高中生物 專題2課題2第二課時(shí) 動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體課件 新人教版選修3

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1、思考題思考題1.1.植物體細(xì)胞雜交時(shí)首先應(yīng)用什么方法去掉細(xì)胞壁？植物體細(xì)胞雜交時(shí)首先應(yīng)用什么方法去掉細(xì)胞壁？ 酶解法，如纖維素酶或果膠酶酶解法，如纖維素酶或果膠酶2.2.動(dòng)物細(xì)胞融合時(shí)需要進(jìn)行去壁處理嗎？為什么？動(dòng)物細(xì)胞融合時(shí)需要進(jìn)行去壁處理嗎？為什么？無(wú)需，因?yàn)閯?dòng)物細(xì)胞無(wú)細(xì)胞壁無(wú)需，因?yàn)閯?dòng)物細(xì)胞無(wú)細(xì)胞壁3.3.植物體細(xì)胞雜交誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合常用的方法有哪些？植物體細(xì)胞雜交誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合常用的方法有哪些？離心、電激等物理方法；離心、電激等物理方法；PEGPEG等化學(xué)方法等化學(xué)方法4.4.動(dòng)物細(xì)胞融合能利用上述兩類方法嗎？還有其他方法嗎？動(dòng)物細(xì)胞融合能利用上述兩類方法嗎？還有其他方法嗎？能能

2、還可以利用滅活的病毒進(jìn)行誘導(dǎo)還可以利用滅活的病毒進(jìn)行誘導(dǎo)5.5.植物體細(xì)胞雜交應(yīng)先進(jìn)行原生質(zhì)體的融合再進(jìn)行組織培養(yǎng)植物體細(xì)胞雜交應(yīng)先進(jìn)行原生質(zhì)體的融合再進(jìn)行組織培養(yǎng)成完整的雜種個(gè)體，動(dòng)物細(xì)胞融合后能形成雜種動(dòng)物個(gè)嗎？成完整的雜種個(gè)體，動(dòng)物細(xì)胞融合后能形成雜種動(dòng)物個(gè)嗎？不能不能植物體細(xì)胞雜交的意義：植物體細(xì)胞雜交的意義：打破生殖隔離，克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，打破生殖隔離，克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，培育作物新品種。培育作物新品種。一、動(dòng)物細(xì)胞融合一、動(dòng)物細(xì)胞融合有些細(xì)胞的融合是正常的生命活動(dòng)。如有些細(xì)胞的融合是正常的生命活動(dòng)。如精子與卵細(xì)胞的結(jié)合。精子與卵細(xì)胞的結(jié)合。 兩個(gè)細(xì)胞正在融合兩個(gè)細(xì)胞正

3、在融合 受精作用受精作用( (一一) )動(dòng)物細(xì)胞融合的概念動(dòng)物細(xì)胞融合的概念 動(dòng)物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交, ,是指兩個(gè)或多是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。（二）動(dòng)物細(xì)胞融合的過(guò)程（二）動(dòng)物細(xì)胞融合的過(guò)程雜交細(xì)胞雜交細(xì)胞: :融合后形成的具有原來(lái)兩個(gè)或融合后形成的具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞。多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞。與植物原生質(zhì)體融合原理相同，方法類似。與植物原生質(zhì)體融合原理相同，方法類似。P52 圖2-23細(xì)胞細(xì)胞A A細(xì)胞細(xì)胞B雜交細(xì)胞雜交細(xì)胞滅活的病毒滅活的病毒物理法物理法化學(xué)法化學(xué)法滅活的病毒顆粒黏附于

4、細(xì)胞表面滅活的病毒顆粒黏附于細(xì)胞表面細(xì)胞膜被病毒顆粒穿通細(xì)胞膜被病毒顆粒穿通細(xì)胞膜連接細(xì)胞膜連接細(xì)胞融合，形成雜交細(xì)胞細(xì)胞融合，形成雜交細(xì)胞（細(xì)胞膜具有一定的細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性）流動(dòng)性）為什么滅活的病毒能作為誘導(dǎo)劑？為什么滅活的病毒能作為誘導(dǎo)劑？因?yàn)闇缁畹牟《灸苁辜?xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分因?yàn)闇缁畹牟《灸苁辜?xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細(xì)胞膜打開(kāi)，細(xì)子和脂質(zhì)分子重新排布，細(xì)胞膜打開(kāi)，細(xì)胞發(fā)生融合。胞發(fā)生融合。不滅活的病毒能作為誘導(dǎo)劑嗎？不滅活的病毒能作為誘導(dǎo)劑嗎？不能，因?yàn)椴粶缁畹牟《緯?huì)感染細(xì)胞。不能，因?yàn)椴粶缁畹牟《緯?huì)感染細(xì)胞。( (三三) )動(dòng)物細(xì)胞融合的應(yīng)用動(dòng)物細(xì)胞融合的應(yīng)用1.1

