龍門亮劍高三一輪人教版生物 選1全套PPT

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1、 選修選修1 生物技術實踐生物技術實踐 (1)運用發(fā)酵加工食品的基本方法運用發(fā)酵加工食品的基本方法(2)測定食品加工中可能產(chǎn)生的有害物質(zhì)測定食品加工中可能產(chǎn)生的有害物質(zhì)(1)制作果酒和果醋的基本原理和方法,以及制作果酒和果醋的基本原理和方法,以及發(fā)酵的條件發(fā)酵的條件(2)設計安裝簡單的生產(chǎn)果酒、果醋的裝置設計安裝簡單的生產(chǎn)果酒、果醋的裝置(3)能運用腐乳制作的原理和方法設計方案,能運用腐乳制作的原理和方法設計方案,選擇材料并制鹵湯,完成腐乳制作,評價質(zhì)選擇材料并制鹵湯,完成腐乳制作,評價質(zhì)量。設計方案、選擇材料、完成泡菜制作,量。設計方案、選擇材料、完成泡菜制作,運用比色法測定泡菜中亞硝酸鹽的

2、含量運用比色法測定泡菜中亞硝酸鹽的含量一、與傳統(tǒng)發(fā)酵有關的幾類微生物的比較一、與傳統(tǒng)發(fā)酵有關的幾類微生物的比較酵母菌酵母菌醋酸菌醋酸菌 毛霉毛霉乳酸菌乳酸菌生物學生物學分類分類真核生物真核生物原核生原核生物物真核真核生物生物原核生物原核生物生活生活方式方式異養(yǎng)兼異養(yǎng)兼性厭氧性厭氧異養(yǎng)需異養(yǎng)需氧氧異養(yǎng)異養(yǎng)需氧需氧異養(yǎng)厭氧異養(yǎng)厭氧酵母菌酵母菌醋酸菌醋酸菌毛霉毛霉乳酸菌乳酸菌適宜適宜溫度溫度20 左右左右3035 1518 室溫室溫主要生主要生殖方式殖方式出芽生殖出芽生殖二分裂二分裂生殖生殖孢子生孢子生殖殖二分裂二分裂生殖生殖主要主要用途用途釀酒、發(fā)釀酒、發(fā)面面釀醋釀醋制作腐制作腐乳乳制作酸制作酸奶

3、、泡菜奶、泡菜由于醋酸菌和乳酸菌屬于原核生物,因此在由于醋酸菌和乳酸菌屬于原核生物,因此在利用這兩類微生物時,其環(huán)境中一定不要加利用這兩類微生物時,其環(huán)境中一定不要加入青霉素等抗生素。入青霉素等抗生素。二、亞硝酸鹽二、亞硝酸鹽1與人體健康的關系與人體健康的關系(1)在膳食中普遍存在,在人體內(nèi)以在膳食中普遍存在,在人體內(nèi)以“過客過客”的形式隨尿排出,但當攝入總量較多時,可的形式隨尿排出,但當攝入總量較多時,可引起中毒或死亡。引起中毒或死亡。(2)亞硝酸鹽在一定條件下可轉(zhuǎn)化為能致癌、亞硝酸鹽在一定條件下可轉(zhuǎn)化為能致癌、致畸和致突變物質(zhì)致畸和致突變物質(zhì)亞硝胺。亞硝胺。2含量的測定含量的測定(1)原理

4、:在鹽酸酸化條件下,亞硝酸鹽與對原理:在鹽酸酸化條件下,亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應后,與氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應后,與N1萘萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料,通基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料,通過目測比較,大致估算其含量。過目測比較,大致估算其含量。(2)測定操作:配制溶液測定操作:配制溶液制備標準顯色液制備標準顯色液制備樣品處理液制備樣品處理液比色。比色。3測定亞硝酸鹽含量的注意事項測定亞硝酸鹽含量的注意事項(1)標準顯色液、樣品處理液的制備中計量要標準顯色液、樣品處理液的制備中計量要精確。精確。(2)制備樣品處理液時,氫氧化鋁乳液的作用制備樣品處理液時,氫氧化鋁乳液的作用

5、是吸附樣品濾液中的雜質(zhì),使濾液變得無色是吸附樣品濾液中的雜質(zhì),使濾液變得無色透明,便于觀察顏色變化。透明,便于觀察顏色變化。二、果酒、果醋、腐乳及泡菜的制作原理及二、果酒、果醋、腐乳及泡菜的制作原理及過程過程果酒和果醋的果酒和果醋的制作制作腐乳的制腐乳的制作作泡菜的泡菜的制作制作主要菌種主要菌種果酒:酵母菌果酒:酵母菌果醋:醋酸菌果醋:醋酸菌毛霉等毛霉等乳酸菌乳酸菌注意的問題注意的問題1. 材料的選擇材料的選擇與處理與處理2. 防止發(fā)酵液防止發(fā)酵液被污染被污染3. 控制好發(fā)酵控制好發(fā)酵的條件的條件1. 控制好材控制好材料的用量料的用量2. 防止雜菌防止雜菌污染污染1.泡菜壇泡菜壇的選擇的選擇2

6、.腌制的腌制的條件條件果酒、果醋制作過程中防止雜菌污染的措施:果酒、果醋制作過程中防止雜菌污染的措施:榨汁機和發(fā)酵瓶等都需清洗干凈,且發(fā)酵榨汁機和發(fā)酵瓶等都需清洗干凈,且發(fā)酵瓶要進行消毒。瓶要進行消毒。清洗葡萄時要先清洗后除枝梗。清洗葡萄時要先清洗后除枝梗。發(fā)酵瓶排氣管用曲頸管不用直管。發(fā)酵瓶排氣管用曲頸管不用直管。 生物技術在食品加工中生物技術在食品加工中的應用十分廣泛,如果酒、果醋、的應用十分廣泛,如果酒、果醋、腐乳、泡菜就是生活中常見的例腐乳、泡菜就是生活中常見的例子。右圖是果酒制果醋的發(fā)酵裝子。右圖是果酒制果醋的發(fā)酵裝置,分析回答下列問題:置,分析回答下列問題:(1)果酒制作的原材料通

7、常是葡萄,但對葡萄果酒制作的原材料通常是葡萄,但對葡萄不能進行反復沖洗,其原因是不能進行反復沖洗,其原因是_。(2)在圖乙中遺漏了一個裝置,請以文字加以在圖乙中遺漏了一個裝置,請以文字加以補充補充_。(3)如果將該裝置改為酒精的發(fā)酵裝置,則溫如果將該裝置改為酒精的發(fā)酵裝置,則溫度應該控制在度應該控制在_。此時裝置需要修改的。此時裝置需要修改的地方是地方是_。果酒制果醋的反應式。果酒制果醋的反應式為:為:_。(4)在果醋發(fā)酵過程中,用在果醋發(fā)酵過程中,用_檢測是否有醋酸檢測是否有醋酸生成。生成。【解析】【解析】(1)果酒是以葡萄為原料,通過酵果酒是以葡萄為原料,通過酵母菌發(fā)酵獲得的,而酵母菌主要

8、存在于果實的母菌發(fā)酵獲得的,而酵母菌主要存在于果實的表面,所以不能對葡萄進行反復沖洗。表面,所以不能對葡萄進行反復沖洗。(2)乙裝置沒有排氣管道,所以應添加排氣口,乙裝置沒有排氣管道,所以應添加排氣口,并連上一根長而彎曲的管子,保證酵母菌開始并連上一根長而彎曲的管子,保證酵母菌開始時進行有氧呼吸。時進行有氧呼吸。(3)酵母菌生產(chǎn)酒精需進行無氧呼吸,所以生酵母菌生產(chǎn)酒精需進行無氧呼吸,所以生產(chǎn)酒精不需通入空氣。酶的活性在產(chǎn)酒精不需通入空氣。酶的活性在1825時時最高,所以裝置中溫度控制在最高,所以裝置中溫度控制在1825。(4)用用pH試紙檢測裝置中培養(yǎng)液的試紙檢測裝置中培養(yǎng)液的pH,以檢測,以

