生物人教版選修1檢測(cè)：專題5 課題1 DNA的粗提取與鑒定

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1、 專題5　DNA和蛋白質(zhì)技術(shù) 課題1　DNA的粗提取與鑒定 題型一　DNA的粗提取與鑒定的實(shí)驗(yàn)原理 1．在混合物中提取DNA分子的基本思路是(　) A．根據(jù)各種大分子的理化性質(zhì)的差異 B．根據(jù)各種大分子的理化性質(zhì)的共性 C．根據(jù)各種大分子在細(xì)胞內(nèi)的功能 D．根據(jù)各種大分子的結(jié)構(gòu)和在細(xì)胞內(nèi)的位置 答案　A 解析　提取生物大分子的基本思路是選用一定的物理或化學(xué)方法分離具有不同物理或化學(xué)性質(zhì)的生物大分子。就DNA分子的粗提取而言，就是利用了DNA與RNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差異進(jìn)行分離的。 2．下列圖示中能正確反映DNA溶解度與NaCl溶液濃度之間關(guān)系的

2、是(　) 答案　C 解析　DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同。當(dāng)NaCl溶液濃度為0.14 mol/L時(shí)，DNA的溶解度最低，而高于或低于0.14 mol/L時(shí)，隨NaCl溶液濃度的增加或降低，DNA的溶解度都逐漸升高。 3．下列有關(guān)DNA的特性的描述，錯(cuò)誤的是(　) A．蛋白酶不能水解DNA，這體現(xiàn)了酶的專一性 B．大多數(shù)DNA不能忍受60～80 ℃的高溫 C．洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜，但對(duì)DNA沒(méi)有影響 D．DNA不溶于酒精溶液 答案　B 解析　蛋白酶能水解蛋白質(zhì)，但對(duì)DNA沒(méi)有影響，這體現(xiàn)了酶的專一性，A正確；大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受60～80 ℃的高溫，而DNA在

3、80 ℃以上才會(huì)變性，B錯(cuò)誤；洗滌劑不會(huì)影響DNA，但能夠瓦解細(xì)胞膜，C正確；DNA不溶于酒精溶液，但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精溶液，利用這一原理，可以將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步分離，D正確。 4．DNA遇二苯胺(沸水浴)會(huì)呈現(xiàn)(　) A．磚紅色　B．橘黃色　C．紫色　D．藍(lán)色 答案　D 解析　DNA遇二苯胺(沸水浴)會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色，D正確。 題型二　DNA的粗提取與鑒定的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 5．下列不適宜作為DNA提取的實(shí)驗(yàn)材料的是(　) A．雞血細(xì)胞　 B．蛙的紅細(xì)胞 C．人的成熟紅細(xì)胞　 D．菜花 答案　C 解析　雞血細(xì)胞、蛙的紅細(xì)胞、菜花細(xì)胞均含有細(xì)胞核和各種細(xì)胞器，即均含有較多

4、的DNA，因此適宜作為DNA提取的實(shí)驗(yàn)材料，A、B、D不符合題意；人的成熟紅細(xì)胞不含細(xì)胞核和各種細(xì)胞器，即不含DNA，因此不適宜作為DNA提取的實(shí)驗(yàn)材料，C符合題意。 6．進(jìn)行DNA粗提取時(shí)，若選擇的實(shí)驗(yàn)材料為植物細(xì)胞，破碎細(xì)胞時(shí)要加入一定量的洗滌劑和食鹽。加入食鹽的目的是(　) A．利于DNA的溶解　 B．分離DNA和蛋白質(zhì) C．溶解細(xì)胞膜　 D．溶解蛋白質(zhì) 答案　A 解析　實(shí)驗(yàn)材料是植物細(xì)胞時(shí)，需先加入洗滌劑和食鹽，洗滌劑的作用是瓦解細(xì)胞膜，食鹽的作用是溶解DNA。 7．在提取花椰菜的DNA時(shí)，加入洗滌劑的目的是(　) A．破壞細(xì)胞膜　 B．破壞葉綠素 C．破壞細(xì)胞壁　 D

