龍門亮劍高三一輪人教版生物 選修3全課件

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1、 選修選修3 現(xiàn)代生物科技專題現(xiàn)代生物科技專題(1)基因工程的誕生基因工程的誕生(2)基因工程的原理和技術(shù)基因工程的原理和技術(shù)(3)基因工程的應(yīng)用基因工程的應(yīng)用(4)蛋白質(zhì)工程蛋白質(zhì)工程(1)基因工程中三種基本工具的作用及特點(diǎn)基因工程中三種基本工具的作用及特點(diǎn)(2)基因工程原理及基本操作程序基因工程原理及基本操作程序(3)設(shè)計(jì)某一轉(zhuǎn)基因生物的培育過程設(shè)計(jì)某一轉(zhuǎn)基因生物的培育過程(4)基因工程的應(yīng)用及取得成果的典型實(shí)例基因工程的應(yīng)用及取得成果的典型實(shí)例(5)蛋白質(zhì)工程原理及其與基因工程的區(qū)別和蛋白質(zhì)工程原理及其與基因工程的區(qū)別和聯(lián)系聯(lián)系11、1.2DNA重組技術(shù)的基本重組技術(shù)的基本工具基因工程的

2、基本操作程序工具基因工程的基本操作程序一、基因工程誕生的理論基礎(chǔ)一、基因工程誕生的理論基礎(chǔ)1基因拼接的理論基礎(chǔ)基因拼接的理論基礎(chǔ)(1)DNA是生物的主要遺傳物質(zhì)。是生物的主要遺傳物質(zhì)。(2)DNA的基本組成單位都是四種脫氧核苷酸。的基本組成單位都是四種脫氧核苷酸。(3)雙鏈雙鏈DNA分子的空間結(jié)構(gòu)都是規(guī)則的雙螺分子的空間結(jié)構(gòu)都是規(guī)則的雙螺旋結(jié)構(gòu)。旋結(jié)構(gòu)。2外源基因在受體內(nèi)表達(dá)的理論基礎(chǔ)外源基因在受體內(nèi)表達(dá)的理論基礎(chǔ)(1)基因是控制生物性狀的獨(dú)立遺傳單位?；蚴强刂粕镄誀畹莫?dú)立遺傳單位。(2)遺傳信息的傳遞都遵循中心法則闡述的信遺傳信息的傳遞都遵循中心法則闡述的信息流動(dòng)方向。息流動(dòng)方向。(3)

3、生物界共用一套遺傳密碼。生物界共用一套遺傳密碼。二、基因工程的操作工具二、基因工程的操作工具1限制性核酸內(nèi)切酶能夠特異性地識(shí)別雙鏈限制性核酸內(nèi)切酶能夠特異性地識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并能在分子的某種特定的核苷酸序列，并能在特定部位將兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷特定部位將兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，使其形成黏性末端或平末端。開，使其形成黏性末端或平末端。2DNA連接酶連接酶(1)常用的常用的DNA連接酶連接酶(2)DNA連接酶與連接酶與DNA聚合酶的比較聚合酶的比較DNA連接酶連接酶DNA聚合酶聚合酶作用實(shí)質(zhì)作用實(shí)質(zhì)都是催化兩個(gè)脫氧核苷酸都是催化兩個(gè)脫氧核苷酸之間形成磷酸二

4、酯鍵之間形成磷酸二酯鍵是否需模是否需模板板不需要不需要需要需要連接連接DNA鏈鏈雙鏈雙鏈單鏈單鏈DNA連接酶連接酶DNA聚合酶聚合酶作用過作用過程程在兩個(gè)在兩個(gè)DNA片段片段之間形成磷酸二之間形成磷酸二酯鍵酯鍵將單個(gè)脫氧核苷酸將單個(gè)脫氧核苷酸加到已存在的核酸加到已存在的核酸片段的片段的3端的羥端的羥基上，形成磷酸二基上，形成磷酸二酯鍵酯鍵作用結(jié)作用結(jié)果果將存在的將存在的DNA片片段連接成重組段連接成重組DNA分子分子合成新的合成新的DNA分子分子3.載體載體(1)作用：作用：作為運(yùn)載工具，將目的基因轉(zhuǎn)移作為運(yùn)載工具，將目的基因轉(zhuǎn)移到宿主細(xì)胞內(nèi)。到宿主細(xì)胞內(nèi)。利用它在宿主細(xì)胞內(nèi)對目的基因進(jìn)行大量

5、利用它在宿主細(xì)胞內(nèi)對目的基因進(jìn)行大量復(fù)制。復(fù)制。(2)種類：質(zhì)粒、種類：質(zhì)粒、噬菌體的衍生物和動(dòng)植物病噬菌體的衍生物和動(dòng)植物病毒等。毒等。(3)一般來說，天然載體往往不能滿足人類的一般來說，天然載體往往不能滿足人類的所有要求，因此人們根據(jù)不同的目的和需要，所有要求，因此人們根據(jù)不同的目的和需要，對某些天然的載體進(jìn)行人工改造。對某些天然的載體進(jìn)行人工改造。三、基因工程操作的基本程序三、基因工程操作的基本程序1目的基因的獲取途徑目的基因的獲取途徑(1)直接分離：從自然界已有的物種中分離，直接分離：從自然界已有的物種中分離，如從基因文庫中獲取。如從基因文庫中獲取。(2)人工合成目的基因人工合成目的基

6、因常用的方法有：常用的方法有：已知核苷酸序列的較小基因，直接利用已知核苷酸序列的較小基因，直接利用DNA合成儀用化學(xué)方法合成，不需要模板。合成儀用化學(xué)方法合成，不需要模板。以以RNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶作用下人工合為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶作用下人工合成。成。(3)PCR技術(shù)與技術(shù)與DNA復(fù)制的比較復(fù)制的比較PCR技術(shù)技術(shù)DNA復(fù)制復(fù)制相相同同點(diǎn)點(diǎn)原理原理DNA雙鏈復(fù)制雙鏈復(fù)制(堿基互補(bǔ)配對堿基互補(bǔ)配對)原料原料四種游離的脫氧核苷酸四種游離的脫氧核苷酸條件條件模板、模板、ATP、酶等、酶等PCR技術(shù)技術(shù)DNA復(fù)制復(fù)制不不同同點(diǎn)點(diǎn)解旋解旋方式方式DNA在高溫下變在高溫下變性解旋性解旋解旋酶催化解旋酶催化場

7、所場所體外復(fù)制體外復(fù)制主要在細(xì)胞核內(nèi)主要在細(xì)胞核內(nèi)酶酶熱穩(wěn)定的熱穩(wěn)定的DNA聚聚合酶合酶(Taq酶酶)細(xì)胞內(nèi)含有的細(xì)胞內(nèi)含有的DNA聚合酶聚合酶結(jié)果結(jié)果在短時(shí)間內(nèi)形成在短時(shí)間內(nèi)形成大量的大量的DNA片段片段形成整個(gè)形成整個(gè)DNA分分子子2.基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因表達(dá)載體的構(gòu)建(1)基因表達(dá)載體的組成：啟動(dòng)子、目的基因、基因表達(dá)載體的組成：啟動(dòng)子、目的基因、終止子以及標(biāo)記基因等。終止子以及標(biāo)記基因等。(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建方法基因表達(dá)載體的構(gòu)建方法導(dǎo)入的目的基因的表達(dá)需要調(diào)控序列，導(dǎo)入的目的基因的表達(dá)需要調(diào)控序列，因此在插入目的基因的部位之前需有啟動(dòng)子，因此在插入目的基因的部位之前需有啟動(dòng)子，

8、之后需有終止子。之后需有終止子。3將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞生物生物種類種類植物細(xì)胞植物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞微生物細(xì)胞微生物細(xì)胞常用常用方法方法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法顯微注射技術(shù)顯微注射技術(shù)Ca2處理法處理法受體受體細(xì)胞細(xì)胞體細(xì)胞體細(xì)胞受精卵受精卵原核細(xì)胞原核細(xì)胞轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)化過程過程將目的基因插入到將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的質(zhì)粒的TDNA上上農(nóng)桿菌農(nóng)桿菌導(dǎo)入植導(dǎo)入植物細(xì)胞物細(xì)胞整合到受整合到受體細(xì)胞的體細(xì)胞的DNA表表達(dá)達(dá)將含有目的基因的將含有目的基因的表達(dá)載體提純表達(dá)載體提純?nèi)∪÷崖?受精卵受精卵)顯微顯微注射注射受精卵發(fā)育受精卵發(fā)育獲得具有新性狀獲得具有新性狀的動(dòng)物的動(dòng)物C