9、檢測是否有醋酸生成。是否有醋酸生成?!敬鸢浮俊敬鸢浮?1)葡萄上存在酵母菌,反復沖洗,葡萄上存在酵母菌,反復沖洗,會洗去大量的酵母菌,不利于酒精發(fā)酵會洗去大量的酵母菌,不利于酒精發(fā)酵(2)缺少一個排氣口,應補上一個排氣口裝置,缺少一個排氣口,應補上一個排氣口裝置,并連上一根長而彎曲的管子并連上一根長而彎曲的管子(3)1825不需要通入空氣不需要通入空氣C2H5OH+O2CH3COOH+H2O(4)pH試紙試紙明確果酒、果醋制作所需菌種的代謝類型是明確果酒、果醋制作所需菌種的代謝類型是解答此類題目的關鍵。制作果酒用酵母菌,解答此類題目的關鍵。制作果酒用酵母菌,需先通氣后密封,而制作果醋需始終有氧

10、氣需先通氣后密封,而制作果醋需始終有氧氣存在。存在。 (2010年山東省濰坊市模擬年山東省濰坊市模擬)農(nóng)村中泡農(nóng)村中泡菜的制作方法是:新鮮的蔬菜經(jīng)過整理、清菜的制作方法是:新鮮的蔬菜經(jīng)過整理、清潔后,放入徹底清洗并用白酒擦拭過的泡菜潔后,放入徹底清洗并用白酒擦拭過的泡菜壇中,然后向壇中加入鹽水、香辛料及一些壇中,然后向壇中加入鹽水、香辛料及一些“陳泡菜水陳泡菜水”。密封后置于陰涼處,最適環(huán)。密封后置于陰涼處,最適環(huán)境溫度為境溫度為2830 。有時制作的泡菜會。有時制作的泡菜會“咸咸而不酸而不酸”或或“酸而不咸酸而不咸”,前者是用鹽過多,前者是用鹽過多,后者是用鹽過少。在實驗室或工廠化生產(chǎn)泡后者

11、是用鹽過少。在實驗室或工廠化生產(chǎn)泡菜時,還要跟蹤檢測泡菜腌制過程中產(chǎn)生的菜時,還要跟蹤檢測泡菜腌制過程中產(chǎn)生的亞硝酸鹽含量。亞硝酸鹽含量。(1)用白酒擦拭泡菜壇的目的是用白酒擦拭泡菜壇的目的是_。(2)菜壇為什么要密封?若菜壇有裂縫,可能菜壇為什么要密封?若菜壇有裂縫,可能會出現(xiàn)什么結(jié)果?會出現(xiàn)什么結(jié)果?_。(3)加入加入“陳泡菜水陳泡菜水”的作用是的作用是_。(4)制作泡菜的過程中,有機物的干重如何變制作泡菜的過程中,有機物的干重如何變化?菜壇內(nèi)有機物的種類如何變化?化?菜壇內(nèi)有機物的種類如何變化?_。(5)若要獲得大量乳酸菌菌種,應選用培養(yǎng)基若要獲得大量乳酸菌菌種,應選用培養(yǎng)基培養(yǎng),培養(yǎng)基

12、中應用培養(yǎng),培養(yǎng)基中應用_、_、_、_和和_五大營養(yǎng)物五大營養(yǎng)物質(zhì),同時還需適宜的條件,主要有質(zhì),同時還需適宜的條件,主要有_、_?!窘馕觥俊窘馕觥颗莶酥谱魇菓昧巳樗峋陌l(fā)酵泡菜制作是應用了乳酸菌的發(fā)酵原理,提供的新鮮蔬菜是它的培養(yǎng)基。乳酸原理,提供的新鮮蔬菜是它的培養(yǎng)基。乳酸菌是厭氧型微生物,在缺氧的環(huán)境條件下發(fā)菌是厭氧型微生物,在缺氧的環(huán)境條件下發(fā)酵可產(chǎn)生大量乳酸,能抑制其他厭氧菌的生酵可產(chǎn)生大量乳酸,能抑制其他厭氧菌的生存;在有氧情況下,自身受抑制,不能進行存;在有氧情況下,自身受抑制,不能進行乳酸發(fā)酵,使需氧菌繁殖而變質(zhì)。乳酸菌生乳酸發(fā)酵,使需氧菌繁殖而變質(zhì)。乳酸菌生長繁殖需要消耗有

13、機物,發(fā)酵過程中會產(chǎn)生長繁殖需要消耗有機物,發(fā)酵過程中會產(chǎn)生更多種類的有機物。更多種類的有機物。乳酸菌屬異養(yǎng)厭氧型,培養(yǎng)基中應有碳乳酸菌屬異養(yǎng)厭氧型,培養(yǎng)基中應有碳源、氮源、生長因子、水、無機鹽五大源、氮源、生長因子、水、無機鹽五大營養(yǎng)物質(zhì),需要的培養(yǎng)條件主要有適宜營養(yǎng)物質(zhì),需要的培養(yǎng)條件主要有適宜的溫度的溫度(28 30 )、無氧環(huán)境,這樣、無氧環(huán)境,這樣菌種才能大量增殖。菌種才能大量增殖?!敬鸢浮俊敬鸢浮?(1)消毒消毒(2)乳酸菌是厭氧型微乳酸菌是厭氧型微生物。密封后造成缺氧環(huán)境;菜壇有裂縫,生物。密封后造成缺氧環(huán)境;菜壇有裂縫,將導致乳酸菌不能正常生長,而一些雜菌大將導致乳酸菌不能正常

14、生長,而一些雜菌大量繁殖,泡菜會變質(zhì)量繁殖,泡菜會變質(zhì)(3)提供乳酸菌菌種提供乳酸菌菌種(4)有機物干重減少;種類增加有機物干重減少;種類增加(5)碳源氮碳源氮源生長因子水無機鹽適宜的溫度源生長因子水無機鹽適宜的溫度無氧環(huán)境無氧環(huán)境1(2008年江蘇卷年江蘇卷)下列關于腐乳制作的述中,下列關于腐乳制作的述中,錯誤的是錯誤的是()A在腐乳制作過程中必須有能產(chǎn)生蛋白酶的在腐乳制作過程中必須有能產(chǎn)生蛋白酶的微生物參與微生物參與B含水量大于含水量大于85%的豆腐利于保持濕度,適的豆腐利于保持濕度,適宜制作腐乳宜制作腐乳C加鹽和加酒都能抑制微生物的生長加鹽和加酒都能抑制微生物的生長D密封瓶口前最好將瓶口

15、通過火焰以防雜菌密封瓶口前最好將瓶口通過火焰以防雜菌污染污染【解析】【解析】腐乳的制作原理是利用毛霉等微腐乳的制作原理是利用毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶和脂肪酶將豆腐中的蛋白生物產(chǎn)生的蛋白酶和脂肪酶將豆腐中的蛋白質(zhì)和脂肪分解成小分子的肽、氨基酸和甘油、質(zhì)和脂肪分解成小分子的肽、氨基酸和甘油、脂肪酸。一般說來,含水量為脂肪酸。一般說來,含水量為70%的豆腐最的豆腐最為適宜,水分過多則腐乳不易成形,而且會為適宜,水分過多則腐乳不易成形,而且會影響醋酸菌的有氧呼吸。影響醋酸菌的有氧呼吸?!敬鸢浮俊敬鸢浮緽2(2008年江蘇卷年江蘇卷)圖甲是果醋發(fā)酵裝置。發(fā)圖甲是果醋發(fā)酵裝置。發(fā)酵初期不通氣,溶液中有氣泡

16、產(chǎn)生;中期可酵初期不通氣,溶液中有氣泡產(chǎn)生;中期可以聞到酒香;后期接種醋酸菌,適當升高溫以聞到酒香;后期接種醋酸菌,適當升高溫度并通氣,酒香逐漸變成醋香。圖乙中能表度并通氣,酒香逐漸變成醋香。圖乙中能表示整個發(fā)酵過程培養(yǎng)液示整個發(fā)酵過程培養(yǎng)液pH變化的曲線是變化的曲線是()ABC D【解析】【解析】在果醋發(fā)酵過程中,首先瓶中進在果醋發(fā)酵過程中,首先瓶中進行的是有氧呼吸產(chǎn)生行的是有氧呼吸產(chǎn)生CO2,使,使pH下降;一段下降;一段時間后氧氣消耗殆盡開始進行無氧呼吸,也時間后氧氣消耗殆盡開始進行無氧呼吸,也可產(chǎn)生可產(chǎn)生CO2,使,使pH下降;最后進行醋酸發(fā)酵下降;最后進行醋酸發(fā)酵生成醋酸,會使生成醋