5、．破壞DNA 答案　A 解析　在提取花椰菜的DNA時(shí)，加入洗滌劑的目的是瓦解細(xì)胞膜，從而釋放出DNA。 8．下列有關(guān)“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)相關(guān)操作中所選取的試劑，錯(cuò)誤的是(　) 選項(xiàng) 相關(guān)操作 選用的試劑 A 破碎雞血細(xì)胞 蒸餾水 B 溶解核內(nèi)DNA 0.14 mol/L的NaCl溶液 C 提取雜質(zhì)較少的DNA 冷卻的95%酒精 D DNA的鑒定 現(xiàn)配的二苯胺試劑 答案　B 解析　在雞血細(xì)胞液中加入一定量的蒸餾水，可使雞血細(xì)胞吸水漲破，A正確；2 mol/L的NaCl溶液能溶解較多的核內(nèi)DNA，但在0.14 mol/L的NaCl溶液中，DNA的溶解

6、度最低，B錯(cuò)誤；DNA不溶于酒精，而某些蛋白質(zhì)能溶于酒精，故用體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精能提取雜質(zhì)較少的DNA，C正確；在沸水浴條件下，DNA與二苯胺反應(yīng)呈現(xiàn)藍(lán)色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑，D正確。 9．如圖所示為“DNA粗提取”實(shí)驗(yàn)的相關(guān)操作步驟，其操作目的錯(cuò)誤的是(　) A．①是洗滌雞血細(xì)胞，去除雞血細(xì)胞表面的雜質(zhì) B．④是稀釋NaCl溶液至0.14 mol/L，析出DNA C．③是選用2 mol/L NaCl溶液溶解黏稠物中的DNA D．②是純化DNA，去除溶于95%的酒精中的雜質(zhì) 答案　A 解析?、偈亲岆u血細(xì)胞與蒸餾水混合而使雞血細(xì)胞處于低滲的環(huán)境中，使細(xì)胞吸

7、水漲破，釋放出DNA。 10．在NaCl溶液中反復(fù)溶解、析出并過(guò)濾，就能除去DNA溶液中的雜質(zhì)的理由不包括(　) A．用高濃度鹽溶液溶解DNA，能除去在高鹽中不能溶解的雜質(zhì) B．用低濃度鹽溶液使DNA析出，能除去溶解在低鹽溶液中的雜質(zhì) C．反復(fù)操作就能夠除去與DNA溶解度不同的多種雜質(zhì) D．反復(fù)操作就能夠使各種雜質(zhì)變性而沉淀析出 答案　D 解析　DNA在不同濃度之間反復(fù)溶解、析出過(guò)程中，并未使蛋白質(zhì)等雜質(zhì)變性。 11．為了純化提取的DNA，可直接在濾液中加入下列哪種物質(zhì)，反應(yīng)10～15 min，以達(dá)到實(shí)驗(yàn)?zāi)康?　) A．嫩肉粉　 B．蒸餾水 C．2mol·L－1 NaCl溶

8、液　 D．酒精 答案　A 解析　嫩肉粉中含有木瓜蛋白酶，能催化蛋白質(zhì)水解，從而去除濾液中的部分雜質(zhì)。 12．在DNA粗提取的實(shí)驗(yàn)中，先后兩次向燒杯中加入蒸餾水的作用分別是(　) A．稀釋血液；沖洗樣品 B．使血細(xì)胞破裂；降低NaCl溶液濃度，使DNA析出 C．使血細(xì)胞破裂；增大DNA溶解量 D．使血細(xì)胞破裂；提取含雜質(zhì)較少的DNA 答案　B 解析　在DNA粗提取的實(shí)驗(yàn)中，先后兩次向燒杯中加入蒸餾水：第一次向雞血中加入蒸餾水，目的是使雞血細(xì)胞吸水漲破，釋放細(xì)胞核物質(zhì)；第二次向2 mol·L－1的NaCl溶液中加入蒸餾水，目的是降低NaCl溶液的濃度，使DNA析出。 13．利用

