2014高三生物一輪復(fù)習(xí)指導(dǎo) 活頁作業(yè)35 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用（含解析）新人教版選修1

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1、 活頁作業(yè)(一)　微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 一、選擇題 因為當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，而樣品稀釋度無論多高都很難使其中的細(xì)菌都單個分布于培養(yǎng)基上，故計數(shù)結(jié)果比實際值低。 答案：B 2．用平板劃線法或稀釋涂布平板法純化大腸桿菌時(　　) ①可以用相同的培養(yǎng)基?、诙夹枰褂媒臃N針進(jìn)行接種　③都需要在火焰旁進(jìn)行接種?、芏伎梢杂脕碛嫈?shù)活菌 A．①②　　　　　　　　 B．③④ C．①③ D．②④ 解析：平板劃線法或稀釋涂布平板法都使用固體培養(yǎng)基，故①正確；平板劃線法采用接種針進(jìn)行操作，而稀釋涂布平板法采用涂布器進(jìn)行操作，故②錯誤；純化時，要進(jìn)行無菌操作，需要在

2、火焰旁接種，避免空氣中的微生物混入培養(yǎng)基，故③正確；平板劃線法一般用于分離而不是計數(shù)，故④錯誤。 答案：C 3．細(xì)菌培養(yǎng)過程中分別采用了高壓蒸汽滅菌、酒精消毒、火焰灼燒等幾種不同的處理，這些方法依次用于殺滅哪些部位的雜菌(　　) A．接種環(huán)、手、培養(yǎng)基 B．高壓鍋、手、接種環(huán) C．培養(yǎng)基、手、接種環(huán) D．接種環(huán)、手、高壓鍋 答案：C 4．通過實驗測定土壤中的細(xì)菌數(shù)量，下列與此操作有關(guān)的敘述中，不正確的是(　　) A．用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板 B．取104、105倍的土壤稀釋液0.1 mL，分別涂布于各組平板上 C．將培養(yǎng)皿倒置，37℃恒溫培

3、養(yǎng)24～48小時 D．選擇菌落數(shù)在300個以上的培養(yǎng)皿進(jìn)行計數(shù) 解析：檢測土壤中細(xì)菌總數(shù)，用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板，取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1 mL，分別涂布于各組平板上，將實驗組和對照組平板倒置，37℃恒溫培養(yǎng)24～48小時，在確定對照組無菌后，選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計數(shù)。 答案：D 5．(2013·赤峰質(zhì)檢)下表為某培養(yǎng)基的配方，有關(guān)敘述正確的是(　　) 成分 牛肉膏 葡萄糖 K2HPO4 伊紅 美藍(lán) 青霉素 瓊脂 蒸餾水 含量 10 g 10 g 2 g 0.4 g 0.06

4、5 g 1萬單位 適量 1 000 mL A.能在此培養(yǎng)基上生長的大腸桿菌，擬核上有抗青霉素的基因 B．此培養(yǎng)基是天然鑒別培養(yǎng)基 C．此培養(yǎng)基可以用來檢測自來水中細(xì)菌含量是否符合飲用水標(biāo)準(zhǔn) D．此培養(yǎng)基可以用于選育轉(zhuǎn)基因大腸桿菌菌種的基因工程的操作過程中 解析：此表表示鑒定大腸桿菌的合成培養(yǎng)基。抗性基因一般位于大腸桿菌的質(zhì)粒上，而不是擬核上；此培養(yǎng)基只能用來檢測自來水中大腸桿菌含量是否符合飲用水標(biāo)準(zhǔn)。 答案：D 6．下列有關(guān)剛果紅染色法的敘述，不正確的是(　　) A．剛果紅可以在細(xì)菌菌落形成前倒平板時加入 B．剛果紅可以在菌落形成后加入 C．剛果紅在菌落形成前倒平板時

5、加入，加入的剛果紅不需要滅菌 D．在菌落形成后加入剛果紅時，剛果紅不需要滅菌 答案：C 二、非選擇題 7．(2013·南昌模擬)尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，但若不經(jīng)細(xì)菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物種類和數(shù)量繁多，同學(xué)們試圖探究土壤中微生物對尿素是否有分解作用，設(shè)計了以下實驗，并成功篩選到能高效降解尿素的細(xì)菌(目的菌)。培養(yǎng)基成分如下表所示，實驗步驟如下圖所示。請分析回答問題。 KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4·7H2O 葡萄糖 尿素 瓊脂 1.4 g 2.1 g 0.2 g 10 g 1 g 15g 將上述物質(zhì)溶解后，用自來水定容