9、a2處理細(xì)胞處理細(xì)胞感受態(tài)細(xì)胞感受態(tài)細(xì)胞重組重組表達(dá)載體與感受態(tài)表達(dá)載體與感受態(tài)細(xì)胞混合細(xì)胞混合感受態(tài)感受態(tài)細(xì)胞吸收細(xì)胞吸收DNA分分子子4.目的基因的檢測與鑒定目的基因的檢測與鑒定(1)分子水平檢測分子水平檢測導(dǎo)入檢測：導(dǎo)入檢測：DNA分子雜交技術(shù)，即使用放分子雜交技術(shù)，即使用放射性同位素標(biāo)記的含目的基因的射性同位素標(biāo)記的含目的基因的DNA片段作片段作探針檢測。探針檢測。(2)個(gè)體生物學(xué)水平鑒定：對轉(zhuǎn)基因生物進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)水平鑒定：對轉(zhuǎn)基因生物進(jìn)行抗蟲或抗病的接種實(shí)驗(yàn)。抗蟲或抗病的接種實(shí)驗(yàn)。 (2010年北京海淀區(qū)抽查年北京海淀區(qū)抽查)下圖是含某目下圖是含某目的基因的的基因的DNA片段，據(jù)圖

10、回答下列問題。片段，據(jù)圖回答下列問題。(1)根據(jù)圖示可知，若用根據(jù)圖示可知，若用EcoR和和Sma限制限制酶切割，則此酶切割，則此DNA片段可有片段可有_個(gè)限制酶切個(gè)限制酶切割位點(diǎn)，切割后共有割位點(diǎn)，切割后共有_種種_個(gè)切割末端。個(gè)切割末端。(2)EcoR限制酶切割后形成的末端是限制酶切割后形成的末端是末端，在圖中用筆標(biāo)出切割部位。末端，在圖中用筆標(biāo)出切割部位。(3)如果要將用如果要將用EcoR限制酶切割形成的目的限制酶切割形成的目的基因片段導(dǎo)入受體細(xì)胞，一般需要基因片段導(dǎo)入受體細(xì)胞，一般需要_作載作載體。其應(yīng)具備的特點(diǎn)有：體。其應(yīng)具備的特點(diǎn)有：_、_、_。(4)Ecoli DNA連接酶連接目

11、的基因和載體時(shí)連連接酶連接目的基因和載體時(shí)連接的是圖中接的是圖中_(填字母填字母)部位的化學(xué)鍵。部位的化學(xué)鍵?！敬鸢浮俊敬鸢浮?1)326(不計(jì)算原有的不計(jì)算原有的)(2)黏性黏性(3)質(zhì)粒至少有一個(gè)切割位點(diǎn)能自我復(fù)制質(zhì)粒至少有一個(gè)切割位點(diǎn)能自我復(fù)制含標(biāo)記基因含標(biāo)記基因(4)X (2009年江蘇高考題年江蘇高考題)蘇云金桿菌蘇云金桿菌(Bt)能能產(chǎn)生具有殺蟲能力的毒素蛋白。下圖是轉(zhuǎn)產(chǎn)生具有殺蟲能力的毒素蛋白。下圖是轉(zhuǎn)Bt毒素蛋白基因植物的培育過程示意圖毒素蛋白基因植物的培育過程示意圖(ampr為為抗氨芐青霉素基因抗氨芐青霉素基因)，據(jù)圖回答下列問題。，據(jù)圖回答下列問題。(1)將圖中將圖中的的D

12、NA用用Hind、BamH完全完全酶切后，反應(yīng)管中有酶切后，反應(yīng)管中有_種種DNA片段。片段。(2)圖中圖中表示表示Hind與與BamH酶切、酶切、DNA連接酶連接的過程，此過程可獲得連接酶連接的過程，此過程可獲得_種重組質(zhì)粒；如果換用種重組質(zhì)粒；如果換用Bst與與BamH酶切，酶切，目的基因與質(zhì)粒連接后可獲得目的基因與質(zhì)粒連接后可獲得_種重種重組質(zhì)粒。組質(zhì)粒。(3)目的基因插入質(zhì)粒后，不能影響質(zhì)粒的目的基因插入質(zhì)粒后，不能影響質(zhì)粒的_。(4)圖中圖中的的Ti質(zhì)粒調(diào)控合成的質(zhì)粒調(diào)控合成的vir蛋白，可以蛋白，可以協(xié)助帶有目的基因的協(xié)助帶有目的基因的TDNA導(dǎo)入植物細(xì)胞，導(dǎo)入植物細(xì)胞，并防止植物

13、細(xì)胞中并防止植物細(xì)胞中_對對TDNA的降解。的降解。(5)已知轉(zhuǎn)基因植物中毒素蛋白只結(jié)合某些昆蟲已知轉(zhuǎn)基因植物中毒素蛋白只結(jié)合某些昆蟲腸上皮細(xì)胞表面的特異受體，使細(xì)胞膜穿孔，腸上皮細(xì)胞表面的特異受體，使細(xì)胞膜穿孔，腸細(xì)胞裂解，昆蟲死亡。而該毒素蛋白對人類腸細(xì)胞裂解，昆蟲死亡。而該毒素蛋白對人類的風(fēng)險(xiǎn)相對較小，原因是人類腸上皮細(xì)胞的風(fēng)險(xiǎn)相對較小，原因是人類腸上皮細(xì)胞_。(6)生產(chǎn)上常將上述轉(zhuǎn)基因作物與非轉(zhuǎn)基因作物生產(chǎn)上常將上述轉(zhuǎn)基因作物與非轉(zhuǎn)基因作物混合播種，其目的是降低害蟲種群中的混合播種，其目的是降低害蟲種群中的_基基因頻率的增長速率。因頻率的增長速率?！窘馕觥俊窘馕觥勘绢}重點(diǎn)考查轉(zhuǎn)基因技術(shù)

14、的相關(guān)本題重點(diǎn)考查轉(zhuǎn)基因技術(shù)的相關(guān)知識(shí)，需特別注意基因工程的步驟、知識(shí)，需特別注意基因工程的步驟、DNA的的復(fù)制、基因工程的操作工具等知識(shí)。本題需復(fù)制、基因工程的操作工具等知識(shí)。本題需特別注意圖示過程，從中獲取有效信息，然特別注意圖示過程，從中獲取有效信息，然后結(jié)合課本知識(shí)即可正確解答。后結(jié)合課本知識(shí)即可正確解答?！敬鸢浮俊敬鸢浮?1)4(2)21(3)復(fù)制復(fù)制(4)DNA水解酶水解酶(5)表面無相應(yīng)的特異性受體表面無相應(yīng)的特異性受體(6)抗性抗性1(2009年浙江高考題年浙江高考題)下列關(guān)于基因工程的敘下列關(guān)于基因工程的敘述，錯(cuò)誤的是述，錯(cuò)誤的是()A目的基因和受體細(xì)胞均可來自動(dòng)、植物或目的

15、基因和受體細(xì)胞均可來自動(dòng)、植物或微生物微生物B限制性核酸內(nèi)切酶和限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶是兩類常連接酶是兩類常用的工具酶用的工具酶C人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原無生物活性素原無生物活性D載體上的抗性基因有利于篩選含重組載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞和促進(jìn)目的基因的表達(dá)的細(xì)胞和促進(jìn)目的基因的表達(dá)【解析】【解析】基因工程中目的基因來源于自然基因工程中目的基因來源于自然界中的含有目的性狀的一切生物，可以是動(dòng)界中的含有目的性狀的一切生物，可以是動(dòng)物、植物，也可以是真菌、細(xì)菌，還可以是物、植物，也可以是真菌、細(xì)菌，還可以是人等；在基因工

16、程中獲取目的基因以及將目人等；在基因工程中獲取目的基因以及將目的基因和載體結(jié)合構(gòu)成基因表達(dá)載體必須使的基因和載體結(jié)合構(gòu)成基因表達(dá)載體必須使用同一種限制酶進(jìn)行切割，以獲得相同的黏用同一種限制酶進(jìn)行切割，以獲得相同的黏性末端，再在性末端，再在DNA連接酶的作用下，將目的連接酶的作用下，將目的基因和載體連接，構(gòu)成基因表達(dá)載體；基因和載體連接，構(gòu)成基因表達(dá)載體；人的胰島素原基因可以在大腸桿菌體內(nèi)得以人的胰島素原基因可以在大腸桿菌體內(nèi)得以表達(dá)，但是由于大腸桿菌是原核生物，沒有表達(dá)，但是由于大腸桿菌是原核生物，沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等細(xì)胞器的加工，合成的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等細(xì)胞器的加工，合成的胰島素原不具有胰

17、島素的功能，即沒有生物胰島素原不具有胰島素的功能，即沒有生物活性；作為標(biāo)記基因，有利于重組基因在細(xì)活性；作為標(biāo)記基因，有利于重組基因在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的鑒定篩選，但對于目的基因的表胞內(nèi)表達(dá)的鑒定篩選，但對于目的基因的表達(dá)沒有促進(jìn)等調(diào)控作用。達(dá)沒有促進(jìn)等調(diào)控作用?！敬鸢浮俊敬鸢浮緿2(2007年高考北京卷年高考北京卷)利用外源基因在受體利用外源基因在受體細(xì)胞中表達(dá)，可生產(chǎn)人類所需要的產(chǎn)品。下細(xì)胞中表達(dá)，可生產(chǎn)人類所需要的產(chǎn)品。下列選項(xiàng)中能說明目的基因完成了在受體細(xì)胞列選項(xiàng)中能說明目的基因完成了在受體細(xì)胞中表達(dá)的是中表達(dá)的是()A棉花二倍體細(xì)胞中檢測到細(xì)菌的抗蟲基因棉花二倍體細(xì)胞中檢測到細(xì)菌的抗蟲基因B