17、酸,會使pH迅速下降,所以培養(yǎng)液中迅速下降,所以培養(yǎng)液中pH一直降低,如曲線一直降低,如曲線所示。所示?!敬鸢浮俊敬鸢浮緽3(2007年山東高考年山東高考)乙醇等乙醇等“綠色能源綠色能源”的的開發(fā)備受世界關注。利用玉米秸稈生產(chǎn)燃料開發(fā)備受世界關注。利用玉米秸稈生產(chǎn)燃料酒精的大致流程為:酒精的大致流程為:(1)玉米秸稈經(jīng)預處理后,應該選用玉米秸稈經(jīng)預處理后,應該選用_酶進行水解,使之轉(zhuǎn)化為發(fā)酵所需的葡萄糖。酶進行水解,使之轉(zhuǎn)化為發(fā)酵所需的葡萄糖。(2)從以下哪些微生物中可以提取上述酶?從以下哪些微生物中可以提取上述酶?(多多選選)_。A釀制果醋的醋酸菌釀制果醋的醋酸菌B生長在腐木上的霉菌生長在腐

18、木上的霉菌C制作酸奶的乳酸菌制作酸奶的乳酸菌D生產(chǎn)味精的谷氨酸棒狀桿菌生產(chǎn)味精的谷氨酸棒狀桿菌E反芻動物瘤胃中生存的某些微生物反芻動物瘤胃中生存的某些微生物(3)若從土壤中分離出產(chǎn)生這種酶的微生物,若從土壤中分離出產(chǎn)生這種酶的微生物,所需要的培養(yǎng)基為所需要的培養(yǎng)基為_(按功能分按功能分),培養(yǎng)基中的碳源為培養(yǎng)基中的碳源為_。(4)從生物體內(nèi)提取出的酶首先要檢測從生物體內(nèi)提取出的酶首先要檢測_,以便更好地將酶用于生產(chǎn)實踐。,以便更好地將酶用于生產(chǎn)實踐。在生產(chǎn)糖液的過程中,為了使酶能夠被反復在生產(chǎn)糖液的過程中,為了使酶能夠被反復利用,可采用利用,可采用_技術。技術。(5)發(fā)酵階段需要的菌種是發(fā)酵階

19、段需要的菌種是_,在產(chǎn)生,在產(chǎn)生酒精時要控制的必要條件是酒精時要控制的必要條件是_?!窘馕觥俊窘馕觥坑衩椎慕斩捴饕衫w維素構(gòu)成,玉米的秸稈主要由纖維素構(gòu)成,可利用纖維素酶將其轉(zhuǎn)化為葡萄糖。根據(jù)微可利用纖維素酶將其轉(zhuǎn)化為葡萄糖。根據(jù)微生物的利用物質(zhì)和生活習性,可分析出生活生物的利用物質(zhì)和生活習性,可分析出生活在腐木上的霉菌可分解利用木纖維,反芻動在腐木上的霉菌可分解利用木纖維,反芻動物瘤胃中生存的某些微生物可分解利用植物物瘤胃中生存的某些微生物可分解利用植物纖維,二者是提取纖維素酶的理想材料。從纖維,二者是提取纖維素酶的理想材料。從微生物群體中選擇具有特定表型的細胞,使微生物群體中選擇具有特定表

20、型的細胞,使之進行繁殖所用的培養(yǎng)基稱為選擇培養(yǎng)基。之進行繁殖所用的培養(yǎng)基稱為選擇培養(yǎng)基。固定化細胞與固定化酶技術一起組成了現(xiàn)代固定化細胞與固定化酶技術一起組成了現(xiàn)代的固定化生物催化劑技術,可反復利用,并的固定化生物催化劑技術,可反復利用,并利于與產(chǎn)物分離。利于與產(chǎn)物分離。酵母菌既可進行有氧呼吸,又可進行無氧呼酵母菌既可進行有氧呼吸,又可進行無氧呼吸。有氧呼吸時,把葡萄糖氧化分解為水和吸。有氧呼吸時,把葡萄糖氧化分解為水和二氧化碳,釋放大量能量二氧化碳,釋放大量能量(此時是酵母菌大量此時是酵母菌大量繁殖的時候繁殖的時候);無氧呼吸時,把葡萄糖氧化分;無氧呼吸時,把葡萄糖氧化分解為酒精,釋放少量能

21、量解為酒精,釋放少量能量(用于釀酒用于釀酒)。【答案】【答案】(1)纖維素纖維素(2)BE(3)選擇培養(yǎng)選擇培養(yǎng)基纖維素基纖維素(4)酶的活力酶的活力(活性活性)固定化酶固定化酶(固定化細胞固定化細胞)(5)酵母菌無氧酵母菌無氧(密閉或密封密閉或密封)(1)微生物的分離與培養(yǎng)微生物的分離與培養(yǎng)(2)某種微生物數(shù)量的測定某種微生物數(shù)量的測定(3)培養(yǎng)基對微生物的選擇作用培養(yǎng)基對微生物的選擇作用(4)利用微生物發(fā)酵來生產(chǎn)特定的產(chǎn)物以及微利用微生物發(fā)酵來生產(chǎn)特定的產(chǎn)物以及微生物在其他方面的應用生物在其他方面的應用(1)培養(yǎng)基的種類、營養(yǎng)要求及配制原則培養(yǎng)基的種類、營養(yǎng)要求及配制原則(2)無菌技術的內(nèi)

22、容及方法無菌技術的內(nèi)容及方法(3)分離純化微生物的研究思路、方法分離純化微生物的研究思路、方法一、微生物的實驗室培養(yǎng)一、微生物的實驗室培養(yǎng)1培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成營養(yǎng)營養(yǎng)物質(zhì)物質(zhì)定義定義作用作用主要來源主要來源碳源碳源能提供碳元能提供碳元素的物質(zhì)素的物質(zhì)構(gòu)成生物體的物構(gòu)成生物體的物質(zhì),異養(yǎng)生物的質(zhì),異養(yǎng)生物的能源物質(zhì)能源物質(zhì)無機物:無機物:CO2、NaHCO3有機物:糖類、有機物:糖類、脂肪酸、石油、脂肪酸、石油、花生粉餅等花生粉餅等營養(yǎng)營養(yǎng)物質(zhì)物質(zhì)定義定義作用作用主要來源主要來源氮源氮源能提供氮元素能提供氮元素的物質(zhì)的物質(zhì)合成蛋白質(zhì)、合成蛋白質(zhì)、核酸以及含氮核酸以及含氮代謝產(chǎn)物代謝

23、產(chǎn)物無機物:無機物:N2、NH3、氨鹽、氨鹽、硝酸鹽硝酸鹽有機物:尿素、有機物:尿素、牛肉膏、蛋白牛肉膏、蛋白胨等胨等生長生長因子因子生長不可缺少生長不可缺少的微量有機物的微量有機物酶和核酸的成酶和核酸的成分分維生素、氨基維生素、氨基酸、堿基等酸、堿基等(1)微生物最常利用的碳源是糖類微生物最常利用的碳源是糖類(特別是葡萄特別是葡萄糖糖),常利用的氮源是氨鹽、硝酸鹽。,常利用的氮源是氨鹽、硝酸鹽。(2)在微生物所需要的化合物中需要量最大的在微生物所需要的化合物中需要量最大的是碳源。是碳源。(3)微生物之所以需要補充生長因子,是由于微生物之所以需要補充生長因子,是由于缺乏合成這些物質(zhì)所需要的酶或

24、合成能力有缺乏合成這些物質(zhì)所需要的酶或合成能力有限。限。2大腸桿菌的純化大腸桿菌的純化大腸桿菌的純化培養(yǎng),包括培養(yǎng)基的配制和大腸桿菌的純化培養(yǎng),包括培養(yǎng)基的配制和純化大腸桿菌兩個階段。純化大腸桿菌兩個階段。(1)培養(yǎng)基的配制流程培養(yǎng)基的配制流程(以牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基以牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基為例為例)計算:根據(jù)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基配方的比計算:根據(jù)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基配方的比例,計算配制例,計算配制100 mL的培養(yǎng)基時,各種成分的培養(yǎng)基時,各種成分的用量。的用量。稱量:準確地稱取各種成分。稱量:準確地稱取各種成分。溶化:先將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同溶化:先將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯,加入少