5、.突破有性雜交方法的局限突破有性雜交方法的局限, ,使遠(yuǎn)緣雜交成為使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。可能。2.2.成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段。新品種培育等的重要手段。3.3.為制造單克隆抗體開(kāi)辟了新途徑。為制造單克隆抗體開(kāi)辟了新途徑。鼠鼠雞、鼠雞、鼠兔、鼠兔、鼠猴、人猴、人鼠、人鼠、人兔、兔、人人雞、人雞、人蛙、蛙、酵母菌酵母菌雞雞 、人、人胡蘿卜胡蘿卜等等主要用于制備單克主要用于制備單克隆抗體隆抗體獲得雜種植株獲得雜種植株用途用途物理、化學(xué)方法物理、化學(xué)方法（同左）（同左）滅活的病毒滅活的病毒物理（離心、振物理（離心、振動(dòng)、電激）動(dòng)、

6、電激）化學(xué)（聚乙二醇）化學(xué)（聚乙二醇）誘導(dǎo)方法誘導(dǎo)方法使細(xì)胞分散后誘使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合導(dǎo)細(xì)胞融合去除細(xì)胞壁后誘去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合導(dǎo)原生質(zhì)體融合細(xì)胞融合的方法細(xì)胞融合的方法細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞膜的流動(dòng)性、植物細(xì)胞全能性植物細(xì)胞全能性原理原理動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交比較項(xiàng)目比較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交、動(dòng)物細(xì)胞融合的比較植物體細(xì)胞雜交、動(dòng)物細(xì)胞融合的比較二、單克隆抗體二、單克隆抗體 什么是抗體？什么是抗體？ 抗體是機(jī)體受抗原刺激后產(chǎn)生的、抗體是機(jī)體受抗原刺激后產(chǎn)生的、并能與該抗原發(fā)生特異性結(jié)合的具有并能與該抗原發(fā)生特異性結(jié)合的具有免

7、疫功能的球蛋白。免疫功能的球蛋白。 B淋巴細(xì)胞（漿細(xì)胞）能產(chǎn)生抗體淋巴細(xì)胞（漿細(xì)胞）能產(chǎn)生抗體 （一）獲得抗體的傳統(tǒng)方法（一）獲得抗體的傳統(tǒng)方法1 1、把某種抗原反復(fù)注射到動(dòng)物體內(nèi)，然后、把某種抗原反復(fù)注射到動(dòng)物體內(nèi)，然后從動(dòng)物血清中分離出所需的抗體。從動(dòng)物血清中分離出所需的抗體。 產(chǎn)量低，純度低，產(chǎn)量低，純度低，特異性差特異性差。2、缺點(diǎn)：、缺點(diǎn)：人們發(fā)現(xiàn)，在動(dòng)物發(fā)生免疫反應(yīng)的過(guò)程中，人們發(fā)現(xiàn)，在動(dòng)物發(fā)生免疫反應(yīng)的過(guò)程中，體內(nèi)的體內(nèi)的B B淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生多達(dá)百萬(wàn)種以上淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生多達(dá)百萬(wàn)種以上的特異性抗體，但是每一個(gè)的特異性抗體，但是每一個(gè)B B細(xì)胞只分泌一細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。要

8、想獲得大量的單一抗體，種特異性抗體。要想獲得大量的單一抗體，必須克隆單一的必須克隆單一的B B淋巴細(xì)胞，形成細(xì)胞群淋巴細(xì)胞，形成細(xì)胞群。 1 1、請(qǐng)從以上文字資料中找出單克隆抗體的概念、請(qǐng)從以上文字資料中找出單克隆抗體的概念用單個(gè)用單個(gè)B B淋巴細(xì)胞進(jìn)行克隆，得到的細(xì)胞群能夠分淋巴細(xì)胞進(jìn)行克隆，得到的細(xì)胞群能夠分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體，這種抗體泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體，這種抗體就叫做單克隆抗體。就叫做單克隆抗體。遺憾的是，在體外培養(yǎng)條件下，單個(gè)遺憾的是，在體外培養(yǎng)條件下，單個(gè)B B淋巴細(xì)胞是不可能無(wú)淋巴細(xì)胞是不可能無(wú)限增殖的限增殖的探索探索2 2、怎樣才能獲得單克隆抗體？

