作提示三、操作提示1. 以血液為實(shí)驗(yàn)材料,每以血液為實(shí)驗(yàn)材料,每100ml 加入加入3g檸檬酸鈉,作為抗凝劑。檸檬酸鈉,作為抗凝劑。湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校2012年上學(xué)期制作 032. 加入酒精和用玻璃棒攪拌時(shí),動(dòng)作要加入酒精和用玻璃棒攪拌時(shí),動(dòng)作要輕緩,以免加劇輕緩,以免加劇DNA分子的斷裂,導(dǎo)致分子的斷裂,導(dǎo)致DNA分子不能形成絮狀沉淀。分子不能形成絮狀沉淀。三、操作提示三、操作提示1. 以血液為實(shí)驗(yàn)材料,每以血液為實(shí)驗(yàn)
10、材料,每100ml 加入加入3g檸檬酸鈉,作為抗凝劑。檸檬酸鈉,作為抗凝劑。湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校湖南長(zhǎng)郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校2012年上學(xué)期制作 032. 加入酒精和用玻璃棒攪拌時(shí),動(dòng)作要加入酒精和用玻璃棒攪拌時(shí),動(dòng)作要輕緩,以免加劇輕緩,以免加劇DNA分子的斷裂,導(dǎo)致分子的斷裂,導(dǎo)致DNA分子不能形成絮狀沉淀。分子不能形成絮狀沉淀。3. 二苯胺試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用,否則會(huì)影響二苯胺試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用,否則會(huì)影響鑒定的效果。鑒定的效果。三、操作提示三、操作提示1. 以血液為實(shí)驗(yàn)材料,每以血液為實(shí)驗(yàn)材料,每100ml 加入加入3g檸檬酸鈉,作為抗凝劑。檸檬酸鈉,作為抗凝劑。試試 驗(yàn)驗(yàn)加入檸檬酸鈉溶液的目的是防止血
11、凝固加入檸檬酸鈉溶液的目的是防止血凝固加入檸檬酸鈉溶液的目的是防止血凝固加入檸檬酸鈉溶液的目的是防止血凝固加速血細(xì)胞破裂加速血細(xì)胞破裂加入檸檬酸鈉溶液的目的是防止血凝固加入檸檬酸鈉溶液的目的是防止血凝固加速血細(xì)胞破裂加速血細(xì)胞破裂 溶解溶解DNA 加入檸檬酸鈉溶液的目的是防止血凝固加入檸檬酸鈉溶液的目的是防止血凝固加速血細(xì)胞破裂加速血細(xì)胞破裂 溶解溶解DNA 使使2mol/L的的NaCl溶液稀釋至溶液稀釋至0.14mol/L使得使得DNA最大限度地析出最大限度地析出 加入檸檬酸鈉溶液的目的是防止血凝固加入檸檬酸鈉溶液的目的是防止血凝固加速血細(xì)胞破裂加速血細(xì)胞破裂 溶解溶解DNA 使使2mol/
12、L的的NaCl溶液稀釋至溶液稀釋至0.14mol/L使得使得DNA最大限度地析出最大限度地析出 使含使含DNA的黏稠物盡可能多的溶解于溶液中的黏稠物盡可能多的溶解于溶液中加入檸檬酸鈉溶液的目的是防止血凝固加入檸檬酸鈉溶液的目的是防止血凝固加速血細(xì)胞破裂加速血細(xì)胞破裂 溶解溶解DNA 使使2mol/L的的NaCl溶液稀釋至溶液稀釋至0.14mol/L使得使得DNA最大限度地析出最大限度地析出 使含使含DNA的黏稠物盡可能多的溶解于溶液中的黏稠物盡可能多的溶解于溶液中除去含除去含DNA的濾液中的雜質(zhì)的濾液中的雜質(zhì)加入檸檬酸鈉溶液的目的是防止血凝固加入檸檬酸鈉溶液的目的是防止血凝固加速血細(xì)胞破裂加速
13、血細(xì)胞破裂 溶解溶解DNA 使使2mol/L的的NaCl溶液稀釋至溶液稀釋至0.14mol/L使得使得DNA最大限度地析出最大限度地析出 使含使含DNA的黏稠物盡可能多的溶解于溶液中的黏稠物盡可能多的溶解于溶液中除去含除去含DNA的濾液中的雜質(zhì)的濾液中的雜質(zhì)提取提取DNA加入檸檬酸鈉溶液的目的是防止血凝固加入檸檬酸鈉溶液的目的是防止血凝固加速血細(xì)胞破裂加速血細(xì)胞破裂 溶解溶解DNA 使使2mol/L的的NaCl溶液稀釋至溶液稀釋至0.14mol/L使得使得DNA最大限度地析出最大限度地析出 使含使含DNA的黏稠物盡可能多的溶解于溶液中的黏稠物盡可能多的溶解于溶液中除去含除去含DNA的濾液中的雜
14、質(zhì)的濾液中的雜質(zhì)提取提取DNAA出現(xiàn)藍(lán)色出現(xiàn)藍(lán)色 B無(wú)變化無(wú)變化討論討論此實(shí)驗(yàn)過(guò)程中有幾次過(guò)濾,幾次析出?此實(shí)驗(yàn)過(guò)程中有幾次過(guò)濾,幾次析出?分別在哪一步?分別在哪一步?答答: 整個(gè)實(shí)驗(yàn)共整個(gè)實(shí)驗(yàn)共“兩次過(guò)濾,兩次析出兩次過(guò)濾,兩次析出”此實(shí)驗(yàn)過(guò)程中有幾次過(guò)濾,幾次析出?此實(shí)驗(yàn)過(guò)程中有幾次過(guò)濾,幾次析出?分別在哪一步?分別在哪一步?討論討論兩次過(guò)濾兩次過(guò)濾兩次過(guò)濾兩次過(guò)濾第一次:第一次: DNA存在于濾液里存在于濾液里 第一步第一步第二次:第二次: DNA存在于濾液里存在于濾液里 第六步第六步過(guò)濾時(shí)使用的紗布層數(shù)與需用濾液或過(guò)濾時(shí)使用的紗布層數(shù)與需用濾液或黏稠物有關(guān),第二次要用其濾出的黏稠物黏稠
15、物有關(guān),第二次要用其濾出的黏稠物有關(guān),所以要使用多層紗布,第一次和第有關(guān),所以要使用多層紗布,第一次和第三次均要用其濾液,使用的紗布為三次均要用其濾液,使用的紗布為12層層兩次過(guò)濾兩次過(guò)濾第一次:第一次: DNA存在于濾液里存在于濾液里 第一步第一步第二次:第二次: DNA存在于濾液里存在于濾液里 第六步第六步兩次析出兩次析出兩次析出兩次析出第一次:用第一次:用0.14 molL 的的NaCI溶液溶液兩次析出兩次析出第一次:用第一次:用0.14 molL 的的NaCI溶液溶液第三步第三步兩次析出兩次析出第一次:用第一次:用0.14 molL 的的NaCI溶液溶液第三步第三步第二次:用冷卻的第二次:用冷卻的95的酒精的酒精兩次析出兩次析出第一次:用第一次:用0.14 molL 的的NaCI溶液溶液第三步第三步第二次:用冷卻的第二次:用冷卻的95的酒精的酒精第七步第七步
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