2019-2020學(xué)年高中生物 第一部分 微生物的利用 實(shí)驗(yàn)1 大腸桿菌的培養(yǎng)和分離知能演練輕巧奪冠 浙科版選修1

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1、實(shí)驗(yàn)1 大腸桿菌的培養(yǎng)和分離 一、選擇題 有關(guān)大腸桿菌營養(yǎng)物質(zhì)的敘述中，正確的是(　　) A．是碳源的物質(zhì)也可能同時(shí)是氮源 B．凡碳源都提供能量 C．除水以外的無機(jī)物只提供無機(jī)鹽 D．無機(jī)氮源也能提供能量 解析：選A。是碳源的物質(zhì)也可能同時(shí)是氮源，如碳酸氫銨、氨基酸等，既能為微生物提供碳源，同時(shí)也能提供氮源；凡碳源未必能為大腸桿菌提供能量，如無機(jī)的碳源；除水以外的無機(jī)物可能同時(shí)具有提供無機(jī)鹽、碳源和氮源等多重作用；無機(jī)氮源對(duì)硝化細(xì)菌可以提供能量，但是對(duì)大腸桿菌不能提供能量。 在光照下，將等細(xì)胞數(shù)量的衣藻和大腸桿菌分別接種到只含無機(jī)鹽的培養(yǎng)液中培養(yǎng)，結(jié)果是(虛線和實(shí)線分別表示

2、大腸桿菌和衣藻的生長曲線)(　　) 解析：選C。衣藻是低等植物，能利用無機(jī)鹽進(jìn)行光合作用自己合成有機(jī)物。大腸桿菌是異養(yǎng)生物，不能自己制造有機(jī)物只能攝取現(xiàn)成有機(jī)物，在只含無機(jī)鹽的培養(yǎng)基上幾乎不能生長。 培養(yǎng)基配制需要運(yùn)用滅菌和消毒技術(shù)，但兩者消滅的微生物種類和數(shù)量是不同的，下列哪一項(xiàng)能正確表示消毒結(jié)果和滅菌結(jié)果之間的關(guān)系(　　) 解析：選B。消毒的目的是殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)，滅菌則是殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括孢子和芽孢。所以，一般來說，滅菌的結(jié)果應(yīng)包含消毒的結(jié)果，故選B。 下列所述環(huán)境條件下的微生物，能正常生長繁殖的是(　　) A．在缺乏生長素

3、的無氮培養(yǎng)基中的圓褐固氮菌 B．在人體表皮擦傷部位的破傷風(fēng)桿菌 C．在新配制的植物礦質(zhì)營養(yǎng)液中的酵母菌 D．在滅菌后的動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中的禽流感病毒 解析：選A。圓褐固氮菌是自生固氮菌，能合成生長素滿足自身生長。破傷風(fēng)桿菌是嚴(yán)格厭氧生活的細(xì)菌，在表皮不能生長。在新配制的植物礦質(zhì)營養(yǎng)液中由于缺乏有機(jī)物，因此不能培養(yǎng)酵母菌。禽流感病毒營嚴(yán)格的胞內(nèi)寄生生活，在滅菌后的動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中不能培養(yǎng)禽流感病毒，通常在活的雞胚細(xì)胞中進(jìn)行培養(yǎng)。 有關(guān)涂布分離法的敘述，錯(cuò)誤的是(　　) A．首先將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋 B．然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面 C．其核心是防止雜菌

4、污染，保證培養(yǎng)液的純度 D．結(jié)果都是在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落 解析：選D。涂布分離法是將菌液進(jìn)行一系列梯度稀釋，然后將不同稀釋倍數(shù)的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。在稀釋倍數(shù)足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)菌，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落。 下列關(guān)于微生物的培養(yǎng)和運(yùn)用的敘述，錯(cuò)誤的是(　　) A．通過消毒不能殺死物體內(nèi)所有的微生物 B．利用劃線分離法可以統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目 C．劃線分離法和涂布分離法常用于微生物的接種 D．微生物所用的培養(yǎng)基成分和植物組織培養(yǎng)用的培養(yǎng)基成分不同 解析：選B。消毒是指殺死病原微生物，但不一定能殺死細(xì)菌芽孢的方