9、DNA和RNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差異，可以從生物組織中提取DNA。下面是有關(guān)DNA提取鑒定實(shí)驗(yàn)的有關(guān)問(wèn)題。 (1)下圖是DNA在NaCl溶液中的溶解度曲線。 在NaCl溶液濃度低于0.14 mol/L時(shí)，DNA的溶解度隨NaCl溶液濃度的增加而________；在0.14 mol/L時(shí)，DNA的溶解度________；當(dāng)NaCl溶液濃度繼續(xù)增加時(shí)，DNA溶解度又________。 (2)為了純化提取的DNA，需要將獲取的含DNA的濾液做進(jìn)一步處理。下面是去除雜質(zhì)的三個(gè)方案： 方案一：在濾液中加入濃度為2 mol/L的NaCl溶液，過(guò)濾除去不溶的雜質(zhì)，再調(diào)節(jié)NaC

10、l溶液濃度為0.14 mol/L，析出DNA。 方案二：直接在濾液中加入嫩肉粉，反應(yīng)10～15 min，嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能夠分解蛋白質(zhì)。 方案三：將濾液放在60～75 ℃的恒溫水浴箱中，保溫10～15 min。 三個(gè)方案所利用的原理分別是什么？ ________________________________________________________________________________________________________________________________________ (3)將上述處理液過(guò)濾，加入與濾液體積相等的體積分?jǐn)?shù)為95%的冷卻

11、的酒精，攪拌后溶液中會(huì)出現(xiàn)白色絲狀物，這就是粗提取的DNA，將絲狀物放入試管，加入2 mol/L NaCl溶液5 mL，再加入4 mL二苯胺試劑，在________的條件下，DNA會(huì)被染成________色。如果將白色絲狀物置于載玻片上，滴加幾滴甲基綠染色液，DNA將呈現(xiàn)________色。 答案　(1)逐漸降低　最小　逐漸增大 (2)方案一：利用DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度的不同，通過(guò)控制NaCl溶液的濃度去除雜質(zhì)；方案二：利用蛋白酶分解雜質(zhì)蛋白質(zhì)，從而使DNA與蛋白質(zhì)分開(kāi)；方案三：利用DNA與蛋白質(zhì)對(duì)高溫耐受性的不同，從而使蛋白質(zhì)變性與DNA分離。 (3)沸水浴　藍(lán)　綠

12、解析　(1)DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同。當(dāng)NaCl溶液的物質(zhì)的量濃度低于0.14 mol·L－1時(shí)，DNA的溶解度隨NaCl溶液物質(zhì)的量濃度的增加而逐漸降低；NaCl溶液的物質(zhì)的量濃度為0.14 mol·L－1時(shí)，DNA的溶解度最??；當(dāng)NaCl溶液的物質(zhì)的量濃度繼續(xù)增加時(shí)，DNA的溶解度又逐漸增大。 (2)方案一是通過(guò)控制NaCl溶液的濃度去除雜質(zhì)；方案二是利用嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能夠分解蛋白質(zhì)，而對(duì)DNA沒(méi)有影響，從而將DNA和蛋白質(zhì)分開(kāi)；方案三是利用DNA和蛋白質(zhì)對(duì)高溫耐受性的不同，從而使兩者分離。 (3)DNA在沸水浴條件下與二苯胺反應(yīng)呈藍(lán)色；甲基

13、綠可將DNA染成綠色。 14．下圖表示以雞血為實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行DNA的粗提取與鑒定的操作程序，請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題： (1)步驟一中，向雞血細(xì)胞液中加入________并攪拌，可使雞血細(xì)胞破裂。 (2)步驟二中，過(guò)濾后收集含有DNA的________。 (3)步驟三、四的操作原理是________________________________________； 步驟四中，通過(guò)向溶液中加入________調(diào)節(jié)NaCl溶液的物質(zhì)的量濃度至________mol/L時(shí)，DNA將會(huì)析出，過(guò)濾去除溶液中的雜質(zhì)。 (4)步驟七：向步驟六過(guò)濾后的________中加入等體積的冷卻的_______