18、大腸桿菌中檢測到人胰島素基因及其大腸桿菌中檢測到人胰島素基因及其mRNAC山羊乳腺細(xì)胞中檢測到人生長激素山羊乳腺細(xì)胞中檢測到人生長激素DNA序列序列D酵母菌細(xì)胞中提取到人干擾素蛋白酵母菌細(xì)胞中提取到人干擾素蛋白【解析】【解析】該題考查了目的基因的檢測和目該題考查了目的基因的檢測和目的基因的表達(dá)兩個(gè)概念之間的區(qū)別?；虮淼幕虻谋磉_(dá)兩個(gè)概念之間的區(qū)別。基因表達(dá)的產(chǎn)物是蛋白質(zhì)，因此，只有在受體細(xì)胞達(dá)的產(chǎn)物是蛋白質(zhì)，因此，只有在受體細(xì)胞中檢測或提取到了相應(yīng)蛋白質(zhì)才能證明目的中檢測或提取到了相應(yīng)蛋白質(zhì)才能證明目的基因在受體細(xì)胞中完成了表達(dá)，基因在受體細(xì)胞中完成了表達(dá)，A、C只能說只能說明完成了目的基因

19、的導(dǎo)入，明完成了目的基因的導(dǎo)入，B只能說明完成了只能說明完成了目的基因的導(dǎo)入和目的基因的轉(zhuǎn)錄過程。目的基因的導(dǎo)入和目的基因的轉(zhuǎn)錄過程?！敬鸢浮俊敬鸢浮緿3(2009年上海高考題年上海高考題)人體細(xì)胞內(nèi)含有抑制人體細(xì)胞內(nèi)含有抑制癌癥發(fā)生的癌癥發(fā)生的P53基因，生物技術(shù)可對此類基因基因，生物技術(shù)可對此類基因的變化進(jìn)行檢測。的變化進(jìn)行檢測。(1)目的基因的獲取方法通常包括目的基因的獲取方法通常包括_和和_。(2)上圖表示從正常人和患者體內(nèi)獲取的上圖表示從正常人和患者體內(nèi)獲取的P53基基因的部分區(qū)域。與正常人正比，患者在該區(qū)因的部分區(qū)域。與正常人正比，患者在該區(qū)域的堿基會(huì)發(fā)生改變，在上圖中用方框圈出域

20、的堿基會(huì)發(fā)生改變，在上圖中用方框圈出發(fā)生改變的堿基對；這種變異被稱為發(fā)生改變的堿基對；這種變異被稱為_。(3)已知限制酶已知限制酶E識(shí)別序列為識(shí)別序列為CCGG，若用限，若用限制酶制酶E分別完全切割正常人和患者的分別完全切割正常人和患者的P53基因基因部分區(qū)域部分區(qū)域(見上圖見上圖)，那么正常人的會(huì)被切成，那么正常人的會(huì)被切成個(gè)片段；而患者的則被切割成長度為個(gè)片段；而患者的則被切割成長度為_對對堿基和堿基和_對堿基的兩種片段。對堿基的兩種片段。(4)如果某人的如果某人的P53基因部分區(qū)域經(jīng)限制酶基因部分區(qū)域經(jīng)限制酶E完完全切割后，共出現(xiàn)全切割后，共出現(xiàn)170、220、290和和460堿基堿基對

21、的四種片段，那么該人的基因型是對的四種片段，那么該人的基因型是_(以以P+表示正?；颍硎菊；?，P-表示異常基因表示異常基因)?！窘馕觥俊窘馕觥?1)目的基因既可以從供體細(xì)胞中目的基因既可以從供體細(xì)胞中直接提取，也可人工合成。直接提取，也可人工合成。(2)基因內(nèi)部個(gè)別基因內(nèi)部個(gè)別堿基對的替換為基因突變。堿基對的替換為基因突變。(3)據(jù)圖分析可知，據(jù)圖分析可知，正常人會(huì)被切成三個(gè)片段。正常人會(huì)被切成三個(gè)片段。(4)由正常人被限由正常人被限制酶制酶E切出來的具體片段可知，該人的基因型切出來的具體片段可知，該人的基因型是是P+P-?！敬鸢浮俊敬鸢浮?1)從細(xì)胞中分離通過化學(xué)方法從細(xì)胞中分離通過

22、化學(xué)方法人工合成人工合成(2)見下圖見下圖基因堿基對的替換基因堿基對的替換(基因突變基因突變)(3)3460220(4)P+P-4(2008年山東高考題年山東高考題)為擴(kuò)大可耕地面積，為擴(kuò)大可耕地面積，增加糧食產(chǎn)量，黃河三角洲等鹽堿地的開發(fā)增加糧食產(chǎn)量，黃河三角洲等鹽堿地的開發(fā)利用備受關(guān)注。我國科學(xué)家應(yīng)用耐鹽基因培利用備受關(guān)注。我國科學(xué)家應(yīng)用耐鹽基因培育出了耐鹽水稻新品系。育出了耐鹽水稻新品系。(1)獲得耐鹽基因后，構(gòu)建重組獲得耐鹽基因后，構(gòu)建重組DNA分子所用分子所用的限制性內(nèi)切酶作用于圖中的的限制性內(nèi)切酶作用于圖中的_處，處，DNA連接酶作用于連接酶作用于_處。處。(填填“a或或“b”)(

23、2)將重組將重組DNA分子導(dǎo)入水稻受體細(xì)胞的常用分子導(dǎo)入水稻受體細(xì)胞的常用方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和_法。法。(3)由導(dǎo)入目的基因的水稻細(xì)胞培養(yǎng)成植株需由導(dǎo)入目的基因的水稻細(xì)胞培養(yǎng)成植株需要利用要利用_技術(shù)，該技術(shù)的核心是技術(shù)，該技術(shù)的核心是_和和_。(4)為了確定耐鹽轉(zhuǎn)基因水稻是否培育成功，為了確定耐鹽轉(zhuǎn)基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素標(biāo)記的既要用放射性同位素標(biāo)記的_作探針進(jìn)行作探針進(jìn)行分子雜交檢測，又要用分子雜交檢測，又要用_方法從個(gè)體水平方法從個(gè)體水平鑒定水稻植株的耐鹽性。鑒定水稻植株的耐鹽性?！窘馕觥俊窘馕觥肯拗菩詢?nèi)切酶的切點(diǎn)選擇很嚴(yán)格，限制性內(nèi)切酶的切點(diǎn)選擇很嚴(yán)

24、格，只會(huì)切斷某段特定只會(huì)切斷某段特定DNA序列中的某個(gè)特定位序列中的某個(gè)特定位點(diǎn)點(diǎn)磷酸二酯鍵，而磷酸二酯鍵，而DNA連接酶可以將該連接酶可以將該鍵連接起來。重組鍵連接起來。重組DNA分子導(dǎo)入水稻受體細(xì)分子導(dǎo)入水稻受體細(xì)胞的常用方法除了農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法外，還有基胞的常用方法除了農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法外，還有基因槍法和花粉管通道法。因槍法和花粉管通道法。導(dǎo)入外源基因的細(xì)胞需要利用植物組織培養(yǎng)導(dǎo)入外源基因的細(xì)胞需要利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)將其培養(yǎng)為植株，過程為：取材、去分技術(shù)將其培養(yǎng)為植株，過程為：取材、去分化化(或脫分化或脫分化)形成愈傷組織、再分化形成試形成愈傷組織、再分化形成試管苗、移栽培育成完整植物體。轉(zhuǎn)基因

25、是否管苗、移栽培育成完整植物體。轉(zhuǎn)基因是否成功，可測定是否有轉(zhuǎn)基因產(chǎn)物產(chǎn)生，也可成功，可測定是否有轉(zhuǎn)基因產(chǎn)物產(chǎn)生，也可通過改變條件觀察植物性狀的變化來加以確通過改變條件觀察植物性狀的變化來加以確定。定?！敬鸢浮俊敬鸢浮?1)aa(2)基因槍基因槍(花粉管通道花粉管通道)(3)植物組織培養(yǎng)脫分化植物組織培養(yǎng)脫分化(去分化去分化)再分化再分化(4)耐鹽基因耐鹽基因(目的基因目的基因)一定濃度鹽水澆灌一定濃度鹽水澆灌的的(移栽到鹽堿地中移栽到鹽堿地中)5(2008年江蘇高考年江蘇高考)將動(dòng)物致病菌的抗原基將動(dòng)物致病菌的抗原基因?qū)腭R鈴薯制成植物疫苗，飼喂轉(zhuǎn)基因馬因?qū)腭R鈴薯制成植物疫苗，飼喂轉(zhuǎn)基因馬

26、鈴薯可使動(dòng)物獲得免疫力。以下是與植物疫鈴薯可使動(dòng)物獲得免疫力。以下是與植物疫苗制備過程相關(guān)的圖和表。苗制備過程相關(guān)的圖和表。圖圖1轉(zhuǎn)基因操作流程圖轉(zhuǎn)基因操作流程圖圖圖2引物對與模板結(jié)合示意圖引物對與模板結(jié)合示意圖表表1引物對序列表引物對序列表引物引物對對AP1AACTGAAATGTAGCTATCP2TTAAGTCCATTACTCTAG引物引物對對BS1GTCCGACTAGTGGCTGTGS2AGCTGGCGTTTAGCCTCG表表2幾種限制酶識(shí)別序列及切割位點(diǎn)表幾種限制酶識(shí)別序列及切割位點(diǎn)表限制酶限制酶AluEcoRPstSma切割切割位點(diǎn)位點(diǎn)AGCTGAATTCCTGCAGCCCGGGTCG