5、法。統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目要用涂布分離法，劃線分離法辦不到。不同的培養(yǎng)對(duì)象，所需的營養(yǎng)成分不同，培養(yǎng)基中加入的物質(zhì)也就不同。微生物接種最常見的方法是劃線分離法和涂布分離法。 下圖是利用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基培養(yǎng)和純化X細(xì)菌的部分操作步驟。有關(guān)敘述正確的是(　　) A．步驟①中，倒好平板后應(yīng)立即將其倒置，防止水蒸氣落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)物 B．步驟②接種環(huán)和試管口應(yīng)先在火焰上灼燒，接種環(huán)冷卻后再放入試管中蘸取菌液 C．步驟③沿多個(gè)方向劃線，使接種物逐漸稀釋，培養(yǎng)后可根據(jù)出現(xiàn)的單個(gè)菌落計(jì)數(shù) D．步驟④是將培養(yǎng)皿放在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，一段時(shí)間后所得到的都是X細(xì)菌的菌落 答案：B 能排除

6、培養(yǎng)基是否有雜菌污染的方法是(　　) A．將未接種的培養(yǎng)基放在實(shí)驗(yàn)桌上培養(yǎng) B．將未接種的培養(yǎng)基放在窗臺(tái)上培養(yǎng) C．將未接種的培養(yǎng)基放在恒溫箱中培養(yǎng) D．將已接種的培養(yǎng)基放在恒溫箱中培養(yǎng) 解析：選C。排除雜菌污染的常用手段是將未接種的培養(yǎng)基放在恒溫箱中培養(yǎng)。 下列有關(guān)微生物的培養(yǎng)或純化的敘述，錯(cuò)誤的是(　　) A．微生物在培養(yǎng)前要先對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌處理再接種 B．培養(yǎng)液中溶氧量的變化會(huì)影響酵母菌的繁殖和代謝途徑 C．大腸桿菌的純化培養(yǎng)包括培養(yǎng)基的配制和純化大腸桿菌兩個(gè)階段 D．分離自養(yǎng)型微生物的方法是用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基 解析：選D。微生物在培養(yǎng)前要先對(duì)培養(yǎng)

7、基進(jìn)行滅菌處理，常用高壓蒸汽滅菌法滅菌，注意要冷卻后再接種。分離自養(yǎng)型微生物時(shí)，培養(yǎng)基中不用加碳源，利用空氣中的CO2即可。 下列操作中，需用到接種環(huán)的是(　　) A．平板劃線操作　　 B．梯度稀釋操作 C．涂布平板操作 D．倒平板操作 解析：選A。平板劃線操作需用到接種環(huán)。 在涂布平板操作時(shí)錯(cuò)誤的是(　　) A．將涂布器在酒精燈火焰上灼燒，直到燒紅 B．取少量菌液滴加在培養(yǎng)基表面 C．將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃待酒精燃盡后，冷卻8～10 s再用 D．涂布時(shí)可轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿，使涂布均勻 答案：A 酵母菌培養(yǎng)液常含有一定濃度的葡萄糖，但當(dāng)葡萄糖濃度過高時(shí)，反而抑制微生物