14、_，靜置2～3 min，溶液中會(huì)出現(xiàn)________色絲狀物，這就是粗提取的DNA。 (5)步驟七：DNA遇________試劑，沸水浴5 min，冷卻后，溶液呈________色。 答案　(1)蒸餾水 (2)濾液 (3)DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同，通過(guò)控制NaCl溶液的濃度去除雜質(zhì)　蒸餾水　0.14 (4)濾液　酒精　白 (5)二苯胺　藍(lán) 解析　破碎紅細(xì)胞應(yīng)該用蒸餾水，使之吸水漲破。DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，在2 mol/L的NaCl溶液中DNA溶解，在0.14 mol/L的NaCl溶液中DNA析出。可通過(guò)加入蒸餾水將2 mol/L的NaCl溶液

15、稀釋為0.14 mol/L的NaCl溶液。DNA不溶于冷酒精溶液，在沸水浴的條件下，DNA與二苯胺反應(yīng)呈現(xiàn)藍(lán)色。 1．下列有關(guān)DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是(　) A．取材：雞血細(xì)胞；原因：有細(xì)胞核，其他動(dòng)物的血細(xì)胞都沒(méi)有細(xì)胞核 B．粗提?。翰煌瑵舛鹊腘aCl溶液；原因：DNA在其中的溶解度不同 C．提純：95%的冷酒精；原因：DNA溶于酒精，蛋白質(zhì)等雜質(zhì)不溶于酒精 D．鑒定：二苯胺試劑；原因：DNA溶液加入二苯胺試劑即呈藍(lán)色 答案　B 解析　除了哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞，其他動(dòng)物紅細(xì)胞都有細(xì)胞核，A錯(cuò)誤；DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同，根據(jù)此原理可以

16、對(duì)DNA進(jìn)行粗提取，B正確；DNA不溶于酒精，而蛋白質(zhì)等雜質(zhì)溶于酒精，進(jìn)而提純DNA，C錯(cuò)誤；DNA溶液加入二苯胺試劑后沸水浴加熱呈藍(lán)色，D錯(cuò)誤。 2．向溶有DNA的2 mol/L的NaCl溶液中不斷加入蒸餾水，在這個(gè)過(guò)程中DNA和雜質(zhì)蛋白質(zhì)的溶解度變化情況分別是(　) A．減小、減小　 B．增大、增大 C．先減小后增大、增大　 D．減小、增大 答案　C 解析　由于DNA在0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最小，故向溶有DNA的物質(zhì)的量濃度為2 mol/L的NaCl溶液中不斷加入蒸餾水，在這個(gè)過(guò)程中DNA的溶解度先減小，0.14 mol/L時(shí)溶解度最小，然后增大；而蛋白質(zhì)在高

17、濃度的鹽溶液中會(huì)出現(xiàn)鹽析，隨濃度降低溶解度逐漸增大。 3．下列關(guān)于DNA對(duì)高溫的耐受性的說(shuō)法，不正確的是(　) A．DNA對(duì)高溫的耐受性一般要比蛋白質(zhì)強(qiáng) B．超過(guò)80 ℃后DNA將變性，即使恢復(fù)到常溫，生物活性也不能恢復(fù) C．不同生物的DNA的變性溫度不一定相同 D．深海熱泉附近生活的生物的DNA對(duì)高溫的耐受性更強(qiáng)，其DNA中鳥嘌呤所占的比例更高 答案　B 解析　DNA超過(guò)80 ℃變性，恢復(fù)到常溫，生物活性將恢復(fù)。 4．某同學(xué)用洋蔥進(jìn)行DNA粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn)，操作錯(cuò)誤的是(　) A．加入洗滌劑后用力進(jìn)行快速、充分地研磨 B．用蛋白酶純化過(guò)濾后的研磨液中的DNA C．加入