25、量的水加熱。當牛肉膏溶放入燒杯,加入少量的水加熱。當牛肉膏溶化并與稱量紙分離后,用玻璃棒取出稱量紙?;⑴c稱量紙分離后,用玻璃棒取出稱量紙。然后往燒杯中加入蛋白胨和氯化鈉,最后加然后往燒杯中加入蛋白胨和氯化鈉,最后加入瓊脂,加熱使其熔化。在此過程中不斷用入瓊脂,加熱使其熔化。在此過程中不斷用玻璃棒攪拌,防止瓊脂糊底而導致燒杯破裂。玻璃棒攪拌,防止瓊脂糊底而導致燒杯破裂。當瓊脂完全熔化后,補加蒸餾水至當瓊脂完全熔化后,補加蒸餾水至100 mL。滅菌:將配制好的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到錐形瓶中滅菌:將配制好的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到錐形瓶中加棉塞包好,放入高壓滅菌鍋,在壓力為加棉塞包好,放入高壓滅菌鍋,在壓力為100 k

26、Pa、溫度為、溫度為121 條件下,滅菌條件下,滅菌1530 min。將培養(yǎng)皿包好后放入干熱滅菌箱內(nèi),在將培養(yǎng)皿包好后放入干熱滅菌箱內(nèi),在160170 下滅菌下滅菌2 h。倒平板:等培養(yǎng)基冷卻至倒平板:等培養(yǎng)基冷卻至50 左右時,在左右時,在酒精燈火焰附近倒平板。酒精燈火焰附近倒平板。(2)純化大腸桿菌純化大腸桿菌平板劃線法:通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)平板劃線法:通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作,將聚集的菌種逐步基表面連續(xù)劃線的操作,將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后培稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后培養(yǎng),可以分離到由一個細胞繁殖而來的肉眼養(yǎng),可以分離到由一個細

27、胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體,這就是菌落。可見的子細胞群體,這就是菌落。稀釋涂布平板法:將菌液進行一系列的梯稀釋涂布平板法:將菌液進行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面,進行培養(yǎng)。在稀到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面,進行培養(yǎng)。在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞,從而能在培養(yǎng)基表面將被分散成單個細胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落。形成單個的菌落。(3)培養(yǎng):將接種后的培養(yǎng)基和一個未接種的培養(yǎng):將接種后的培養(yǎng)基和一個未接種的培養(yǎng)基培養(yǎng)基(對照組對照組)都放入都放

28、入37 恒溫箱中,培養(yǎng)恒溫箱中,培養(yǎng)12 h和和24 h后,分別觀察并記錄結(jié)果。后,分別觀察并記錄結(jié)果。3無菌技術無菌技術(1)消毒和滅菌的區(qū)別消毒和滅菌的區(qū)別條件條件結(jié)果結(jié)果常用的方法常用的方法消消毒毒較為溫和的較為溫和的物理或化學物理或化學方法方法僅殺死物體表面僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對或內(nèi)部一部分對人體有害的微生人體有害的微生物物(不包括芽孢和不包括芽孢和孢子孢子)煮沸消毒法、巴煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外氏消毒法、紫外線或化學藥物消線或化學藥物消毒法毒法滅滅菌菌強烈的理化強烈的理化因素因素殺死物體內(nèi)外所殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包有的微生物,包括芽孢和孢子括芽孢和孢子灼燒滅菌、干熱灼

29、燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌、高壓蒸汽滅菌滅菌酒精消毒時,酒精消毒時,70%的酒精殺菌效果最好,原的酒精殺菌效果最好,原因是:濃度過高,使菌體表面蛋白質(zhì)凝固成因是:濃度過高,使菌體表面蛋白質(zhì)凝固成一層保護膜,乙醇分子不能滲入其中;濃度一層保護膜,乙醇分子不能滲入其中;濃度過低,殺菌力減弱。過低,殺菌力減弱。(2)無菌技術主要操作要求無菌技術主要操作要求實驗前應對操作空間、操作人員消毒,對實驗前應對操作空間、操作人員消毒,對所有器具和培養(yǎng)基滅菌。所有器具和培養(yǎng)基滅菌。實驗進行時需在酒精燈火焰周圍無菌區(qū)操實驗進行時需在酒精燈火焰周圍無菌區(qū)操作,另外要避免已滅菌處理材料再次污染。作,另外要避免已滅

30、菌處理材料再次污染。二、土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)二、土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)1選擇合適的培養(yǎng)基選擇合適的培養(yǎng)基(1)根據(jù)培養(yǎng)基的用途可分為選擇培養(yǎng)基和鑒根據(jù)培養(yǎng)基的用途可分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基別培養(yǎng)基培養(yǎng)基培養(yǎng)基種類種類特點特點用途用途選擇培選擇培養(yǎng)基養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某種化培養(yǎng)基中加入某種化學物質(zhì),以抑制不需學物質(zhì),以抑制不需要的微生物的生長,要的微生物的生長,促進所需要的微生物促進所需要的微生物的生長的生長培養(yǎng)、分離出特定微培養(yǎng)、分離出特定微生物生物(如培養(yǎng)酵母菌和如培養(yǎng)酵母菌和霉菌,可在培養(yǎng)基中霉菌,可在培養(yǎng)基中加入青霉素;用尿素加入青霉素;用尿素作為唯一氮源的培養(yǎng)作為

31、唯一氮源的培養(yǎng)基用于分離分解尿素基用于分離分解尿素的細菌的細菌)(2)分離分解尿素的細菌的培養(yǎng)基即為選分離分解尿素的細菌的培養(yǎng)基即為選擇培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中的氮源只有尿素,理論擇培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中的氮源只有尿素,理論上只有能合成脲酶的微生物才能在上面生長。上只有能合成脲酶的微生物才能在上面生長。培養(yǎng)培養(yǎng)基種基種類類特點特點用途用途鑒別鑒別培養(yǎng)培養(yǎng)基基根據(jù)微生物的代根據(jù)微生物的代謝特點,在培養(yǎng)謝特點,在培養(yǎng)基中加入某種指基中加入某種指示劑或化學藥品示劑或化學藥品鑒別不同種類的微生物,如鑒別不同種類的微生物,如可用伊紅可用伊紅美藍培養(yǎng)基鑒別美藍培養(yǎng)基鑒別飲用水或乳制品中是否有大飲用水或乳制品中是否有大腸

32、桿菌腸桿菌(若有,菌落呈深紫色,若有,菌落呈深紫色,并帶有金屬光澤并帶有金屬光澤)2統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法(1)顯微鏡直接計數(shù)法顯微鏡直接計數(shù)法原理:利用特定細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)原理:利用特定細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板,在顯微鏡下計一定容積的樣品中微生物板,在顯微鏡下計一定容積的樣品中微生物數(shù)量。數(shù)量。方法:用計數(shù)板計數(shù)。方法:用計數(shù)板計數(shù)。缺點:不能區(qū)分死菌與活菌。缺點:不能區(qū)分死菌與活菌。(2)間接計數(shù)法間接計數(shù)法(活菌計數(shù)法活菌計數(shù)法)原理:當樣品的稀釋度足夠高時,培養(yǎng)基原理:當樣品的稀釋度足夠高時,培養(yǎng)基表面生長的一個菌落,來源于樣品稀釋液中表面生長的一個菌落,來源于樣品

33、稀釋液中的一個活菌,通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù),就的一個活菌,通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù),就能推測出樣品中大約含有多少活菌。能推測出樣品中大約含有多少活菌。操作操作a設置重復組,增強實驗的說服力與準確性。設置重復組,增強實驗的說服力與準確性。b為了保證結(jié)果準確,一般選擇菌落數(shù)在為了保證結(jié)果準確,一般選擇菌落數(shù)在30300的平板進行計數(shù)。的平板進行計數(shù)。計算公式:每克樣品中的菌株數(shù)計算公式:每克樣品中的菌株數(shù) ,其中其中C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù),數(shù),V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積代表涂布平板時所用的稀釋液的體積(mL),M代表稀釋倍數(shù)。代表稀釋倍數(shù)