8、的生長，原因是(　　) A．碳源供應(yīng)太充足 B．葡萄糖不是酵母菌的原料 C．改變了酵母菌培養(yǎng)液的pH D．細(xì)胞會(huì)發(fā)生質(zhì)壁分離 解析：選D。當(dāng)培養(yǎng)基中葡萄糖的濃度升高時(shí)，會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)液的滲透壓升高，從而導(dǎo)致細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離。 用涂布分離法來統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目，其結(jié)果與實(shí)際值比(　　) A．比實(shí)際值要高 B．比實(shí)際值要低 C．和實(shí)際值一樣 D．比實(shí)際值可能高也可能低 解析：選B。涂布分離法統(tǒng)計(jì)活菌的數(shù)目時(shí)，由于在培養(yǎng)的過程中有細(xì)菌會(huì)死亡，還有很多細(xì)菌聚集在一起，導(dǎo)致其菌落也聚集在一起，統(tǒng)計(jì)時(shí)只能算一個(gè)，這樣都會(huì)造成統(tǒng)計(jì)的結(jié)果比實(shí)際的值要低。 將配制好的培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌應(yīng)用(　

9、　) A．灼燒滅菌 B．高壓蒸汽滅菌 C．干熱滅菌 D．煮沸滅菌 解析：選B。對(duì)配制好的培養(yǎng)基的滅菌一般采用高壓蒸汽滅菌。 某研究小組從有機(jī)廢水中分離微生物用于廢水處理。下列敘述正確的是(　　) A．培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進(jìn)行滅菌 B．轉(zhuǎn)換劃線角度后需灼燒接種環(huán)再進(jìn)行劃線 C．接種后的培養(yǎng)皿須放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng) D．培養(yǎng)過程中每隔一周觀察一次 解析：選B。培養(yǎng)基滅菌后再分裝到培養(yǎng)皿中；轉(zhuǎn)換劃線角度前要灼燒接種環(huán)，冷卻后再從上次劃線的末端開始進(jìn)行劃線；接種后的培養(yǎng)皿需放在恒溫箱中進(jìn)行培養(yǎng)，一般每隔12 h或24 h觀察一次。 有關(guān)平板劃線操作的敘述，不正確的是(　　) A．

10、第一次灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物 B．每次劃線前，灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種 C．在第二區(qū)域內(nèi)劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來源于菌液 D．劃線結(jié)束后，灼燒接種環(huán)，能及時(shí)殺死接種環(huán)上的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者 解析：選C。第一次灼燒接種環(huán)，這是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物對(duì)實(shí)驗(yàn)過程帶來污染。每次劃線前，灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，防止對(duì)接種過程帶來污染。在第二區(qū)域內(nèi)劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種來源于第一接種區(qū)。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能及時(shí)殺死接種環(huán)上的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者，使實(shí)驗(yàn)過程更

11、安全。 在培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基中加入某些物質(zhì)能分離出所需的微生物。下列選項(xiàng)中，前者是在培養(yǎng)基中加入的物質(zhì)，后者是能被分離出的微生物，其中正確的是(　　) A．氫氧化鈉，酵母菌 B．鹽酸，放線菌 C．適量的青霉素，霉菌 D．適量的伊紅—美藍(lán)，大腸桿菌 解析：選C。氫氧化鈉、鹽酸為強(qiáng)堿、強(qiáng)酸，酵母菌和放線菌都不能生存。加入伊紅—美藍(lán)的培養(yǎng)基是用來鑒定大腸桿菌，并不能分離大腸桿菌。適量的青霉素對(duì)原核生物有抑制作用，對(duì)真核生物的生命活動(dòng)并不影響。 下面對(duì)發(fā)酵過程中滅菌的理解不正確的是(　　) A．防止雜菌污染 B．接種前菌種要進(jìn)行滅菌 C．培養(yǎng)基和發(fā)酵設(shè)備都必須滅菌 D．滅菌必須在