27、ACTTAAGGACGTCGGGCCC請根據(jù)以上圖表回答下列問題。請根據(jù)以上圖表回答下列問題。(1)在采用常規(guī)在采用常規(guī)PCR方法擴(kuò)增目的基因的過程方法擴(kuò)增目的基因的過程中，使用的中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物體內(nèi)聚合酶不同于一般生物體內(nèi)的的DNA聚合酶，其最主要的特點(diǎn)是聚合酶，其最主要的特點(diǎn)是_。(2)PCR過程中退火過程中退火(復(fù)性復(fù)性)溫度必須根據(jù)引物溫度必須根據(jù)引物的堿基數(shù)量和種類來設(shè)定。表的堿基數(shù)量和種類來設(shè)定。表1為根據(jù)模板設(shè)為根據(jù)模板設(shè)計(jì)的兩對引物序列，圖計(jì)的兩對引物序列，圖2為引物對與模板結(jié)合為引物對與模板結(jié)合示意圖。請判斷哪一對引物可采用較高的退示意圖。請判斷哪一對引物

28、可采用較高的退火溫度？火溫度？_。(3)圖圖1步驟步驟所用的所用的DNA連接酶對所連接的連接酶對所連接的DNA兩端堿基序列是否有專一性要求？兩端堿基序列是否有專一性要求？_。(4)為將外源基因轉(zhuǎn)入馬鈴薯，圖為將外源基因轉(zhuǎn)入馬鈴薯，圖1步驟步驟轉(zhuǎn)基轉(zhuǎn)基因所用的細(xì)菌因所用的細(xì)菌B通常為通常為_。(5)對符合設(shè)計(jì)要求的重組質(zhì)粒對符合設(shè)計(jì)要求的重組質(zhì)粒T進(jìn)行酶切。進(jìn)行酶切。假設(shè)所用的酶均可將識(shí)別位點(diǎn)完全切開，請假設(shè)所用的酶均可將識(shí)別位點(diǎn)完全切開，請根據(jù)圖根據(jù)圖1中標(biāo)示的酶切位點(diǎn)和表中標(biāo)示的酶切位點(diǎn)和表2所列的識(shí)別所列的識(shí)別序列，對以下酶切結(jié)果作出判斷。序列，對以下酶切結(jié)果作出判斷。采用采用EcoR和和

29、Pst酶切，得到酶切，得到_種種DNA片段。片段。采用采用EcoR和和Sma酶切，得到酶切，得到_種種DNA片段。片段。【答案】【答案】(1)耐高溫耐高溫(2)引物對引物對B(3)否否(4)農(nóng)桿菌農(nóng)桿菌(5)21闖關(guān)訓(xùn)練點(diǎn)擊進(jìn)入鏈接1.31.3、1.41.4基因工程的應(yīng)用蛋白基因工程的應(yīng)用蛋白質(zhì)工程的崛起質(zhì)工程的崛起一、基因工程的應(yīng)用成果一、基因工程的應(yīng)用成果1乳腺生物反應(yīng)器與微生物生產(chǎn)的比較乳腺生物反應(yīng)器與微生物生產(chǎn)的比較類型類型項(xiàng)目項(xiàng)目乳腺生物反應(yīng)器乳腺生物反應(yīng)器微生物生產(chǎn)微生物生產(chǎn)基因結(jié)基因結(jié)構(gòu)構(gòu)動(dòng)物基因結(jié)構(gòu)與人類動(dòng)物基因結(jié)構(gòu)與人類基因結(jié)構(gòu)相同基因結(jié)構(gòu)相同與人類基因結(jié)構(gòu)不與人類基因結(jié)構(gòu)不

30、同同基因表基因表達(dá)達(dá)與天然蛋白質(zhì)活性沒與天然蛋白質(zhì)活性沒有區(qū)別有區(qū)別由于可能缺少內(nèi)質(zhì)由于可能缺少內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等細(xì)網(wǎng)、高爾基體等細(xì)胞器，產(chǎn)物可能不胞器，產(chǎn)物可能不具有生物活性具有生物活性類型類型項(xiàng)目項(xiàng)目乳腺生物反應(yīng)器乳腺生物反應(yīng)器微生物生產(chǎn)微生物生產(chǎn)產(chǎn)物提產(chǎn)物提取取從乳汁中較易分從乳汁中較易分離提取離提取從細(xì)胞中提取，從細(xì)胞中提取，較為復(fù)雜較為復(fù)雜生產(chǎn)設(shè)生產(chǎn)設(shè)備備畜牧業(yè)生產(chǎn)，加畜牧業(yè)生產(chǎn)，加提取設(shè)備提取設(shè)備工業(yè)生產(chǎn)，設(shè)備工業(yè)生產(chǎn)，設(shè)備精良精良乳腺生物反應(yīng)器受生物性別的限制，若從動(dòng)乳腺生物反應(yīng)器受生物性別的限制，若從動(dòng)物尿液中提取目的基因產(chǎn)物則不受性別限制。物尿液中提取目的基因產(chǎn)物則不受性別限

31、制。2基因治療基因治療 (1)成果：將腺苷脫氨酶基因轉(zhuǎn)入患者淋巴成果：將腺苷脫氨酶基因轉(zhuǎn)入患者淋巴細(xì)胞中，治療復(fù)合型免疫缺陷癥。細(xì)胞中，治療復(fù)合型免疫缺陷癥。(2)方法：方法：體外基因治療：先從病人體內(nèi)獲體外基因治療：先從病人體內(nèi)獲得某種細(xì)胞，如得某種細(xì)胞，如T淋巴細(xì)胞，進(jìn)行培養(yǎng)。然后，淋巴細(xì)胞，進(jìn)行培養(yǎng)。然后，在體外完成基因轉(zhuǎn)移，再篩選成功轉(zhuǎn)移的細(xì)在體外完成基因轉(zhuǎn)移，再篩選成功轉(zhuǎn)移的細(xì)胞進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng)，最后重新輸入患者體內(nèi)。胞進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng)，最后重新輸入患者體內(nèi)。體內(nèi)基因治療：直接向人體組織細(xì)胞中轉(zhuǎn)體內(nèi)基因治療：直接向人體組織細(xì)胞中轉(zhuǎn)移基因的治療方法。如移基因的治療方法。如1994年美國科學(xué)家利

32、年美國科學(xué)家利用經(jīng)過修飾的腺病毒作載體，成功地將治療用經(jīng)過修飾的腺病毒作載體，成功地將治療遺傳性囊性纖維化病的正常基因轉(zhuǎn)入患者肺遺傳性囊性纖維化病的正?；蜣D(zhuǎn)入患者肺組織中。組織中。(3)基因治療的過程基因治療的過程(以鐮刀型細(xì)胞貧血癥的治以鐮刀型細(xì)胞貧血癥的治療為例療為例)用限制性核酸內(nèi)切酶從人的用限制性核酸內(nèi)切酶從人的DNA分子中切分子中切取血紅蛋白基因。取血紅蛋白基因。用同一種限制性核酸內(nèi)切酶在載體用同一種限制性核酸內(nèi)切酶在載體DNA上上切開一個(gè)切口，用切開一個(gè)切口，用DNA連接酶將正常血紅蛋連接酶將正常血紅蛋白基因連接在載體白基因連接在載體DNA上，形成重組載體。上，形成重組載體。將攜

33、帶正常血紅蛋白基因的重組載體導(dǎo)入將攜帶正常血紅蛋白基因的重組載體導(dǎo)入患者的造血干細(xì)胞中，并將重組載體插入到患者的造血干細(xì)胞中，并將重組載體插入到染色體染色體DNA上。用選擇培養(yǎng)基篩選出含重組上。用選擇培養(yǎng)基篩選出含重組質(zhì)粒的造血干細(xì)胞。質(zhì)粒的造血干細(xì)胞。將攜帶正常血紅蛋白基因的造血干細(xì)胞輸將攜帶正常血紅蛋白基因的造血干細(xì)胞輸入患者骨髓中，此造血干細(xì)胞產(chǎn)生含正常血入患者骨髓中，此造血干細(xì)胞產(chǎn)生含正常血紅蛋白的紅細(xì)胞，以根治鐮刀型細(xì)胞貧血癥。紅蛋白的紅細(xì)胞，以根治鐮刀型細(xì)胞貧血癥。二、蛋白質(zhì)工程二、蛋白質(zhì)工程1蛋白質(zhì)工程的基本原理蛋白質(zhì)工程的基本原理2蛋白質(zhì)工程與基因工程的比較項(xiàng)目項(xiàng)目蛋白質(zhì)工程蛋