18、酒精后用玻璃棒輕緩攪拌 D．加二苯胺試劑搖勻后沸水浴加熱 答案　A 解析　加入洗滌劑后研磨動(dòng)作要輕緩、柔和，否則會(huì)產(chǎn)生許多泡沫，不利于后續(xù)步驟的操作，A錯(cuò)誤；蛋白酶能夠分解蛋白質(zhì)，因此能起到純化DNA的目的，B正確；加入酒精后用玻璃棒攪拌時(shí)，動(dòng)作要輕緩，以免加劇DNA分子的斷裂，導(dǎo)致DNA分子不能形成絮狀沉淀，C正確；沸水浴條件下，DNA遇到二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色，用作DNA的鑒定，D正確。 5．在“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，對(duì)DNA提取量影響較小的是(　) A．使雞血細(xì)胞在蒸餾水中充分破裂，放出DNA等核物質(zhì) B．?dāng)嚢钑r(shí)要用玻璃棒沿一個(gè)方向輕緩攪動(dòng) C．在析出DNA黏稠物時(shí)

19、，要緩緩加入蒸餾水，直至黏稠物不再增多 D．要用冷酒精沉淀DNA，甚至可將混合液再放入冰箱中冷卻 答案　B 解析　在DNA從細(xì)胞中釋放的操作中，首先加蒸餾水使雞血細(xì)胞吸水漲破，然后用玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌，目的是加速細(xì)胞的破裂，這有利于DNA等核物質(zhì)的充分釋放，A不符合題意；攪拌時(shí)要用玻璃棒沿一個(gè)方向輕緩攪拌的目的是防止將絲狀的DNA攪碎，利于DNA絮狀物的挑出，但不影響DNA的提取量，B符合題意；在析出DNA黏稠物時(shí)，要緩緩加入蒸餾水，且到黏稠物不再增加，如果加蒸餾水過(guò)快，會(huì)導(dǎo)致DNA的再溶解，從而影響DNA的提取量，C不符合題意；預(yù)冷的酒精具有以下優(yōu)點(diǎn)：一是抑制核酸水解酶活性，防止DN

20、A降解；二是降低分子運(yùn)動(dòng)，易于形成沉淀析出；三是低溫有利于增加DNA分子柔韌性，減少斷裂，因此用冷酒精沉淀DNA甚至將混合液放入冰箱冷卻可以增加DNA的提取量，D不符合題意。 6．在DNA的粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn)中有三次過(guò)濾： ①過(guò)濾用蒸餾水稀釋過(guò)的雞血細(xì)胞液； ②過(guò)濾含黏稠物的物質(zhì)的量濃度為0.14 mol/L的NaCl溶液； ③過(guò)濾溶解有DNA的物質(zhì)的量濃度為2 mol/L的NaCl溶液。 以上三次過(guò)濾分別是為了獲得(　) A．含核物質(zhì)的濾液、紗布上的黏稠物、含DNA的濾液 B．含核物質(zhì)的濾液、濾液中的DNA、含DNA的濾液 C．含核物質(zhì)的濾液、濾液中的DNA、紗布上的黏稠物

21、D．含較純DNA的濾液、紗布上的黏稠物、含DNA的濾液 答案　A 解析　過(guò)濾用蒸餾水稀釋過(guò)的雞血細(xì)胞液應(yīng)取濾液(其內(nèi)含有DNA，但DNA純度不高)；過(guò)濾含黏稠物的物質(zhì)的量濃度為0.14 mol/L的NaCl溶液應(yīng)取紗布上的黏稠物(其內(nèi)含析出的DNA)；DNA易溶于物質(zhì)的量濃度為2 mol/L的NaCl溶液，故過(guò)濾該溶液時(shí)應(yīng)取其濾液(其內(nèi)含有DNA)。 7．在“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)DNA提取量不足。下列有關(guān)原因分析不正確的是(　) A．經(jīng)蒸餾水處理的雞血細(xì)胞用玻璃棒攪拌的時(shí)間過(guò)短 B．溶解DNA時(shí)所調(diào)制的NaCl溶液濃度未達(dá)到2 mol/L C．DNA再溶解時(shí)，玻璃棒攪