12、接種前 解析：選B。在發(fā)酵過程中要嚴(yán)格防止雜菌污染，否則將會(huì)使培養(yǎng)的微生物不能正常的生長。接種前要對(duì)培養(yǎng)基、實(shí)驗(yàn)中需要用到的器皿和工具進(jìn)行滅菌處理，但是菌種不能進(jìn)行滅菌。 廣東省微生物菌種保藏中心有各種微生物超過上萬種，其中大部分是自己“養(yǎng)”出來的，少部分是引進(jìn)的，下列有關(guān)“養(yǎng)”細(xì)菌的敘述，正確的是(　　) A．題干中的“養(yǎng)”具有篩選、培養(yǎng)和保藏等含義 B．在培養(yǎng)基中加入青霉素可篩選出細(xì)菌 C．在固體培養(yǎng)基上長出的單個(gè)菌落含有多種細(xì)菌 D．各種細(xì)菌的保藏是在液態(tài)培養(yǎng)基中進(jìn)行的 答案：A 金黃色葡萄球菌有很強(qiáng)的致病力，常引起骨髓炎等，還可能引起食物中毒，下列實(shí)驗(yàn)結(jié)束后的做法錯(cuò)誤的

13、是(　　) A．對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒處理 B．帶菌培養(yǎng)基必須經(jīng)高壓蒸汽滅菌鍋滅菌后才能倒掉 C．帶菌培養(yǎng)基必須經(jīng)加熱后才能倒掉 D．接種后雙手必須用肥皂洗凈，再用75%的酒精棉球擦拭 解析：選C。金黃色葡萄球菌有很強(qiáng)的致病力，所以在操作時(shí)一定要做到安全防范，接種后雙手用肥皂洗凈，再用75%的酒精棉球擦拭，以起到殺菌的作用；對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒也可以殺滅細(xì)菌，防止污染環(huán)境；高壓蒸汽滅菌也可殺死培養(yǎng)基中的金黃色葡萄球菌；如果只對(duì)帶菌培養(yǎng)基進(jìn)行加熱，殺不盡其中的致病菌，因?yàn)榇司哪透邷啬芰軓?qiáng)，會(huì)污染環(huán)境。 二、非選擇題 根據(jù)所學(xué)知識(shí)回答問題： (1)在大腸桿菌培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，

14、還要考慮________、________和滲透壓等條件。由于該細(xì)菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易選擇、________、________等優(yōu)點(diǎn)，因此常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)材料。 (2)在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行________(填“消毒”或“滅菌”)；操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和________；靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能________。 (3)若用涂布分離法計(jì)數(shù)大腸桿菌活菌的個(gè)數(shù)，要想使所得估計(jì)值更接近實(shí)際值，除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測樣品稀釋的________。 (4)通常，對(duì)獲得的純菌種還

15、可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的________。 (5)培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是 ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (6)若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過________處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。 解析：(1)大腸桿菌具

16、有體積小、結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易選擇、易培養(yǎng)、生活周期短等優(yōu)點(diǎn)，培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮溫度、酸堿度和滲透壓等條件。 (2)滅菌是使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，所以對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌，消毒是使用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物，操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和消毒，紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能損傷DNA的結(jié)構(gòu)。 (3)涂布分離法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋倍數(shù)的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)，應(yīng)保證樣品稀釋的比例合適。 (4)對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的鑒定。 (5)培養(yǎng)大

17、腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。 (6)因?yàn)橛械拇竽c桿菌會(huì)釋放一種強(qiáng)烈的毒素，并可能導(dǎo)致腸管出現(xiàn)嚴(yán)重?fù)p傷，使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過滅菌處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。 答案：(1)溫度　酸堿度　易培養(yǎng)　生活周期短 (2)滅菌　消毒　損傷DNA的結(jié)構(gòu) (3)比例合適 (4)鑒定(或分類) (5)將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生 (6)滅菌 22．為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測定了該河流水樣中的細(xì)菌含量，并

18、進(jìn)行了細(xì)菌分離等工作。回答下列問題： (1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中的細(xì)菌含量。在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是_________________________ ________________________________________________________________________； 然后，將1 mL水樣稀釋100倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為________。 (2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)

19、菌，操作時(shí)，接種環(huán)通過________滅菌。在第二次及以后的劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端開始劃線。這樣做的目的是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (3)示意圖A和B中，________表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。 (4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng)，另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果