34、。3細菌分離與計數(shù)的實驗流程細菌分離與計數(shù)的實驗流程土壤取樣土壤取樣樣品稀釋樣品稀釋取樣涂布取樣涂布微生物微生物培養(yǎng)培養(yǎng)觀察并記錄結(jié)果觀察并記錄結(jié)果細菌計數(shù)細菌計數(shù)三、分解纖維素的微生物的分離三、分解纖維素的微生物的分離1纖維素酶纖維素酶是一種復合酶,它包括是一種復合酶,它包括C1酶、酶、Cx酶和葡萄糖酶和葡萄糖苷酶,前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖,苷酶,前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖,第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。2纖維素分解菌的篩選原理纖維素分解菌的篩選原理(1)剛果紅可以與纖維素形成紅色復合物,但剛果紅可以與纖維素形成紅色復合物,但并不和水解后的纖維二糖

35、和葡萄糖發(fā)生這種并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應。反應。(2)纖維素分解菌能產(chǎn)生纖維素酶分解纖維素,纖維素分解菌能產(chǎn)生纖維素酶分解纖維素,從而使菌落周圍形成透明圈。從而使菌落周圍形成透明圈。3土壤中纖維素分解菌的篩選土壤中纖維素分解菌的篩選(1)方案方案土壤取樣土壤取樣選擇培養(yǎng)選擇培養(yǎng)梯度稀釋梯度稀釋將樣品涂布將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上挑選產(chǎn)生透挑選產(chǎn)生透明圈的菌落。明圈的菌落。(2)選擇培養(yǎng)的目的:增加纖維素分解菌的濃度,選擇培養(yǎng)的目的:增加纖維素分解菌的濃度,確保能夠從樣品中分離到所需要的微生物。確保能夠從樣品中分離到所需要的微生物。(3)

36、涉及到的微生物技術主要有:培養(yǎng)基的制作、涉及到的微生物技術主要有:培養(yǎng)基的制作、無菌操作、稀釋涂布平板法、選擇培養(yǎng)基的作無菌操作、稀釋涂布平板法、選擇培養(yǎng)基的作用、土壤取樣等。用、土壤取樣等。 (2010年青島市模擬年青島市模擬)啤酒是我們?nèi)粘I【剖俏覀內(nèi)粘I钪凶畛R姷娘嬃现?。生產(chǎn)過程大致如下:活中最常見的飲料之一。生產(chǎn)過程大致如下:將經(jīng)過滅菌的麥芽汁充氧,接入啤酒酵母菌將經(jīng)過滅菌的麥芽汁充氧,接入啤酒酵母菌菌種后輸入發(fā)酵罐。初期,酵母菌迅速繁殖,菌種后輸入發(fā)酵罐。初期,酵母菌迅速繁殖,糖度下降,酒精濃度漸漸上升,泡沫不斷增糖度下降,酒精濃度漸漸上升,泡沫不斷增多;當糖度下降到一定程度后

37、,結(jié)束發(fā)酵;多;當糖度下降到一定程度后,結(jié)束發(fā)酵;最后分別輸出有形物質(zhì)和啤酒。最后分別輸出有形物質(zhì)和啤酒。根據(jù)上述過根據(jù)上述過程,回答以下問題:程,回答以下問題:(1)具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精發(fā)酵菌種,對野生酵母菌進行誘變后通酒精發(fā)酵菌種,對野生酵母菌進行誘變后通過篩選可以得到具有這些特性的突變菌,誘過篩選可以得到具有這些特性的突變菌,誘變及篩選過程如下:變及篩選過程如下:步驟步驟1:野生菌液體培養(yǎng)一段時間后接受紫外:野生菌液體培養(yǎng)一段時間后接受紫外線照射誘變處理。線照射誘變處理。步驟步驟2:制備選擇培養(yǎng)基。在基本培養(yǎng)基的基:制備選擇培養(yǎng)基。

38、在基本培養(yǎng)基的基礎上,注意添加礎上,注意添加_和調(diào)低和調(diào)低pH,加瓊脂,加瓊脂后滅菌,制成固體平板。后滅菌,制成固體平板。步驟步驟3:將紫外線照射后的菌液稀釋涂布平板。:將紫外線照射后的菌液稀釋涂布平板。步驟步驟4:根據(jù):根據(jù)_篩選出突變菌。篩選出突變菌。(2)上述步驟上述步驟2、3的目的分別是的目的分別是_。(3)釀酒過程中,經(jīng)檢測活菌數(shù)量適宜但卻不釀酒過程中,經(jīng)檢測活菌數(shù)量適宜但卻不產(chǎn)生酒精,應采取的措施是產(chǎn)生酒精,應采取的措施是_。(4)秸稈的主要成分為木質(zhì)素、纖維素和半纖秸稈的主要成分為木質(zhì)素、纖維素和半纖維素,但是酵母菌卻無法直接利用,原因是維素,但是酵母菌卻無法直接利用,原因是其其

39、_。若要酵母菌能利用植物。若要酵母菌能利用植物秸稈進行發(fā)酵抽取酒精,請?zhí)岢鼋鉀Q該問題秸稈進行發(fā)酵抽取酒精,請?zhí)岢鼋鉀Q該問題的方法。的方法。(列舉兩種方法列舉兩種方法)_?!窘馕觥俊窘馕觥?1)因為是選擇耐高糖的酵母菌,因為是選擇耐高糖的酵母菌,所以應該加糖;一般來說能在選擇培養(yǎng)基上所以應該加糖;一般來說能在選擇培養(yǎng)基上生長繁殖的一定是耐高糖和耐酸的酵母菌。生長繁殖的一定是耐高糖和耐酸的酵母菌。(2)步驟步驟2的目的是創(chuàng)造選擇的特定環(huán)境,步驟的目的是創(chuàng)造選擇的特定環(huán)境,步驟3的目的是通過稀釋的方法期望獲得單一菌落。的目的是通過稀釋的方法期望獲得單一菌落。(3)活菌數(shù)量較多但不能產(chǎn)生酒精說明酵母菌

40、活菌數(shù)量較多但不能產(chǎn)生酒精說明酵母菌不能進行無氧呼吸,所以為了獲得酒精必須不能進行無氧呼吸,所以為了獲得酒精必須密閉。密閉。(4)酵母菌缺乏分解纖維素的酶系所以不能利酵母菌缺乏分解纖維素的酶系所以不能利用纖維素,但是可以通過基因工程的方法將用纖維素,但是可以通過基因工程的方法將分解纖維素的微生物中有關基因?qū)虢湍妇?,分解纖維素的微生物中有關基因?qū)虢湍妇蛘呋旌吓囵B(yǎng)等方式。或者混合培養(yǎng)等方式?!敬鸢浮俊敬鸢浮?1)高濃度蔗糖高濃度蔗糖(葡萄糖葡萄糖)是否能在是否能在選擇培養(yǎng)基上生長選擇培養(yǎng)基上生長(2)提供高糖和酸性篩選環(huán)境獲得單菌落提供高糖和酸性篩選環(huán)境獲得單菌落(3)隔絕空氣隔絕空氣(4

41、)缺乏相應分解酶系缺乏相應分解酶系(或缺乏纖維素酶和半纖或缺乏纖維素酶和半纖維素酶維素酶)在酵母菌中轉(zhuǎn)入分解酶系相關基因;在酵母菌中轉(zhuǎn)入分解酶系相關基因;利用酶或微生物分解秸稈;利用物理和化學利用酶或微生物分解秸稈;利用物理和化學方法分解秸稈;將酵母菌與其他能分解秸稈方法分解秸稈;將酵母菌與其他能分解秸稈的微生物混合發(fā)酵的微生物混合發(fā)酵 (2009年寧夏高考題年寧夏高考題)(1)在大腸桿菌培在大腸桿菌培養(yǎng)過程中,除考慮營養(yǎng)條件外,還要考慮養(yǎng)過程中,除考慮營養(yǎng)條件外,還要考慮_、_和滲透壓等條件。由于該和滲透壓等條件。由于該細菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易細菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡單、變異類型

42、容易選擇、選擇、_、_等優(yōu)點,因此常作等優(yōu)點,因此常作為遺傳學研究的實驗材料。為遺傳學研究的實驗材料。(2)在微生物培養(yǎng)操作過程中,為防止雜菌污在微生物培養(yǎng)操作過程中,為防止雜菌污染,需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行染,需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行_(消毒、滅消毒、滅菌菌);操作者的雙手需要進行清洗和;操作者的雙手需要進行清洗和_;靜;靜止空氣中的細菌可用紫外線殺滅,其原因是止空氣中的細菌可用紫外線殺滅,其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性,還能紫外線能使蛋白質(zhì)變性,還能_。(3)若用稀釋涂布平板法計數(shù)大腸桿菌活菌的若用稀釋涂布平板法計數(shù)大腸桿菌活菌的個數(shù),要想使所得估計值更接近實際值,除個數(shù),要想使所得估計值更接近