22、拌方向是單向的 D．向2 mol/L的NaCl溶液中加入的蒸餾水太少 答案　C 解析　經(jīng)蒸餾水處理的雞血細(xì)胞用玻璃棒攪拌的時(shí)間過(guò)短，部分細(xì)胞還未破裂，這會(huì)造成DNA的提取量不足，A正確；NaCl溶液濃度在0.14～2 mol/L時(shí)，隨著NaCl溶液濃度的升高，DNA的溶解度增大，因此溶解DNA時(shí)所調(diào)制的NaCl溶液濃度未達(dá)到2 mol/L時(shí)，部分DNA還沒(méi)有溶解，這會(huì)造成DNA的提取量不足，B正確；DNA再溶解時(shí)，玻璃棒應(yīng)該沿著一個(gè)方向緩慢攪拌，是為了防止DNA分子的斷裂，而這不會(huì)造成DNA提取量不足，C錯(cuò)誤；向2 mol/L的NaCl溶液中加入蒸餾水的目的是稀釋溶液，使DNA析出，若加

23、入蒸餾水的量太少，稀釋度不夠，這會(huì)造成DNA的提取量不足，D正確。 8．甲、乙兩圖為“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中涉及的兩個(gè)操作裝置圖。相關(guān)敘述正確的是(　) A．圖甲的燒杯和圖乙的試管中所用溶劑都為NaCl溶液，但兩者濃度不同 B．圖乙試管經(jīng)稍稍加熱后即可觀察到一支試管中的溶液明顯變藍(lán)，另一支試管中的溶液不變藍(lán) C．圖甲操作需用玻璃棒迅速攪拌以使DNA析出，并纏繞在玻璃棒上 D．圖乙操作中所用的二苯胺試劑需現(xiàn)配現(xiàn)用以達(dá)到較好的鑒定效果 答案　D 解析　圖甲燒杯中為酒精溶液，圖乙試管中為NaCl溶液，A錯(cuò)誤；圖乙試管需要在沸水浴中加熱5 min，B錯(cuò)誤；圖甲用玻璃棒沿一個(gè)方向

24、輕輕攪拌，卷起絲狀物，C錯(cuò)誤；圖乙操作中所用的二苯胺試劑最好現(xiàn)配現(xiàn)用，否則二苯胺會(huì)變成淺藍(lán)色，D正確。 9．如圖為“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的一些重要操作示意圖，請(qǐng)分析回答有關(guān)問(wèn)題： (1)正確的操作順序是______________(用字母和箭頭表示)。 (2)圖中C、E步驟都加入了蒸餾水，但其目的不同，分別是__________________和____________________。 (3)圖中A步驟中所用酒精必須是經(jīng)過(guò)________的才能使用，該步驟的目的是____________________________。 (4)為鑒定圖中A步驟中所得到的絲狀物的主要

25、成分為DNA，可將其溶解后，滴加________試劑后沸水浴，如果出現(xiàn)________，則證明該絲狀物的主要成分為DNA。 (5)由于雞血較難找到，某學(xué)生試圖用牛血代替，結(jié)果沒(méi)有成功，其原因最可能是______________________。 答案　(1)C→B→E→D→A　(2)使雞血細(xì)胞吸水漲破，釋放出細(xì)胞核物質(zhì)　降低NaCl溶液的濃度，使DNA析出　(3)充分預(yù)冷　提取含雜質(zhì)較少(或較純凈)的DNA (4)二苯胺　藍(lán)色　(5)牛成熟的紅細(xì)胞沒(méi)有細(xì)胞核和各種細(xì)胞器 解析　(1)DNA的粗提取與鑒定步驟是加入蒸餾水，破碎細(xì)胞→過(guò)濾，獲取含DNA的濾液→去除濾液中的雜質(zhì)→DNA的析出

26、與鑒定。由此可知，正確的操作順序是C→B→E→D→A。 (2)C步驟加入蒸餾水的目的是使雞血細(xì)胞吸水漲破，釋放出細(xì)胞核物質(zhì)；E步驟加入蒸餾水的目的是降低NaCl溶液的濃度，使DNA析出。 (3)圖中A步驟中所用酒精必須經(jīng)過(guò)充分冷卻才能使用，該步驟的目的是獲取含雜質(zhì)較少(或較純凈)的DNA。 (4)鑒定圖中A步驟中所得到的絲狀物的主要成分，可將其溶解后，滴加二苯胺試劑，并進(jìn)行沸水浴加熱，如果出現(xiàn)藍(lán)色，則該絲狀物的主要成分為DNA。 (5)牛是哺乳動(dòng)物，哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞沒(méi)有細(xì)胞核和各種細(xì)胞器，因此用牛血代替雞血來(lái)進(jìn)行該實(shí)驗(yàn)不會(huì)取得成功。 10．某生物興趣小組開(kāi)展DNA粗提取的相關(guān)探究