20、發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中________的含量，同時(shí)可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高_(dá)_______的利用率。 解析：(1)為了檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格，可在涂布接種前，隨機(jī)取滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時(shí)間。0.1 mL稀釋液中平均有(39＋38＋37)/3＝38個(gè)活菌，則每毫升稀釋液中活菌的數(shù)目為38/0.1＝380，則稀釋前每毫升水樣中活菌數(shù)目為380×100＝3.8×104，則每升水樣中活菌數(shù)目為3.8×104×1 000＝3.8×107。(2)接種環(huán)、接種針等金屬用具可直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，以達(dá)到迅速徹底滅菌的

21、目的。在第二次及以后的劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端開始劃線，其目的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落。(3)比較圖A和圖B可以看出：A培養(yǎng)基中細(xì)菌的分布呈線性，是用平板劃線法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果；B培養(yǎng)基中細(xì)菌均勻分布，是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。(4)振蕩培養(yǎng)可以提高培養(yǎng)液中溶解氧的含量，還可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高了營養(yǎng)物質(zhì)的利用率，因此振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長速度快。 答案：(1)檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格　3.8×107　(2)灼燒　將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落　(3)B　(4)溶解氧　營養(yǎng)物質(zhì) 炭疽病是由炭疽桿菌引起的一種人畜共患傳染病。

22、炭疽桿菌兩端截平、呈竹節(jié)狀排列，菌落呈卷發(fā)狀。對(duì)炭疽病疑似患者，可根據(jù)噬菌體的宿主專一性，通過實(shí)驗(yàn)確診。 (1)細(xì)菌培養(yǎng)：采集疑似患者的樣本，分離培養(yǎng)，獲得可疑菌落。 (2)細(xì)菌鑒定：實(shí)驗(yàn)流程如圖所示： ①對(duì)配制的液體培養(yǎng)基等需采取____________方法滅菌；實(shí)驗(yàn)所用液體培養(yǎng)基的碳源為________(填“無機(jī)碳”或“有機(jī)碳”)。 ②挑選可疑菌落制片后，用________觀察，可看到呈竹節(jié)狀排列的桿菌。 ③接種可疑菌后，35 ℃培養(yǎng)24小時(shí)，液體培養(yǎng)基變渾濁，原因是____________________。對(duì)照組試管中應(yīng)加入____________________，與實(shí)驗(yàn)組

23、同時(shí)培養(yǎng)6小時(shí)后，若實(shí)驗(yàn)組液體培養(yǎng)基的渾濁度比對(duì)照組________(填“高”或“低”)，則可明確疑似患者被炭疽桿菌感染，反之則排除。 解析：(2)①培養(yǎng)可疑炭疽桿菌之前應(yīng)先將液體培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。由于炭疽桿菌是異養(yǎng)生物，因此培養(yǎng)基中的碳源應(yīng)是有機(jī)碳。②觀察桿菌應(yīng)用顯微鏡。③接種可疑菌24小時(shí)后，液體培養(yǎng)基變渾濁的原因是細(xì)菌大量繁殖。 答案：(2)①高壓蒸汽　有機(jī)碳 ②顯微鏡 ③細(xì)菌大量繁殖　等量生理鹽水　低 蘋果干腐病是一種名為茶藤子葡萄座腔菌真菌引起的疾病，病菌通常由枝條傷口入侵感染，在傷口處形成潰瘍。某中學(xué)的科研小組計(jì)劃分離出該真菌，并進(jìn)行藥物防治實(shí)驗(yàn)，為蘋果干腐病的防治