9、、怎樣才能獲得單克隆抗體？提示提示1 1：僅用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可行嗎？：僅用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可行嗎？提示提示2 2：我們所學(xué)的哪種細(xì)胞是可以無(wú)限增：我們所學(xué)的哪種細(xì)胞是可以無(wú)限增殖的？殖的？提示提示3 3：有什么方法能使：有什么方法能使B B細(xì)胞產(chǎn)生抗體的能細(xì)胞產(chǎn)生抗體的能力和腫瘤細(xì)胞無(wú)限增殖能力同時(shí)具備呢？力和腫瘤細(xì)胞無(wú)限增殖能力同時(shí)具備呢？如何大量生產(chǎn)單克隆抗體？如何大量生產(chǎn)單克隆抗體？利用利用B B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體的功能。淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體的功能。利用腫瘤細(xì)胞無(wú)限增殖的特性。利用腫瘤細(xì)胞無(wú)限增殖的特性。利用細(xì)胞融合的技術(shù)將兩種細(xì)胞融合利用細(xì)胞融合的技術(shù)將兩種細(xì)胞融合獲得具有獲得具有B B淋巴細(xì)胞和

10、腫瘤細(xì)胞特性的淋巴細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞特性的雜交瘤細(xì)胞。雜交瘤細(xì)胞。利用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)大量培養(yǎng)雜交利用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)大量培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞。瘤細(xì)胞。雜交瘤細(xì)胞既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生雜交瘤細(xì)胞既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專一抗體。專一抗體。 單克隆抗體的制備單克隆抗體的制備整個(gè)制備過(guò)程為何要經(jīng)過(guò)整個(gè)制備過(guò)程為何要經(jīng)過(guò)兩次篩選兩次篩選? ?第一次篩選：第一次篩選：用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出多種用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出多種雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞第二次篩選第二次篩選（克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)）：（克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)）：篩選篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。概念：概念： 由單個(gè)雜交瘤

11、細(xì)胞由單個(gè)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行無(wú)性繁殖進(jìn)行無(wú)性繁殖, ,也就是通過(guò)也就是通過(guò)克隆，形成細(xì)胞群，這一細(xì)胞群所產(chǎn)生的克隆，形成細(xì)胞群，這一細(xì)胞群所產(chǎn)生的化學(xué)化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體稱為單克隆抗體。稱為單克隆抗體。 （三）（三）單克隆抗體的應(yīng)用單克隆抗體的應(yīng)用 與常規(guī)抗體相比，與常規(guī)抗體相比，單克隆抗體特異性強(qiáng)，單克隆抗體特異性強(qiáng)，靈敏度高靈敏度高，并，并可大量制備可大量制備。應(yīng)用主要有：應(yīng)用主要有：1 1、作為診斷試劑、作為診斷試劑2 2、用于、用于治療疾病治療疾病和運(yùn)載藥物和運(yùn)載藥物準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速 把抗癌細(xì)胞的單克隆抗體與藥物相結(jié)合，把抗癌細(xì)胞

12、的單克隆抗體與藥物相結(jié)合，制成制成“生物導(dǎo)彈生物導(dǎo)彈”。 資料資料： 目前世界各國(guó)已經(jīng)研制出數(shù)以百計(jì)的單克目前世界各國(guó)已經(jīng)研制出數(shù)以百計(jì)的單克隆抗體。許多缺乏良好診斷手段的傳染病、免隆抗體。許多缺乏良好診斷手段的傳染病、免疫性疾病、血液病、內(nèi)分泌疾病和遺傳病，用疫性疾病、血液病、內(nèi)分泌疾病和遺傳病，用單克隆抗體作為診斷手段，是一個(gè)必然趨勢(shì)。單克隆抗體作為診斷手段，是一個(gè)必然趨勢(shì)。另外，用單克隆抗體做體內(nèi)診斷，借以鑒別和另外，用單克隆抗體做體內(nèi)診斷，借以鑒別和定位體內(nèi)定位體內(nèi)“病灶病灶”也引起人們的注意，目前，也引起人們的注意，目前，主要用于腫瘤追蹤及心肌梗塞的診斷。主要用于腫瘤追蹤及心肌梗塞的診斷。