43、實際值,除應嚴格操作、多次重復外,還應保證待測樣應嚴格操作、多次重復外,還應保證待測樣品稀釋的品稀釋的_。(4)通常,對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的通常,對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對細菌進行初步的形狀、大小等菌落特征對細菌進行初步的_。(5)培養(yǎng)大腸桿菌時,在接種前需要檢測培養(yǎng)培養(yǎng)大腸桿菌時,在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應采用的檢基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應采用的檢測方法是測方法是_。(6)若用大腸桿菌進行實驗,使用過的培養(yǎng)基若用大腸桿菌進行實驗,使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過_處理后才能丟處理后才能丟棄,以防止培養(yǎng)物的擴散。棄

44、,以防止培養(yǎng)物的擴散?!窘馕觥俊窘馕觥?1)影響微生物培養(yǎng)的因素除了營影響微生物培養(yǎng)的因素除了營養(yǎng)條件外,外界條件主要包括溫度、酸堿度養(yǎng)條件外,外界條件主要包括溫度、酸堿度和滲透壓等。由于大腸桿菌具有體積小、結(jié)和滲透壓等。由于大腸桿菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易選擇、易培養(yǎng)、生活構(gòu)簡單、變異類型容易選擇、易培養(yǎng)、生活周期短等優(yōu)點,所以常作為遺傳學研究的實周期短等優(yōu)點,所以常作為遺傳學研究的實驗材料。驗材料。(2)滅菌是指用強烈的物理或化學的方法,殺滅菌是指用強烈的物理或化學的方法,殺死物體內(nèi)外的一切微生物,包括芽孢和孢子。死物體內(nèi)外的一切微生物,包括芽孢和孢子。消毒指使用較為溫和的物理或

45、化學方法僅殺消毒指使用較為溫和的物理或化學方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物。對于培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿要進行滅菌,對物。對于培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿要進行滅菌,對操作者的雙手需要進行清洗和用酒精消毒,操作者的雙手需要進行清洗和用酒精消毒,靜止空氣中的細菌在用紫外線照射能夠使蛋靜止空氣中的細菌在用紫外線照射能夠使蛋白質(zhì)變性,并損傷白質(zhì)變性,并損傷DNA結(jié)構(gòu),使細菌死亡。結(jié)構(gòu),使細菌死亡。(3)樣品的稀釋度直接影響平板上生長的菌落樣品的稀釋度直接影響平板上生長的菌落的數(shù)目,實際操作中,通常選用一定稀釋范的數(shù)目,實際操作中,通常選用一定稀釋范圍的樣品液進行培養(yǎng)

46、,以保證獲得的菌落數(shù)圍的樣品液進行培養(yǎng),以保證獲得的菌落數(shù)在在30300之間。之間。(4)菌落的特征是判斷微生物的種類的重要依菌落的特征是判斷微生物的種類的重要依據(jù)。對獲得的純菌種可以依據(jù)菌落的特征對據(jù)。對獲得的純菌種可以依據(jù)菌落的特征對細菌進行初步檢測。細菌進行初步檢測。(5)要判斷固體培養(yǎng)基是否被污染,可將未接要判斷固體培養(yǎng)基是否被污染,可將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下培養(yǎng)一段時間,種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下培養(yǎng)一段時間,若發(fā)現(xiàn)有菌落說明培養(yǎng)基已被污染。若發(fā)現(xiàn)有菌落說明培養(yǎng)基已被污染。(6)進行微生物培養(yǎng)時,使用過的培養(yǎng)基及培進行微生物培養(yǎng)時,使用過的培養(yǎng)基及培養(yǎng)物必須經(jīng)滅菌后才能丟棄,防止

47、培養(yǎng)的微養(yǎng)物必須經(jīng)滅菌后才能丟棄,防止培養(yǎng)的微生物擴散到環(huán)境中,造成危害。生物擴散到環(huán)境中,造成危害?!敬鸢浮俊敬鸢浮?1)溫度酸堿度易培養(yǎng)生活溫度酸堿度易培養(yǎng)生活周期短周期短(2)滅菌消毒損傷滅菌消毒損傷DNA的結(jié)構(gòu)的結(jié)構(gòu)(3)比例合適比例合適(4)鑒定鑒定(或分類或分類)(5)將未接種將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間,的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間,觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生(6)滅菌滅菌1(2009年四川高考題年四川高考題)下列關于幾種微生物下列關于幾種微生物的營養(yǎng)代謝和生長繁殖的描述,正確的是的營養(yǎng)代謝和生長繁殖的描述,正確的是()A根瘤菌通

48、過生物固氮,制造了含氮養(yǎng)料和根瘤菌通過生物固氮,制造了含氮養(yǎng)料和含碳有機物含碳有機物B接種到培養(yǎng)基上的青霉菌,進入對數(shù)期接種到培養(yǎng)基上的青霉菌,進入對數(shù)期能大量積累青霉素能大量積累青霉素C培養(yǎng)液中溶氧量的變化,會影響酵母培養(yǎng)液中溶氧量的變化,會影響酵母菌的生長繁殖和代謝途徑菌的生長繁殖和代謝途徑D用用32P標記的噬菌體感染細菌,在新形標記的噬菌體感染細菌,在新形成的噬菌體中都能檢測到成的噬菌體中都能檢測到32P【解析】【解析】根瘤菌異養(yǎng)生活,不能合成含氮根瘤菌異養(yǎng)生活,不能合成含氮有機物,有機物,A選項錯誤;處于對數(shù)期的青霉菌是選項錯誤;處于對數(shù)期的青霉菌是菌種數(shù)目大量增加的時期,處于穩(wěn)定期時

49、才菌種數(shù)目大量增加的時期,處于穩(wěn)定期時才能積累大量青霉素,能積累大量青霉素,B選項錯誤;酵母菌的繁選項錯誤;酵母菌的繁殖需要在有氧條件下進行,酵母菌在有氧和殖需要在有氧條件下進行,酵母菌在有氧和無氧條件下分別進行有氧呼吸和無氧呼吸,無氧條件下分別進行有氧呼吸和無氧呼吸,C選項正確;用選項正確;用32P標記噬菌體感染細菌時,其標記噬菌體感染細菌時,其子代遺傳物質(zhì)的合成是以被子代遺傳物質(zhì)的合成是以被32P標記噬菌體的標記噬菌體的DNA為模板,以細菌的核苷酸為原料,所以為模板,以細菌的核苷酸為原料,所以子代噬菌體中只有少數(shù)含子代噬菌體中只有少數(shù)含32P,D選項錯誤。選項錯誤?!敬鸢浮俊敬鸢浮緾2(2

50、009年重慶高考年重慶高考)下列有關大腸桿菌的敘下列有關大腸桿菌的敘述,正確的是述,正確的是()A大腸桿菌以復制方式進行繁殖,其擬核是大腸桿菌以復制方式進行繁殖,其擬核是一個環(huán)狀一個環(huán)狀DNA分子分子B在含葡萄糖和乳糖的培養(yǎng)基上,大腸桿菌在含葡萄糖和乳糖的培養(yǎng)基上,大腸桿菌首先利用乳糖作碳源首先利用乳糖作碳源C用大腸桿菌工程菌生產(chǎn)干擾素時,應及時用大腸桿菌工程菌生產(chǎn)干擾素時,應及時添加核酸等生長因子添加核酸等生長因子D處于對數(shù)期的大腸桿菌,常作為生產(chǎn)用的處于對數(shù)期的大腸桿菌,常作為生產(chǎn)用的菌種和科研的材料菌種和科研的材料【解析】【解析】大腸桿菌是一種細菌,以二分裂大腸桿菌是一種細菌,以二分裂的