27、活動(dòng)，具體步驟如下。 材料處理：稱取新鮮的花菜、辣椒和蒜黃各2份，每份10 g。剪碎后分成兩組，并分別置于20 ℃和－20 ℃條件下保存24 h。 DNA的粗提?。? 第一步：將上述材料分別放入研缽中，各加入15 mL研磨液，充分研磨。用兩層紗布過(guò)濾，取濾液備用。 第二步：先向6只小燒杯中分別注入10 mL濾液，再加入20 mL體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精，然后用玻璃棒緩緩地向一個(gè)方向攪拌，使絮狀物纏繞在玻璃棒上。 第三步：取6支試管，分別加入等量的物質(zhì)的量濃度為2 mol/L的NaCl溶液溶解上述絮狀物。 DNA的檢測(cè)：在上述試管中各加入4 mL二苯胺試劑，混合均勻后，置于沸水中加熱5

28、 min，待試管冷卻后比較溶液的顏色深淺，結(jié)果如表所示。 材料保存溫度 花菜 辣椒 蒜黃 20 ℃ ＋＋ ＋ ＋＋＋ －20 ℃ ＋＋＋ ＋＋ ＋＋＋＋ 注：“＋”越多表示藍(lán)色越深。 分析上述實(shí)驗(yàn)過(guò)程，回答下列問(wèn)題。 (1)該探究性實(shí)驗(yàn)的課題名稱是______________________________。 (2)第二步中“緩緩地”攪拌，這是為了減少________。 (3)根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，得出結(jié)論并分析。 ①結(jié)論1：與20 ℃相比，相同實(shí)驗(yàn)材料在－20 ℃條件下保存，DNA的提取量較多。 結(jié)論2：_____________________________

29、_________________。 ②針對(duì)結(jié)論1，請(qǐng)給出合理的解釋：_______________________________。 (4)氯仿密度大于水，能使蛋白質(zhì)變性沉淀，與水和DNA均不相溶，且對(duì)DNA影響極小。為了進(jìn)一步提高DNA純度，依據(jù)氯仿的特性，在DNA粗提取第三步的基礎(chǔ)上繼續(xù)操作的步驟是__________________________________，然后用體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精使DNA析出。 答案　(1)探究不同材料和不同保存溫度對(duì)DNA提取量的影響　(2)DNA分子的斷裂　(3)①等質(zhì)量的不同實(shí)驗(yàn)材料，在相同的保存溫度下，從蒜黃中提取的DNA量最多?、诘蜏匾种?/p>

30、了相關(guān)酶的活性，DNA降解速度慢　(4)將第三步獲得的溶液與等量的氯仿充分混合，靜置一段時(shí)間，吸取上清液 解析　(1)從表格可以看出，該實(shí)驗(yàn)有兩個(gè)自變量：材料和溫度，所以該探究性實(shí)驗(yàn)的課題名稱為“探究不同材料和不同保存溫度對(duì)DNA提取量的影響”。 (2)第二步中用玻璃棒攪拌的目的是獲取DNA絮狀物，所以若攪拌速度快，易造成DNA分子的斷裂。 (3)本實(shí)驗(yàn)的結(jié)論可從兩個(gè)方面來(lái)考慮：①相同材料在不同保存溫度下的結(jié)論；②不同材料在相同保存溫度下的結(jié)論。 (4)氯仿能使蛋白質(zhì)變性，而對(duì)DNA影響極小，所以可將第三步獲得的溶液與氯仿混合，又因氯仿密度大于水，所以蛋白質(zhì)沉淀位于溶液下部，DNA位于