24、提供合理的建議。經(jīng)過查閱資料，確定了分離時(shí)所用的PDA培養(yǎng)基配方，如下表所示： 物質(zhì) 馬鈴薯 葡萄糖 自來水 氯霉素 含量 200 g 20 g 1 000 mL 0.3 g 該真菌在上述PDA培養(yǎng)基上生長時(shí)有特定的形態(tài)特征：輻射狀白色匍匐菌絲，絨毛狀。 (1)要獲得菌落，則上表中還應(yīng)添加的成分是________________。 (2)培養(yǎng)基的制備步驟包括計(jì)算、稱量、溶化、________、倒平板。等平板冷卻凝固后，將平板________，以防止冷凝水污染培養(yǎng)基。 (3)用剪刀從染病枝條潰瘍處剪取1×1 cm2的患病組織，并用0.1%的升汞進(jìn)行消毒，置于培養(yǎng)基

25、中心，在合適條件下進(jìn)行培養(yǎng)，共培養(yǎng)五組。待菌落形態(tài)特征穩(wěn)定后，用________法將該致病菌分別轉(zhuǎn)移至含有等量0.5%苦水堿劑、40%福美砷、清水的上述PDA培養(yǎng)基中進(jìn)行抗藥性實(shí)驗(yàn)，并每隔24 h記錄一次最后劃線區(qū)域的菌落數(shù)目。 答案：(1)瓊脂(或凝固劑)　(2)滅菌　倒置放置 (3)平板劃線 某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染情況而進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察與計(jì)數(shù)。請(qǐng)回答與此實(shí)驗(yàn)相關(guān)的問題： (1)培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細(xì)菌培養(yǎng)提供了________和________。除此之外，培養(yǎng)基還必須含有的基本成分是________和________

26、。 (2)對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，應(yīng)該采用的方法是____________________。 (3)為了盡快觀察到細(xì)菌培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，應(yīng)將接種了湖水樣品的平板置于________中培養(yǎng)，要使該實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果可靠，還應(yīng)該同時(shí)在另一平板上接種________作為對(duì)照進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。 (4)培養(yǎng)20小時(shí)后，觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落，這說明湖水樣品中有________種細(xì)菌，一般說來，菌落種數(shù)越多，湖水遭受細(xì)菌污染的程度越________。 (5)如果提高培養(yǎng)基中NaCl的濃度，可以用于篩選耐________細(xì)菌，這種培養(yǎng)基被稱為________。 解析：(1)蛋白胨既可作為碳源又可作為氮源，淀

27、粉為碳源，除了碳源、氮源外，培養(yǎng)基還需含有的基本成分為水和無機(jī)鹽。 (2)在實(shí)驗(yàn)室中，采用高壓蒸汽滅菌法對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌。 (3)為了盡快觀察細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果，就要使細(xì)菌快速生長、繁殖，應(yīng)在適宜溫度下進(jìn)行培養(yǎng)；要使觀察結(jié)果可靠，必須設(shè)置一個(gè)對(duì)照實(shí)驗(yàn)，遵循單一變量原則，單一變量為有無接種細(xì)菌，可用無菌水作對(duì)照組。 (4)菌落是單個(gè)或少數(shù)細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上大量繁殖時(shí)，形成的一個(gè)肉眼可見的、具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的細(xì)胞群體，即種群，不同細(xì)菌的菌落特征不同。本題中有形態(tài)和顏色不同的菌落，說明湖水樣品中有多種細(xì)菌，且菌落越多，細(xì)菌數(shù)量就越多，說明湖水被細(xì)菌污染程度越高。 (5)耐鹽細(xì)菌具有很強(qiáng)的抗鹽性(如金黃色葡萄球菌)；而其他種類的細(xì)菌在高濃度的NaCl溶液中，會(huì)因菌體失水過多而死亡，因此，這種培養(yǎng)基可作為選擇培養(yǎng)基。 答案：(1)碳源、氮源　碳源　水　無機(jī)鹽 (2)高壓蒸汽滅菌 (3)恒溫培養(yǎng)箱　無菌水 (4)多　高 (5)鹽　選擇培養(yǎng)基 10