51、方式進行繁殖;在含葡萄糖和乳糖的培養(yǎng)的方式進行繁殖;在含葡萄糖和乳糖的培養(yǎng)基上,大腸桿菌首先利用葡萄糖作能源,然基上,大腸桿菌首先利用葡萄糖作能源,然后再利用乳糖;利用大腸桿菌作為工程菌生后再利用乳糖;利用大腸桿菌作為工程菌生產(chǎn)干擾素時,不需要添加外源生長因子;處產(chǎn)干擾素時,不需要添加外源生長因子;處于對數(shù)期的大腸桿菌細胞代謝最旺盛,常作于對數(shù)期的大腸桿菌細胞代謝最旺盛,常作為生產(chǎn)用的菌種和科研的材料。為生產(chǎn)用的菌種和科研的材料?!敬鸢浮俊敬鸢浮緿3(2009年安徽高考題年安徽高考題)下列是關于下列是關于“檢測土檢測土壤中細菌總數(shù)壤中細菌總數(shù)”實驗操作的敘述,其中錯誤實驗操作的敘述,其中錯誤的

52、是的是()A用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,經(jīng)高用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板溫、高壓滅菌后倒平板B取取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水倍的土壤稀釋液和無菌水各各0.1 mL,分別涂布于各組平板上,分別涂布于各組平板上C將實驗組和對照組平板倒置,將實驗組和對照組平板倒置,37 恒溫恒溫培養(yǎng)培養(yǎng)2448小時小時D確定對照組無菌后,選擇菌落數(shù)在確定對照組無菌后,選擇菌落數(shù)在300以以上的實驗組平板進行計數(shù)上的實驗組平板進行計數(shù)【解析】【解析】采用稀釋涂布平板法統(tǒng)計菌落數(shù)采用稀釋涂布平板法統(tǒng)計菌落數(shù)目時,一般選擇菌落數(shù)在目時,一般選擇菌落數(shù)在30300的平板進行

53、的平板進行計數(shù)。計數(shù)?!敬鸢浮俊敬鸢浮緿4(2007年江蘇高考卷年江蘇高考卷)不同的微生物對營養(yǎng)不同的微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需要各不相同。下列有關一種以物質(zhì)的需要各不相同。下列有關一種以CO2為為唯一碳源的自養(yǎng)微生物營養(yǎng)的描述中,不正唯一碳源的自養(yǎng)微生物營養(yǎng)的描述中,不正確的是確的是()A氮源物質(zhì)為該微生物提供必要的氮素氮源物質(zhì)為該微生物提供必要的氮素B碳源物質(zhì)也是該微生物的能源物質(zhì)碳源物質(zhì)也是該微生物的能源物質(zhì)C無機鹽是該微生物不可缺少的營養(yǎng)物質(zhì)無機鹽是該微生物不可缺少的營養(yǎng)物質(zhì)D水是該微生物的營養(yǎng)要素之一水是該微生物的營養(yǎng)要素之一【解析】【解析】本題考查微生物的營養(yǎng)要素以及本題考查微生物的營養(yǎng)

54、要素以及理解應用能力、判斷能力。理解應用能力、判斷能力。CO2可為自養(yǎng)型微可為自養(yǎng)型微生物提供碳源,但不能提供能源。生物提供碳源,但不能提供能源?!敬鸢浮俊敬鸢浮緽5下列所述環(huán)境條件下的微生物,能正常生下列所述環(huán)境條件下的微生物,能正常生長繁殖的是長繁殖的是()A在缺乏生長素的無氮培養(yǎng)基中的固褐固氮在缺乏生長素的無氮培養(yǎng)基中的固褐固氮菌菌B在人體表皮擦傷部位的破傷風桿菌在人體表皮擦傷部位的破傷風桿菌C在新配制的植物礦質(zhì)營養(yǎng)液中的酵母菌在新配制的植物礦質(zhì)營養(yǎng)液中的酵母菌D在滅菌后的動物細胞培養(yǎng)液中的禽流感病在滅菌后的動物細胞培養(yǎng)液中的禽流感病毒毒【解析】【解析】 圓褐固氮菌是自生固氮細菌,圓褐固

55、氮菌是自生固氮細菌,因此可以在缺乏生長素的無氮培養(yǎng)基中的生因此可以在缺乏生長素的無氮培養(yǎng)基中的生長繁殖。破傷風桿菌是異養(yǎng)厭氧細菌,人體長繁殖。破傷風桿菌是異養(yǎng)厭氧細菌,人體表皮擦傷部位是有氧的環(huán)境,破傷風桿菌不表皮擦傷部位是有氧的環(huán)境,破傷風桿菌不能生長和繁殖,酵母菌是異養(yǎng)型微生物,新能生長和繁殖,酵母菌是異養(yǎng)型微生物,新配制的植物礦質(zhì)營養(yǎng)液中缺少有機碳;禽流配制的植物礦質(zhì)營養(yǎng)液中缺少有機碳;禽流感病毒不能獨立生活,只能寄生在活的細胞感病毒不能獨立生活,只能寄生在活的細胞中,因此禽流感病毒不能在滅菌后的動物細中,因此禽流感病毒不能在滅菌后的動物細胞培養(yǎng)液中生長繁殖。胞培養(yǎng)液中生長繁殖?!敬鸢浮?/p>

56、【答案】A6下列關于平菇培養(yǎng)的操作程序,正確的是下列關于平菇培養(yǎng)的操作程序,正確的是()A配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,接種,高壓蒸配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,接種,高壓蒸汽滅菌,培養(yǎng)汽滅菌,培養(yǎng)B配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,高壓蒸汽滅菌,配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,高壓蒸汽滅菌,接種,培養(yǎng)接種,培養(yǎng)C配制棉子殼培養(yǎng)基,接種,高壓蒸汽滅菌,配制棉子殼培養(yǎng)基,接種,高壓蒸汽滅菌,培養(yǎng)培養(yǎng)D配制棉子殼培養(yǎng)基,高壓蒸汽滅菌,接種,配制棉子殼培養(yǎng)基,高壓蒸汽滅菌,接種,培養(yǎng)培養(yǎng)【解析】【解析】培養(yǎng)平菇所用的培養(yǎng)基是棉子殼,培養(yǎng)平菇所用的培養(yǎng)基是棉子殼,具體的操作程序是:配制培養(yǎng)基,高壓蒸汽具體的操作程序是:配制培養(yǎng)基,

57、高壓蒸汽滅菌,培養(yǎng)。滅菌,培養(yǎng)。【答案】【答案】D7通過選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體通過選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微生物。在缺乏氮源的培養(yǎng)中分離出所需的微生物。在缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分微生物無法生長;在培養(yǎng)基中加基上大部分微生物無法生長;在培養(yǎng)基中加入青霉素可以抑制細菌和放線菌;在培養(yǎng)基入青霉素可以抑制細菌和放線菌;在培養(yǎng)基中加入中加入10%酚可以抑制細菌和霉菌。利用上酚可以抑制細菌和霉菌。利用上述方法能從混雜的微生物群體中分別分離出述方法能從混雜的微生物群體中分別分離出(多選多選)() A大腸桿菌大腸桿菌B霉菌霉菌 C放線菌放線菌 D固氮細菌固氮細菌【解析】【解析】

58、根據(jù)題意,固氮細菌的生長不需根據(jù)題意,固氮細菌的生長不需要從培養(yǎng)基上獲得氮源,可在缺乏氮源的培要從培養(yǎng)基上獲得氮源,可在缺乏氮源的培養(yǎng)基上正常生長;加入青霉素的培養(yǎng)基上不養(yǎng)基上正常生長;加入青霉素的培養(yǎng)基上不能生長細菌和放線菌,則可收獲霉菌和酵母能生長細菌和放線菌,則可收獲霉菌和酵母菌;加入酚的培養(yǎng)基使細菌和霉菌不能正常菌;加入酚的培養(yǎng)基使細菌和霉菌不能正常生長,而放線菌卻能利用酚作原料合成自身生長,而放線菌卻能利用酚作原料合成自身的產(chǎn)物。的產(chǎn)物?!敬鸢浮俊敬鸢浮緿BC8(2008年廣東高考年廣東高考)苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì),自然界中存在著降解苯酚的有毒污染物質(zhì),

59、自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠產(chǎn)生的廢水中含有苯酚,為微生物。某工廠產(chǎn)生的廢水中含有苯酚,為了降解廢水中的苯酚,研究人員從土壤中篩了降解廢水中的苯酚,研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細菌菌株,篩選獲得了只能降解利用苯酚的細菌菌株,篩選的主要步驟如下圖所示:選的主要步驟如下圖所示:為土壤樣品。為土壤樣品。請回答下列問題:請回答下列問題:(1)中培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應加入中培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應加入作為碳源,作為碳源,中不同濃度碳源的培養(yǎng)基中不同濃度碳源的培養(yǎng)基_(A.影響;影響;B.不影響不影響)細菌的數(shù)量,如果要細菌的數(shù)量,如果要測定測定中活細菌數(shù)量,常采用中活