34、白質(zhì)工程基因工程基因工程區(qū)區(qū)別別過過程程預(yù)期蛋白質(zhì)功能預(yù)期蛋白質(zhì)功能設(shè)計(jì)設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)推測氨基推測氨基酸序列酸序列推測脫氧核苷推測脫氧核苷酸序列酸序列 合成合成DNA表表達(dá)出蛋白質(zhì)達(dá)出蛋白質(zhì)獲取目的基因獲取目的基因構(gòu)建構(gòu)建表達(dá)載體表達(dá)載體導(dǎo)入受體導(dǎo)入受體細(xì)胞細(xì)胞目的基因的檢目的基因的檢測與鑒定測與鑒定實(shí)實(shí)質(zhì)質(zhì)定向改造或生產(chǎn)人類所定向改造或生產(chǎn)人類所需蛋白質(zhì)需蛋白質(zhì)定向改造生物的遺傳定向改造生物的遺傳特性，以獲得人類所特性，以獲得人類所需的生物類型或生物需的生物類型或生物產(chǎn)品產(chǎn)品(基因的異體表達(dá)基因的異體表達(dá))項(xiàng)目項(xiàng)目蛋白質(zhì)工程蛋白質(zhì)工程基因工程基因工程區(qū)區(qū)別別結(jié)結(jié)果果生產(chǎn)自然界沒有的

35、蛋生產(chǎn)自然界沒有的蛋白質(zhì)白質(zhì)生產(chǎn)自然界中已生產(chǎn)自然界中已有的蛋白質(zhì)有的蛋白質(zhì)聯(lián)系聯(lián)系蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延伸出來的第二代基因工程。因?yàn)閷ΜF(xiàn)有伸出來的第二代基因工程。因?yàn)閷ΜF(xiàn)有蛋白質(zhì)的改造或制造新的蛋白質(zhì)，必須蛋白質(zhì)的改造或制造新的蛋白質(zhì)，必須通過基因修飾或基因合成實(shí)現(xiàn)通過基因修飾或基因合成實(shí)現(xiàn) 已知已知SARS是由一種是由一種RNA病毒感染所引病毒感染所引起的疾病。起的疾病。SARS病毒表面的病毒表面的S蛋白是主要的蛋白是主要的病毒抗原，在病毒抗原，在SARS病人康復(fù)后的血清中有抗病人康復(fù)后的血清中有抗S蛋白的特異性抗體。某研究小組為了研制預(yù)蛋白的

36、特異性抗體。某研究小組為了研制預(yù)防防SARS病毒的疫苗，開展了前期研究工作。病毒的疫苗，開展了前期研究工作。其簡要的操作流程如下：其簡要的操作流程如下：(1)實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)步驟所代表的反應(yīng)過程是所代表的反應(yīng)過程是_。(2)步驟步驟構(gòu)建重組表達(dá)載體構(gòu)建重組表達(dá)載體A和重組表達(dá)載和重組表達(dá)載體體B必須使用限制性內(nèi)切酶和必須使用限制性內(nèi)切酶和_酶，后者酶，后者的作用是將用限制性內(nèi)切酶切割的的作用是將用限制性內(nèi)切酶切割的_和和_連接起來。連接起來。(3)如果省略步驟如果省略步驟而將大量擴(kuò)增的而將大量擴(kuò)增的S基因直接基因直接導(dǎo)入大腸桿菌，一般情況下，不能得到表達(dá)導(dǎo)入大腸桿菌，一般情況下，不能得到表達(dá)的的S

37、蛋白，其原因是蛋白，其原因是S基因在大腸桿菌中不能基因在大腸桿菌中不能_，也不能，也不能_。(4)為了檢驗(yàn)步驟為了檢驗(yàn)步驟所表達(dá)的所表達(dá)的S蛋白是否與病毒蛋白是否與病毒S蛋白有相同的免疫反應(yīng)特征，可用蛋白有相同的免疫反應(yīng)特征，可用_與與_進(jìn)行抗原進(jìn)行抗原抗體特異性反應(yīng)實(shí)驗(yàn)，從而抗體特異性反應(yīng)實(shí)驗(yàn)，從而得出得出結(jié)論。結(jié)論。(5)步驟步驟和和的結(jié)果相比，原核細(xì)胞表達(dá)的的結(jié)果相比，原核細(xì)胞表達(dá)的S蛋白與真核細(xì)胞表達(dá)的蛋白與真核細(xì)胞表達(dá)的S蛋白的氨基酸序列蛋白的氨基酸序列_(相同，不同相同，不同)，根本原因是，根本原因是_?！窘馕觥俊窘馕觥看祟}以免疫知識(shí)為背景，實(shí)則考此題以免疫知識(shí)為背景，實(shí)則考查基因

38、工程的相關(guān)知識(shí)。查基因工程的相關(guān)知識(shí)。SARS病毒的遺傳物病毒的遺傳物質(zhì)是質(zhì)是RNA，其遺傳信息的表達(dá)首先需在宿主，其遺傳信息的表達(dá)首先需在宿主細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄合成相應(yīng)的細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄合成相應(yīng)的DNA。利用這。利用這一點(diǎn)用逆轉(zhuǎn)錄的方法可獲得控制產(chǎn)生一點(diǎn)用逆轉(zhuǎn)錄的方法可獲得控制產(chǎn)生S蛋白的蛋白的基因基因(目的基因目的基因)。目的基因的剪接需要工具。目的基因的剪接需要工具酶酶限制性內(nèi)切酶和限制性內(nèi)切酶和DNA連接酶。連接酶。一般用同種限制酶分別切割目的基因和運(yùn)載一般用同種限制酶分別切割目的基因和運(yùn)載體后，用體后，用DNA連接酶將二者連接起來。構(gòu)建連接酶將二者連接起來。構(gòu)建基因表達(dá)載體的目的是使目

39、的基因在受體細(xì)基因表達(dá)載體的目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代，同胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代，同時(shí)，使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用，這是時(shí)，使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用，這是因?yàn)槟康幕蛟谑荏w細(xì)胞內(nèi)是不能單獨(dú)穩(wěn)定因?yàn)槟康幕蛟谑荏w細(xì)胞內(nèi)是不能單獨(dú)穩(wěn)定存在并表達(dá)的。存在并表達(dá)的。利用抗原利用抗原抗體反應(yīng)可以檢測蛋白質(zhì)，因此抗體反應(yīng)可以檢測蛋白質(zhì)，因此要檢測基因工程產(chǎn)物是否與病毒的要檢測基因工程產(chǎn)物是否與病毒的S蛋白有相蛋白有相同的免疫反應(yīng)特性，可以用病人康復(fù)后血清同的免疫反應(yīng)特性，可以用病人康復(fù)后血清中提取的抗中提取的抗S蛋白抗體與基因工程產(chǎn)生的蛋白蛋白抗體與基因工

40、程產(chǎn)生的蛋白質(zhì)進(jìn)行抗原質(zhì)進(jìn)行抗原抗體反應(yīng)實(shí)驗(yàn)。相同的目的基抗體反應(yīng)實(shí)驗(yàn)。相同的目的基因?qū)氩煌氖荏w，由于基因攜帶的遺傳信因?qū)氩煌氖荏w，由于基因攜帶的遺傳信息相同，不同的生物又共用一套遺傳密碼，息相同，不同的生物又共用一套遺傳密碼，所以合成蛋白質(zhì)的氨基酸序列是相同的。所以合成蛋白質(zhì)的氨基酸序列是相同的?！敬鸢浮俊敬鸢浮?1)逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄(2)DNA連接載體連接載體S基因基因(3)復(fù)制合成復(fù)制合成S基因的基因的mRNA(4)大腸桿菌大腸桿菌中表達(dá)的中表達(dá)的S蛋白蛋白SARS康復(fù)病人血清康復(fù)病人血清(5)相相同表達(dá)蛋白質(zhì)所用的基因相同同表達(dá)蛋白質(zhì)所用的基因相同 (2009年廣東高考題年廣東高考

41、題)(1)飼料加工過程飼料加工過程溫度較高，要求植酸酶具有較好的高溫穩(wěn)定溫度較高，要求植酸酶具有較好的高溫穩(wěn)定性。利用蛋白質(zhì)工程技術(shù)對其進(jìn)行改造時(shí)，性。利用蛋白質(zhì)工程技術(shù)對其進(jìn)行改造時(shí)，首先必須了解植酸酶的首先必須了解植酸酶的_，然后改變植，然后改變植酸酶的酸酶的_，從而得到新的植酸酶。，從而得到新的植酸酶。(2)培育轉(zhuǎn)植酸酶基因的大豆，可提高其作為培育轉(zhuǎn)植酸酶基因的大豆，可提高其作為飼料原料時(shí)磷的利用率。將植酸酶基因?qū)腼暳显蠒r(shí)磷的利用率。將植酸酶基因?qū)氪蠖辜?xì)胞常用的方法是大豆細(xì)胞常用的方法是_。請簡述獲得轉(zhuǎn)。請簡述獲得轉(zhuǎn)基因植株的完整過程?；蛑仓甑耐暾^程。_。(3)為了提高豬對飼料

