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1、.
過氧化氫酶 (CAT)試劑盒說明書
一、測定原理：
過氧化氫酶 (CAT) 分解 H2O2 的反應可通過加入鉬酸銨而迅速中止，剩余的作用產生一種淡黃色的絡合物，在 405nm 處測定其變化量，可計算出
CAT
H2O2 與鉬酸銨的活力。試劑一
(ml)
二、試劑組成與配制：
試劑一：液體 100 ml 1 瓶， 4℃保存 6 個月。
試劑二：底物液體
10 ml 1 瓶， 4℃保存
6 個月。
試劑三：顯色粉劑 1 瓶，
2、4℃保存 6 個月。加雙蒸水至
100 ml 溶解， 4℃保存
1 個月。（如
果底部有不溶粉末沉淀，直接取上清使用，不影響測定結果）
試劑四：液體
10 ml 1 瓶， 4℃保存
6 個月。天冷時會凝固，臨用前
37℃水浴至透明方可使
用。
三、組織樣本的檢測
1、組織勻漿液的制備：準確稱取組織重量，按重量 (g)：體積 (ml)=1 ：9 的比例加入 9 倍體
積的生理鹽水， 冰水浴條件下， 制備成 10%的組織勻漿， 2500 轉 /分離心 10 分鐘，取上清，
3、
再用生理鹽水稀釋成最佳取樣濃度，待測 (最佳取樣濃度摸索減附錄 )。
2、操作表：
對照管
測定管
組織勻漿 (ml)
0.05
試劑一 (37℃預溫 )(ml)
1.0
1.0
試劑二 (37℃預溫 )(ml)
0.1
0.1
混勻， 37℃準確反映
1 分鐘（ 60 秒）
試劑三 (ml)
1.0
1.0
試劑四 (ml)
0.1
0.1
組織勻漿 (ml)
0.05
混勻，波長 405nm ，光徑 0.5cm，雙蒸水調零，測定各管吸光度值。
注：一般樣本沒有高脂等導致顯著差異情況，對照管
4、的樣本更換成雙蒸水，做
1-2 管對照即
1 / 2
.
可。如需做樣本自身對照，則試劑盒所測定樣本數量減至
48 樣。
3.組織中 CAT 活力的計算：
（1）定義：每毫克組織蛋白每秒種分解 1umol 的 H2O2 的量為一個活力單位。
（2）計算公式：
組織勻漿中
CAT 活力 (U / mgprot ) (對照 OD 值 - 測定 OD值 ) 271* 1 待測樣本蛋白濃度 (mgprot / ml)
60 取樣量
注： *271 為斜率的倒數
（3）計算舉例：
5、
取 10%水稻葉片勻漿 0.05ml 做 CAT 檢測，測得對照管吸光度為 0.605，測定管吸光度為
0.332，
同時測得 10%水稻葉片勻漿蛋白濃度為 3.1303 mgprot/ml 。則計算結果為：
組織勻漿中 CAT 活力 ( U/mgprot ) 0.704 0.332 271
1
60
3.1303 10.7351U /mgprot
0.05
注： 1.測定血清和血漿時，如果樣本不溶血，每批樣本只需要隨機挑
2 個樣本做對照或者用
雙蒸水代替額樣本做對照；如果樣本溶血的話，必須每個樣本都要做對照。
2.測定組織勻漿時，如果樣本不是高脂，每批樣本只需要隨機挑
2
個樣本做對照或者用雙蒸
水代替額樣本做對照；如果樣本高脂，必須每個樣本都要做對照。
3.測定全血時，必需每個樣本都要做對照。
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過氧化氫酶(CAT)試劑盒說明書