60、細菌數(shù)量,常采用_法。法。(2)為對照,微生物在為對照,微生物在中不生長,在中不生長,在中中生長,生長,與與培養(yǎng)基的主要區(qū)別在于培養(yǎng)基的主要區(qū)別在于_;使用使用_法可以在法可以在上獲得單菌落。采用上獲得單菌落。采用固體平板培養(yǎng)細菌時為什么進行倒置培養(yǎng)?固體平板培養(yǎng)細菌時為什么進行倒置培養(yǎng)?_。(3)如何比較不同菌株降解苯酚能力的大???如何比較不同菌株降解苯酚能力的大?。縚。(4)實驗過程中如何防止其他微生物的污染?實驗過程中如何防止其他微生物的污染?_?!窘馕觥俊窘馕觥?題目中所篩選的細菌題目中所篩選的細菌“只能只能”降解苯酚,故可采用以苯酚為唯一碳源的選降解苯酚,故可采用以苯酚為唯一碳源的選

61、擇培養(yǎng)基篩選,含除苯酚外其他碳源的培養(yǎng)擇培養(yǎng)基篩選,含除苯酚外其他碳源的培養(yǎng)基作為對照。培養(yǎng)液中苯酚濃度下降的速度基作為對照。培養(yǎng)液中苯酚濃度下降的速度可反映該菌對苯酚的降解能力。嚴格滅菌、可反映該菌對苯酚的降解能力。嚴格滅菌、無菌操作可有效防止實驗過程中的雜菌污染。無菌操作可有效防止實驗過程中的雜菌污染?!敬鸢浮俊敬鸢浮?1)苯酚苯酚A平板菌落計數(shù)平板菌落計數(shù)(活菌活菌計數(shù)或菌落計數(shù)計數(shù)或菌落計數(shù))(2)的培養(yǎng)基沒有加入苯酚作為碳源,的培養(yǎng)基沒有加入苯酚作為碳源,培培養(yǎng)基中加入苯酚作為碳源稀釋涂布平板法養(yǎng)基中加入苯酚作為碳源稀釋涂布平板法或平板劃線采用固體平板培養(yǎng)細菌時要倒或平板劃線采用固體

62、平板培養(yǎng)細菌時要倒置培養(yǎng)以防止冷凝后形成的水珠滴落在培養(yǎng)置培養(yǎng)以防止冷凝后形成的水珠滴落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基基上污染培養(yǎng)基 (3)用同樣苯酚濃度的培養(yǎng)液培養(yǎng)不同菌株。用同樣苯酚濃度的培養(yǎng)液培養(yǎng)不同菌株。一定時間后,測定培養(yǎng)液中苯酚含量一定時間后,測定培養(yǎng)液中苯酚含量(4)從制備培養(yǎng)基到接種與培養(yǎng)等全部實驗過從制備培養(yǎng)基到接種與培養(yǎng)等全部實驗過程要無菌操作程要無菌操作(答案合理即可答案合理即可)微生物的培養(yǎng)與應微生物的培養(yǎng)與應用用微生物的實微生物的實驗室培養(yǎng)驗室培養(yǎng)土壤中分解尿素的土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)細菌的分離與計數(shù)分解纖維素分解纖維素的微生物的的微生物的分離分離微生物微生物的實驗的

63、實驗室培養(yǎng)室培養(yǎng)培養(yǎng)基:概念、種類、成分、常用培養(yǎng)基:概念、種類、成分、常用培養(yǎng)基培養(yǎng)基無菌技術無菌技術無菌技術內(nèi)容無菌技術內(nèi)容消毒與滅菌消毒與滅菌實驗室常用的消毒方法實驗室常用的消毒方法實驗室常用的滅菌方法實驗室常用的滅菌方法實驗操作實驗操作制備牛肉膏蛋白胨固體制備牛肉膏蛋白胨固體 培養(yǎng)基的方法培養(yǎng)基的方法純化大腸桿菌的方法純化大腸桿菌的方法菌種保藏的方法菌種保藏的方法研究思路研究思路菌種篩選菌種篩選統(tǒng)計菌落菌數(shù)目統(tǒng)計菌落菌數(shù)目設置對照設置對照系列稀釋系列稀釋實驗設計實驗設計涂布平板涂布平板培養(yǎng)觀察培養(yǎng)觀察土壤取樣土壤取樣土壤中土壤中分解尿分解尿素的分素的分離與計離與計數(shù)數(shù)分解纖分解纖維素的

64、維素的微生物微生物的分離的分離纖維素與纖維素酶纖維素與纖維素酶纖維素分解菌的篩選纖維素分解菌的篩選實驗設實驗設計計土壤取樣土壤取樣選擇培養(yǎng)基的特點、選擇選擇培養(yǎng)基的特點、選擇培養(yǎng)的目的培養(yǎng)的目的剛果紅染色法剛果紅染色法實驗流程:土壤取樣實驗流程:土壤取樣選擇培選擇培養(yǎng)(可以省略)養(yǎng)(可以省略)梯度稀釋梯度稀釋涂布平板涂布平板培養(yǎng)后挑選產(chǎn)生透培養(yǎng)后挑選產(chǎn)生透明的圈的菌落明的圈的菌落(1)植物細胞全能性含義及其表達的條件植物細胞全能性含義及其表達的條件(2)植物組織培養(yǎng)中生長素和細胞分裂素的作植物組織培養(yǎng)中生長素和細胞分裂素的作用用(3)花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑

65、(4)花粉發(fā)育經(jīng)歷的不同時期花粉發(fā)育經(jīng)歷的不同時期(1)細胞分化與細胞全能性的生產(chǎn)應用細胞分化與細胞全能性的生產(chǎn)應用(2)植物組織培養(yǎng)的基本原理及其培養(yǎng)條件植物組織培養(yǎng)的基本原理及其培養(yǎng)條件(3)影響植物組織培養(yǎng)的因素影響植物組織培養(yǎng)的因素(4)植物激素在植物組織培養(yǎng)中的作用植物激素在植物組織培養(yǎng)中的作用一、對植物組織培養(yǎng)的分析一、對植物組織培養(yǎng)的分析1原理:原理:植物細胞全能性植物細胞全能性基礎:細胞內(nèi)具有該物種發(fā)育所需的全部遺傳物質(zhì)基礎:細胞內(nèi)具有該物種發(fā)育所需的全部遺傳物質(zhì)全能性高低:受精卵全能性高低:受精卵生殖細胞生殖細胞體細胞體細胞植物細胞植物細胞動物細胞動物細胞分化程度低的細胞分化

66、程度低的細胞分化程度高的細胞分化程度高的細胞2細胞分化的實質(zhì):細胞分化的實質(zhì):細胞內(nèi)遺傳物質(zhì)的執(zhí)細胞內(nèi)遺傳物質(zhì)的執(zhí)行情況不同行情況不同(基因的選擇性表達基因的選擇性表達)愈傷組織再分化時應先誘導分化出芽,后誘愈傷組織再分化時應先誘導分化出芽,后誘導產(chǎn)生根,若順序顛倒,則不好誘導根的生導產(chǎn)生根,若順序顛倒,則不好誘導根的生成。成。二、影響植物組織培養(yǎng)的因素及成功的關鍵二、影響植物組織培養(yǎng)的因素及成功的關鍵1影響因素影響因素(1)內(nèi)部因素:材料的選取。內(nèi)部因素:材料的選取。(2)外部因素:營養(yǎng)成分的種類及配比;植物外部因素:營養(yǎng)成分的種類及配比;植物激素的用量及使用順序;激素的用量及使用順序;pH、溫度、光照等。、溫度、光照等。2獲得成功的關鍵獲得成功的關鍵(1)植物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小、植物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小、抗逆性差、對培養(yǎng)條件要求較高??鼓嫘圆?、對培養(yǎng)條件要求較高。(2)培養(yǎng)材料一旦被微生物污染,就會導致實培養(yǎng)材料一旦被微生物污染,就會導致實驗失敗。原因是微生物增殖快,生長迅速,驗失敗。原因是微生物增殖快,生長迅速,消耗養(yǎng)分多,并產(chǎn)生代謝廢物毒害培養(yǎng)材料。消耗養(yǎng)

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