42、中磷的利用率，科學(xué)家為了提高豬對飼料中磷的利用率，科學(xué)家將帶有植酸酶基因的重組質(zhì)粒通過將帶有植酸酶基因的重組質(zhì)粒通過_轉(zhuǎn)入轉(zhuǎn)入豬的受精卵中。該受精卵培養(yǎng)至一定時(shí)期后豬的受精卵中。該受精卵培養(yǎng)至一定時(shí)期后可通過可通過_方法，從而一次得到多個(gè)轉(zhuǎn)方法，從而一次得到多個(gè)轉(zhuǎn)基因豬個(gè)體。基因豬個(gè)體。(4)若這些轉(zhuǎn)基因動(dòng)、植物進(jìn)入生態(tài)環(huán)境中，若這些轉(zhuǎn)基因動(dòng)、植物進(jìn)入生態(tài)環(huán)境中，對生態(tài)環(huán)境有何影響？對生態(tài)環(huán)境有何影響？【解析】【解析】(1)蛋白質(zhì)工程首先要根據(jù)已有蛋蛋白質(zhì)工程首先要根據(jù)已有蛋白質(zhì)，從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，設(shè)計(jì)預(yù)期白質(zhì)，從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測應(yīng)有的氨基酸序列，找的蛋白

43、質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測應(yīng)有的氨基酸序列，找到相應(yīng)的脫氧核苷酸序列，合成目的基因，到相應(yīng)的脫氧核苷酸序列，合成目的基因，再通過基因工程產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因生物。再通過基因工程產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因生物。(2)將目的將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有：農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有：農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法，其中有基因槍法和花粉管通道法，其中有80%的轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)基因植物都是通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法產(chǎn)生的。基因植物都是通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法產(chǎn)生的。(3)動(dòng)物細(xì)胞核的全能性受細(xì)胞質(zhì)的抑制，故動(dòng)物細(xì)胞核的全能性受細(xì)胞質(zhì)的抑制，故目的基因需注入到受精卵中，再將注射了目目的基因需注入到受精卵中，再將注射了目的基因的受精卵移植到雌性動(dòng)物的輸卵

44、管或的基因的受精卵移植到雌性動(dòng)物的輸卵管或子宮內(nèi)，使其發(fā)育成具有新性狀的動(dòng)物。子宮內(nèi)，使其發(fā)育成具有新性狀的動(dòng)物。(4)轉(zhuǎn)基因生物可造成基因污染等不良影響。轉(zhuǎn)基因生物可造成基因污染等不良影響?！敬鸢浮俊敬鸢浮?1)分子結(jié)構(gòu)及預(yù)期功能基因分子結(jié)構(gòu)及預(yù)期功能基因(2)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法首先將目的基因與質(zhì)粒組農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法首先將目的基因與質(zhì)粒組合，構(gòu)建基因表達(dá)載體，將含目的基因的表合，構(gòu)建基因表達(dá)載體，將含目的基因的表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞，通過植物組織培養(yǎng)獲達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞，通過植物組織培養(yǎng)獲得表現(xiàn)新性狀的植物。得表現(xiàn)新性狀的植物。(3)顯微注射法胚胎顯微注射法胚胎分割分割(4)轉(zhuǎn)基因生物及其產(chǎn)品對生物多樣

45、性、轉(zhuǎn)基因生物及其產(chǎn)品對生物多樣性、生態(tài)環(huán)境可能產(chǎn)生的影響主要表現(xiàn)在以下幾生態(tài)環(huán)境可能產(chǎn)生的影響主要表現(xiàn)在以下幾方面：方面：轉(zhuǎn)基因生物打破了物種的原有界限，轉(zhuǎn)基因生物打破了物種的原有界限，改變了物質(zhì)循環(huán)和能量流動(dòng)，對生態(tài)系統(tǒng)的改變了物質(zhì)循環(huán)和能量流動(dòng)，對生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性造成破壞；穩(wěn)定性造成破壞；重組重組DNA與微生物雜交，可能出現(xiàn)對動(dòng)、與微生物雜交，可能出現(xiàn)對動(dòng)、植物和人類有害的病原微生物；植物和人類有害的病原微生物；增加目標(biāo)增加目標(biāo)害蟲的抗性和進(jìn)化速度；害蟲的抗性和進(jìn)化速度；轉(zhuǎn)基因植物通過轉(zhuǎn)基因植物通過傳粉進(jìn)行基因轉(zhuǎn)移，導(dǎo)致超級(jí)雜草出現(xiàn)；傳粉進(jìn)行基因轉(zhuǎn)移，導(dǎo)致超級(jí)雜草出現(xiàn)；轉(zhuǎn)基因植物的花粉如

46、含有有毒蛋白或過敏蛋轉(zhuǎn)基因植物的花粉如含有有毒蛋白或過敏蛋白，通過蜜蜂的采集，很可能進(jìn)入蜜蜂中，白，通過蜜蜂的采集，很可能進(jìn)入蜜蜂中，再經(jīng)過食物鏈的傳遞，最后有可能進(jìn)入其他再經(jīng)過食物鏈的傳遞，最后有可能進(jìn)入其他動(dòng)物和人體內(nèi)。動(dòng)物和人體內(nèi)。1(2009年安徽高考題年安徽高考題)2008年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)授予了授予了“發(fā)現(xiàn)和發(fā)展了水母綠色熒光蛋白發(fā)現(xiàn)和發(fā)展了水母綠色熒光蛋白”的三位科學(xué)家。將綠色熒光蛋白基因的片段的三位科學(xué)家。將綠色熒光蛋白基因的片段與目的基因連接起來組成一個(gè)融合基因，再與目的基因連接起來組成一個(gè)融合基因，再將該融合基因轉(zhuǎn)入真核生物細(xì)胞內(nèi)，表達(dá)出將該融合基因轉(zhuǎn)入真核生物細(xì)

47、胞內(nèi)，表達(dá)出的蛋白質(zhì)就會(huì)帶有綠色熒光。綠色熒光蛋白的蛋白質(zhì)就會(huì)帶有綠色熒光。綠色熒光蛋白在該研究中的主要作用是在該研究中的主要作用是()A追蹤目的基因在細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制過程追蹤目的基因在細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制過程B追蹤目的基因插入到染色體上的位置追蹤目的基因插入到染色體上的位置C追蹤目的基因編碼的蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的分追蹤目的基因編碼的蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的分布布D追蹤目的基因編碼的蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)追蹤目的基因編碼的蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)【解析】【解析】綠色熒光蛋白基因指導(dǎo)合成的蛋綠色熒光蛋白基因指導(dǎo)合成的蛋白質(zhì)為綠色熒光蛋白，該基因與目的基因組白質(zhì)為綠色熒光蛋白，該基因與目的基因組成的融合基因指導(dǎo)合成的蛋白質(zhì)即含有綠色成

48、的融合基因指導(dǎo)合成的蛋白質(zhì)即含有綠色熒光蛋白，故綠色熒光蛋白基因可用來追蹤熒光蛋白，故綠色熒光蛋白基因可用來追蹤目的基因編碼的蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的分布。目的基因編碼的蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的分布。【答案】【答案】C2(2008年高考上海卷年高考上海卷)以重組以重組DNA技術(shù)為核技術(shù)為核心的基因工程正在改變著人類的生活。請回心的基因工程正在改變著人類的生活。請回答下列問題：答下列問題：(1)獲得目的基因的方法通常包括獲得目的基因的方法通常包括_和和_。(2)切割和連接切割和連接DNA分子所使用的酶分別是分子所使用的酶分別是_和和_。(3)運(yùn)送目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體一般選運(yùn)送目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體一般

49、選用病毒或用病毒或_，后者的形狀呈，后者的形狀呈_。(4)由于重組由于重組DNA分子成功導(dǎo)入受體細(xì)胞的頻分子成功導(dǎo)入受體細(xì)胞的頻率率_，所以在轉(zhuǎn)化后通常需要進(jìn)行，所以在轉(zhuǎn)化后通常需要進(jìn)行_操作。操作。(5)將人胰島素基因分別導(dǎo)入大腸桿菌與酵母將人胰島素基因分別導(dǎo)入大腸桿菌與酵母菌，從兩者中生產(chǎn)的胰島素在功能和菌，從兩者中生產(chǎn)的胰島素在功能和_序列上是相同的。序列上是相同的?！窘馕觥俊窘馕觥吭擃}考查基因工程的操作，屬于該題考查基因工程的操作，屬于記憶性的內(nèi)容，見答案。記憶性的內(nèi)容，見答案?！敬鸢浮俊敬鸢浮?1)化學(xué)合成化學(xué)合成(人工合成人工合成)酶切獲酶切獲取取(從染色體從染色體DNA分離分離/

50、從生物細(xì)胞分離從生物細(xì)胞分離)(2)限制性核酸內(nèi)切酶限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶限制酶)DNA連接酶連接酶(連接酶連接酶)(3)質(zhì)粒小型環(huán)狀質(zhì)粒小型環(huán)狀(雙鏈環(huán)狀、環(huán)狀雙鏈環(huán)狀、環(huán)狀)(4)低篩選低篩選(5)氨基酸氨基酸3.(2008年海南高考年海南高考)右圖右圖為某種質(zhì)粒表達(dá)載體簡圖，為某種質(zhì)粒表達(dá)載體簡圖，小箭頭所指分別為限制性小箭頭所指分別為限制性內(nèi)切酶內(nèi)切酶EcoR 、BamH的酶切位點(diǎn)，的酶切位點(diǎn)，ampR為青為青霉素抗性基因，霉素抗性基因，tctR為四環(huán)素抗性基因，為四環(huán)素抗性基因，P為為啟動(dòng)子，啟動(dòng)子，T為終止子，為終止子，ori為復(fù)制原點(diǎn)。已知為復(fù)制原點(diǎn)。已知目的基因的兩端分別有包