31、上清液中。 11．真核生物細(xì)胞內(nèi)，大量DNA和蛋白質(zhì)以及一些RNA等混雜在一起，難以分離。生物興趣小組的同學(xué)為了獲得純度相對(duì)較高的DNA展開(kāi)了實(shí)驗(yàn)探究。 (1)分離各種物質(zhì)的基本思路是根據(jù)DNA和其他物質(zhì)理化性質(zhì)的不同而采取一定的方法，以下是從各種物質(zhì)之間________的差異角度開(kāi)展研究： ①取雞血細(xì)胞懸液10 mL，加蒸餾水20 mL，同時(shí)用玻璃棒________(填“輕輕攪拌”或“快速攪拌”)，過(guò)濾，取濾液，轉(zhuǎn)移到塑料材質(zhì)的大燒杯中。 ②沿大燒杯內(nèi)壁持續(xù)、緩慢地加入飽和硫酸銨溶液，用玻璃棒沿一個(gè)方向________(填“輕輕攪拌”或“快速攪拌”)，同時(shí)不斷收集析出的物質(zhì)。下圖是根

32、據(jù)雞血中幾種物質(zhì)的析出情況繪制的曲線，請(qǐng)據(jù)圖分析： ③如果只收集纖維蛋白，可采取的措施是_____________________________。 ④先用飽和度40%的硫酸銨溶液析出絕大部分纖維蛋白和大部分球蛋白，再在飽和度約為_(kāi)_______的硫酸銨溶液中析出DNA(既保證DNA提取量較大又避免其他雜質(zhì)過(guò)多)，與此同時(shí)析出的物質(zhì)還有________。 (2)如果要進(jìn)一步去掉其他雜質(zhì)，盡可能提高獲得的DNA純度，可采取的兩種辦法有：將DNA與球蛋白的混合物加入到________中，收集再次析出物；用________處理溶有DNA與蛋白質(zhì)的溶液。 答案　(1)溶解度　①快速攪拌?、?/p>

33、輕輕攪拌?、墼诹蛩徜@濃度達(dá)到30%之前收集析出物?、?0%　球蛋白 (2)冷卻酒精　嫩肉粉 解析　(1)分析曲線圖可知，不同物質(zhì)在不同濃度的硫酸銨中的析出的相對(duì)量有所差別，即分離各種物質(zhì)的基本思路是根據(jù)DNA和其他物質(zhì)之間溶解度的差異開(kāi)展研究： ①取雞血細(xì)胞懸液10 mL，加蒸餾水20 mL，此時(shí)可以用玻璃棒快速攪拌，以加速血細(xì)胞的破裂。 ②沿大燒杯內(nèi)壁持續(xù)、緩慢地加入飽和硫酸銨溶液，為了防止將DNA的絮狀物攪碎，此時(shí)應(yīng)用玻璃棒沿一個(gè)方向輕輕攪拌，同時(shí)不斷收集析出的物質(zhì)。 ③從圖中看出，纖維蛋白在硫酸銨濃度在20%之前已經(jīng)開(kāi)始析出，說(shuō)明溶解度開(kāi)始減小；在濃度為30%時(shí)析出最快，說(shuō)明此時(shí)的溶解度最低，并且超過(guò)30%后球蛋白也將逐漸析出，因此如果只收集纖維蛋白，可以在硫酸銨濃度達(dá)到30%之前收集析出物。 ④從圖中看出，DNA在飽和度約為50%的硫酸銨溶液中溶解度最小，與此同時(shí)析出的物質(zhì)還有球蛋白，只是球蛋白析出量較少。 (2)如果要進(jìn)一步去掉其他雜質(zhì)，盡可能提高獲得的DNA純度，可將DNA與球蛋白的混合物加入到冷卻酒精中，由于DNA不溶于酒精，而其他雜質(zhì)可溶于酒精，因此收集再次析出物；酶具有專一性，可以用嫩肉粉(含木瓜蛋白酶)處理溶有DNA與蛋白質(zhì)的溶液，此時(shí)蛋白質(zhì)可以水解，因此可以分離DNA和蛋白質(zhì)。