51、括目的基因的兩端分別有包括EcoR、BamH在內(nèi)的多種酶的酶切位點(diǎn)。在內(nèi)的多種酶的酶切位點(diǎn)。據(jù)圖回答：據(jù)圖回答：(1)將含有目的基因的將含有目的基因的DNA與質(zhì)粒表達(dá)載體分與質(zhì)粒表達(dá)載體分別用別用EcoR酶切，酶切產(chǎn)物用酶切，酶切產(chǎn)物用DNA連接酶進(jìn)連接酶進(jìn)行連接后，其中由兩個(gè)行連接后，其中由兩個(gè)DNA片段之間連接形片段之間連接形成的產(chǎn)物有成的產(chǎn)物有_、_、_三種。若要從這些連接產(chǎn)物中分離出重組質(zhì)三種。若要從這些連接產(chǎn)物中分離出重組質(zhì)粒，需要對這些連接產(chǎn)物進(jìn)行粒，需要對這些連接產(chǎn)物進(jìn)行_。(2)用上述用上述3種連接產(chǎn)物與無任何抗藥性的原核種連接產(chǎn)物與無任何抗藥性的原核宿主細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)。之后

52、將這些宿主細(xì)宿主細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)。之后將這些宿主細(xì)胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中，能生長的原胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細(xì)胞所含有的連接產(chǎn)物是核宿主細(xì)胞所含有的連接產(chǎn)物是_；若接種到含青霉素的培養(yǎng)基中，能生長的原若接種到含青霉素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細(xì)胞所含有的連接產(chǎn)物是核宿主細(xì)胞所含有的連接產(chǎn)物是_。(3)目的基因表達(dá)時(shí)，目的基因表達(dá)時(shí)，RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)是的位點(diǎn)是_，其合成的產(chǎn)物是，其合成的產(chǎn)物是_。(4)在上述實(shí)驗(yàn)中，為了防止目的基因和質(zhì)粒在上述實(shí)驗(yàn)中，為了防止目的基因和質(zhì)粒表達(dá)載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，表達(dá)載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生

53、任意連接，酶切時(shí)應(yīng)選用的酶是酶切時(shí)應(yīng)選用的酶是_?！窘馕觥俊窘馕觥?在基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程中在基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程中用同種限制酶來切割目的基因和質(zhì)粒，使之用同種限制酶來切割目的基因和質(zhì)粒，使之產(chǎn)生相同的黏性末端，以利于產(chǎn)生相同的黏性末端，以利于DNA片段的連片段的連接。將切割后的目的基因和質(zhì)粒，用接。將切割后的目的基因和質(zhì)粒，用DNA連連接酶進(jìn)行連接，它們之間隨機(jī)連接，可有三接酶進(jìn)行連接，它們之間隨機(jī)連接，可有三種產(chǎn)物：目的基因種產(chǎn)物：目的基因載體連接物、載體載體連接物、載體載載體連接物和目的基因體連接物和目的基因目的基因連接物。目的基因連接物。從圖中可以看出，目的基因的插入位點(diǎn)在抗從圖中

54、可以看出，目的基因的插入位點(diǎn)在抗四環(huán)素基因上，可推知：目的基因四環(huán)素基因上，可推知：目的基因載體連載體連接物的抗四環(huán)素基因被破壞，喪失了抗四環(huán)接物的抗四環(huán)素基因被破壞，喪失了抗四環(huán)素的能力，但保留了抗青霉素的能力；載素的能力，但保留了抗青霉素的能力；載體體載體連接物既保留了抗四環(huán)素的能力也載體連接物既保留了抗四環(huán)素的能力也保留了抗青霉素的能力；目的基因保留了抗青霉素的能力；目的基因目的基目的基因連接物既無抗青霉素基因也無抗四環(huán)素基因連接物既無抗青霉素基因也無抗四環(huán)素基因，不具備抗性。獲得因，不具備抗性。獲得DNA連接產(chǎn)物以后，連接產(chǎn)物以后，必須通過篩選方能獲得所需的基因表達(dá)載體。必須通過篩選方

55、能獲得所需的基因表達(dá)載體。導(dǎo)入宿主細(xì)胞后方能表達(dá)獲得基因產(chǎn)物。導(dǎo)入宿主細(xì)胞后方能表達(dá)獲得基因產(chǎn)物。 目目的基因表達(dá)過程中，的基因表達(dá)過程中，RNA聚合酶首先與啟動(dòng)聚合酶首先與啟動(dòng)子結(jié)合，指導(dǎo)目的基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生子結(jié)合，指導(dǎo)目的基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生mRNA，mRNA再指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成。從圖中可看出再指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成。從圖中可看出抗四環(huán)素基因上有兩個(gè)不同的切割位點(diǎn)，所抗四環(huán)素基因上有兩個(gè)不同的切割位點(diǎn)，所以在實(shí)際操作過程中，為避免切割后的末端以在實(shí)際操作過程中，為避免切割后的末端任意連接，可用任意連接，可用EcoR 和和BamH 同時(shí)對目同時(shí)對目的基因和質(zhì)粒進(jìn)行切割，使同一切割產(chǎn)物的的基因和質(zhì)粒進(jìn)行切割，使同

56、一切割產(chǎn)物的黏性末端不同。黏性末端不同?！敬鸢浮俊敬鸢浮?1)目的基因目的基因載體連接物載載體連接物載體體載體連接物目的基因載體連接物目的基因目的基因連接目的基因連接物分離純化物分離純化(2)載體載體載體連接物目的載體連接物目的基因基因載體連接物、載體載體連接物、載體載體連接物載體連接物(3)啟動(dòng)子啟動(dòng)子mRNA(4)EcoR和和BamH4.(2009年寧夏高考題年寧夏高考題)多數(shù)多數(shù)真核生物基因中編碼蛋白真核生物基因中編碼蛋白質(zhì)的序列被一些不編碼蛋質(zhì)的序列被一些不編碼蛋白質(zhì)的序列隔開，每一個(gè)白質(zhì)的序列隔開，每一個(gè)不編碼蛋白質(zhì)的序列稱為一個(gè)內(nèi)含子。這類不編碼蛋白質(zhì)的序列稱為一個(gè)內(nèi)含子。這類基因

57、經(jīng)轉(zhuǎn)錄、加工形成的基因經(jīng)轉(zhuǎn)錄、加工形成的mRNA中只含有編中只含有編碼蛋白質(zhì)的序列。某同學(xué)為檢測某基因中是碼蛋白質(zhì)的序列。某同學(xué)為檢測某基因中是否存在內(nèi)含子，進(jìn)行了下面的實(shí)驗(yàn)：否存在內(nèi)含子，進(jìn)行了下面的實(shí)驗(yàn)：步驟步驟：獲取該基因的雙鏈：獲取該基因的雙鏈DNA片段及其片段及其mRNA；步驟步驟：加熱：加熱DNA雙鏈?zhǔn)怪蔀閱捂?，并與雙鏈?zhǔn)怪蔀閱捂?，并與步驟步驟所獲得的所獲得的mRNA按照堿基配對原則形按照堿基配對原則形成雙鏈分子；成雙鏈分子；步驟步驟：制片、染色、電鏡觀察，可觀察到：制片、染色、電鏡觀察，可觀察到圖中結(jié)果。圖中結(jié)果。請回答：請回答：(1)圖中凸環(huán)形成的原因是圖中凸環(huán)形成的原因是

58、_，說明該基因有，說明該基因有_個(gè)內(nèi)含子。個(gè)內(nèi)含子。(2)如果現(xiàn)將步驟如果現(xiàn)將步驟所獲得的所獲得的mRNA逆轉(zhuǎn)錄得逆轉(zhuǎn)錄得到到DNA單鏈，然后該單鏈，然后該DNA單鏈與步驟單鏈與步驟中的中的單鏈單鏈DNA之一按照堿基配對原則形成雙鏈分之一按照堿基配對原則形成雙鏈分子，理論上也能觀察到凸環(huán)，其原因是逆轉(zhuǎn)子，理論上也能觀察到凸環(huán)，其原因是逆轉(zhuǎn)錄得到的錄得到的DNA單鏈中不含有單鏈中不含有_序列。序列。(3)DNA與與mRNA形成的雙鏈分子中堿基配對形成的雙鏈分子中堿基配對類型有類型有_種，分別是種，分別是_。【解析】【解析】由于由于mRNA中只含有編碼蛋白質(zhì)中只含有編碼蛋白質(zhì)的序列，不含有與內(nèi)含子

59、對應(yīng)的序列，因此的序列，不含有與內(nèi)含子對應(yīng)的序列，因此當(dāng)當(dāng)DNA單鏈與單鏈與mRNA按照堿基互補(bǔ)配對原則按照堿基互補(bǔ)配對原則形成雙鏈時(shí)，形成雙鏈時(shí)，DNA鏈上的內(nèi)含子序列因不能鏈上的內(nèi)含子序列因不能與與mRNA互補(bǔ)配對而形成凸環(huán)。每個(gè)凸環(huán)代互補(bǔ)配對而形成凸環(huán)。每個(gè)凸環(huán)代表一個(gè)內(nèi)含子，據(jù)圖可知有表一個(gè)內(nèi)含子，據(jù)圖可知有7個(gè)內(nèi)含子。個(gè)內(nèi)含子。由于由于mRNA中只含有編碼蛋白質(zhì)的序列，不中只含有編碼蛋白質(zhì)的序列，不含有與內(nèi)含子對應(yīng)的序列，因此當(dāng)逆轉(zhuǎn)錄形含有與內(nèi)含子對應(yīng)的序列，因此當(dāng)逆轉(zhuǎn)錄形成的成的DNA單鏈與步驟單鏈與步驟中的單鏈中的單鏈DNA之一之一進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對時(shí)，仍能觀察到凸環(huán)。進(jìn)行堿基互補(bǔ)

60、配對時(shí)，仍能觀察到凸環(huán)。DNA與與mRNA形成的雙鏈分子時(shí)，堿基配對形成的雙鏈分子時(shí)，堿基配對類型包括類型包括AU、TA、CG三種。三種?！敬鸢浮俊敬鸢浮?1)DNA中有內(nèi)含子序列，中有內(nèi)含子序列，mRNA中沒有其對應(yīng)序列，變性后形成的中沒有其對應(yīng)序列，變性后形成的DNA單鏈單鏈之一與之一與mRNA形成雙鏈分子時(shí)，該單鏈形成雙鏈分子時(shí)，該單鏈DNA中無法與中無法與mRNA配對的序列能形成凸環(huán)配對的序列能形成凸環(huán)7(2)內(nèi)含子內(nèi)含子(3)3AU、TA、CG(1)植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和體細(xì)胞克隆動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和體細(xì)胞克隆(3)動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體(1

61、)植物組織培養(yǎng)的原理及過程。植物組織培養(yǎng)的原理及過程。(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理及過程。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理及過程。(3)動(dòng)物細(xì)胞融合及單克隆抗體的制備過程。動(dòng)物細(xì)胞融合及單克隆抗體的制備過程。2.1植物細(xì)胞工程植物細(xì)胞工程一、植物細(xì)胞工程的基本技術(shù)一、植物細(xì)胞工程的基本技術(shù)1植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)(1)原理：植物細(xì)胞的全能性。原理：植物細(xì)胞的全能性。(2)過程：離體的植物器官、過程：離體的植物器官、組織或細(xì)胞組織或細(xì)胞 愈傷組織愈傷組織 根、根、芽芽植物體。植物體。上述各過程比較如下：上述各過程比較如下：名稱名稱過程過程形成體特點(diǎn)形成體特點(diǎn)培養(yǎng)基培養(yǎng)基光光脫分化脫分化由外植體成由外植體成為愈傷

62、組織為愈傷組織排列疏松、高排列疏松、高度液泡化的薄度液泡化的薄壁細(xì)胞團(tuán)壁細(xì)胞團(tuán)生長素與生長素與細(xì)胞分裂細(xì)胞分裂素的比例素的比例大大避光避光再分化再分化由愈傷組織由愈傷組織成為幼苗或成為幼苗或胚狀結(jié)構(gòu)胚狀結(jié)構(gòu)有根、芽或有有根、芽或有生根發(fā)芽的能生根發(fā)芽的能力力上述比例上述比例小小需光需光營養(yǎng)生營養(yǎng)生長生殖長生殖生長生長發(fā)育成完整發(fā)育成完整的植物體的植物體由根、莖、葉、由根、莖、葉、花、果實(shí)、種花、果實(shí)、種子組成子組成自身產(chǎn)生自身產(chǎn)生各種激素各種激素需光需光 植物細(xì)胞分化、脫分化及再分化植物細(xì)胞分化、脫分化及再分化(1)分化：基因在特定時(shí)間和空間條件下選擇分化：基因在特定時(shí)間和空間條件下選擇性表達(dá)

63、的結(jié)果，是在機(jī)體的調(diào)控下完成的。性表達(dá)的結(jié)果，是在機(jī)體的調(diào)控下完成的。(2)脫分化的條件：離體、一定的營養(yǎng)物質(zhì)、脫分化的條件：離體、一定的營養(yǎng)物質(zhì)、激素和其他外界條件激素和其他外界條件(無菌、適宜的溫度等無菌、適宜的溫度等)。(3)影響植物細(xì)胞脫分化、再分化的關(guān)鍵因素影響植物細(xì)胞脫分化、再分化的關(guān)鍵因素是植物激素，特別是細(xì)胞分裂素和生長素的是植物激素，特別是細(xì)胞分裂素和生長素的配比。根據(jù)需要誘導(dǎo)分化的器官不同，對二配比。根據(jù)需要誘導(dǎo)分化的器官不同，對二者的配比要求也不同。者的配比要求也不同。二、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)二、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)1原理原理：膜的流動(dòng)性和細(xì)胞的全能性。：膜的流動(dòng)性和細(xì)胞的全

64、能性。2過程過程下圖表示兩種不同品種的植物細(xì)胞下圖表示兩種不同品種的植物細(xì)胞A、B進(jìn)行進(jìn)行細(xì)胞融合的過程，即植物體細(xì)胞雜交的過程：細(xì)胞融合的過程，即植物體細(xì)胞雜交的過程：過程解讀：過程解讀：C：用酶解法去掉細(xì)胞壁，獲得原：用酶解法去掉細(xì)胞壁，獲得原生質(zhì)體的過程，所用酶為纖維素酶和果膠酶。生質(zhì)體的過程，所用酶為纖維素酶和果膠酶。D：在誘導(dǎo)劑的作用下進(jìn)行誘導(dǎo)融合，先進(jìn)行：在誘導(dǎo)劑的作用下進(jìn)行誘導(dǎo)融合，先進(jìn)行膜的融合，再進(jìn)行核的融合，最后形成雜種膜的融合，再進(jìn)行核的融合，最后形成雜種細(xì)胞細(xì)胞E，E細(xì)胞有三種：細(xì)胞有三種：AA型、型、BB型、型、AB型，型，只有只有AB型才是我們所需要的雜種細(xì)胞，所以

65、型才是我們所需要的雜種細(xì)胞，所以需要進(jìn)行篩選。需要進(jìn)行篩選。常用的誘導(dǎo)方法：物理法：常用的誘導(dǎo)方法：物理法：(離心、振動(dòng)、電離心、振動(dòng)、電刺激刺激)；化學(xué)法：聚乙二醇；化學(xué)法：聚乙二醇(PEG)。G：表示細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是新的細(xì)胞壁的：表示細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是新的細(xì)胞壁的形成形成 。F：表示進(jìn)行組織培養(yǎng)。：表示進(jìn)行組織培養(yǎng)。 與傳統(tǒng)有性雜交相比，植物體細(xì)與傳統(tǒng)有性雜交相比，植物體細(xì)胞雜交的優(yōu)勢體現(xiàn)在：胞雜交的優(yōu)勢體現(xiàn)在： 克服植物有性雜交的不親和性?？朔参镉行噪s交的不親和性。打破物種之間的生殖隔離。打破物種之間的生殖隔離。擴(kuò)大遺傳重組的范圍。擴(kuò)大遺傳重組的范圍。三、植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用三

66、、植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用1植物繁殖的新途徑植物繁殖的新途徑(1)微型繁殖：用于快速繁殖優(yōu)良品種的植物微型繁殖：用于快速繁殖優(yōu)良品種的植物組織培養(yǎng)技術(shù)。組織培養(yǎng)技術(shù)。(2)作物脫毒：選取作物無毒組織作物脫毒：選取作物無毒組織(如莖尖如莖尖)進(jìn)行進(jìn)行組織培養(yǎng)，獲得脫毒苗的技術(shù)。組織培養(yǎng)，獲得脫毒苗的技術(shù)。(3)人工種子：以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、人工種子：以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽等為材料，經(jīng)過人工薄不定芽、頂芽、腋芽等為材料，經(jīng)過人工薄膜包裝得到的種子。膜包裝得到的種子。2作物新品種的培育：單倍體育種和突變體作物新品種的培育：單倍體育種和突變體的利用的利用突變體突變體Aa中中A為突變新基因，并控制著優(yōu)良為突變新基因，并控制著優(yōu)良性狀，利用單倍體育種方法步驟如下：性狀，利用單倍體育種方法步驟如下：優(yōu)點(diǎn)：穩(wěn)定遺傳，縮短育種年限。優(yōu)點(diǎn)：穩(wěn)定遺傳，縮短育種年限。3細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)：細(xì)胞產(chǎn)物有蛋白細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)：細(xì)胞產(chǎn)物有蛋白質(zhì)、脂肪、糖類、藥物、香料、生物堿等。質(zhì)、脂肪、糖類、藥物、香料、生物堿等。 (2009年福建高考題年福建高考題)轉(zhuǎn)基因抗病香蕉轉(zhuǎn)基因抗病香蕉