6、到1 000 mL (1)此培養(yǎng)基能否用于植物組織培養(yǎng)？________________________________________________________________________， 理由是_______________________________________________________________。 (2)培養(yǎng)基中加入尿素的目的是________，這種培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。 (3)“目的菌”生長所需的氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基中的________和________，實驗需要振蕩培養(yǎng)，原因是_______________________

7、______________________________。 (4)轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時，常采用________(方法)接種，獲得單菌落后繼續(xù)篩選。 (5)下列材料或用具中：①培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿；②玻棒、試管、錐形瓶和吸管；③實驗操作者的雙手。需要滅菌的是：________；需要消毒的是：________。(填序號) (6)在進(jìn)行分離分解尿素的細(xì)菌實驗時，A同學(xué)從培養(yǎng)基上篩選出大約150個菌落，而其他同學(xué)只選擇出大約50個菌落。A同學(xué)的實驗結(jié)果產(chǎn)生的原因可能有________(填序號)。 ①由于土樣不同?、谟捎谂囵B(yǎng)基污染?、塾捎诓僮魇д`?、軟]有設(shè)置對照 (7)在以尿素為唯一氮源的

8、培養(yǎng)基中加入________，細(xì)菌合成的________將尿素分解為氨，pH增高，使指示劑變紅色。 解析：(1)微生物與植物生長所需的營養(yǎng)不完全相同，培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基不能用于組織培養(yǎng)。 (2)培養(yǎng)基中加入尿素作唯一氮源，分解尿素的微生物可生長，這種培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。 (3)“目的菌”生長所需的氮源和碳源分別來自尿素和葡萄糖。實驗需要振蕩培養(yǎng)增加溶氧量。 (4)在固體培養(yǎng)基上接種用稀釋涂布平板法或平板劃線法。 (5)滅菌要徹底消滅微生物及其芽孢，如①和②。實驗操作者的雙手要消毒。 (6)A同學(xué)從培養(yǎng)基上篩選出的菌落數(shù)與其他組相比，原因可能是土樣不同，培養(yǎng)基污染，操作失誤等。與是

9、否設(shè)置對照無關(guān)。 (7)由于細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解為氨，pH增高，故在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑將變紅。 答案：(1)不能　缺少植物激素(或缺少植物需要的各種營養(yǎng))　(2)篩選目的菌　選擇 (3)尿素　葡萄糖　為目的菌提供氧氣 (4)稀釋涂布平板法(平板劃線法) (5)①②?、邸?6)①②③　(7)酚紅指示劑　脲酶 8．如圖為分離并統(tǒng)計分解纖維素的微生物的實驗流程，據(jù)此回答有關(guān)問題： →→→ (1)要從富含纖維素的環(huán)境中分離纖維素分解菌，從高溫?zé)崛袑ふ夷蜔峋?，這說明 _______________________________________________

10、_________________________。 (2)某同學(xué)根據(jù)需要，配制了纖維素分解菌的培養(yǎng)基如下，整個實驗過程嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作。 纖維素粉　NaNO3　Na2HPO4·7H2O　KH2PO4 　5 g　　　 1 g　　　　　 1.2 g　　　　 0.9 g MgSO4·7H2O　KCl　酵母膏、水解酪素 　 0.5 g　　　　0.5 g　　適量 如果將其中的纖維素粉換成____________________，菌落數(shù)____________________，即可說明選擇培養(yǎng)基的作用。 (3)接種微生物最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，本實驗宜采用________法，

11、原因是 ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 9．纖維素分解菌能夠產(chǎn)生纖維素酶分解纖維素?；卮鹣铝袉栴}： (1)在篩選纖維素分解菌的過程中，通常用________染色法，這種方法能夠通過顏色反應(yīng)直接對纖維素分解菌進(jìn)行篩選。甲同學(xué)在實驗時得到了如圖所示的結(jié)果，則纖維素分解菌位于(　　) A．③　　　　　　　 B．①②

12、 C．②③ D．①②③ (2)乙同學(xué)打算從牛胃中分離纖維素分解菌并計數(shù)，與分離醋酸菌相比，進(jìn)行培養(yǎng)時除了營養(yǎng)不同外，最主要的實驗條件差別是________________________________________，該同學(xué)采用活菌計數(shù)法統(tǒng)計的菌落數(shù)目往往比活菌的實際數(shù)目________。 (3)丙同學(xué)在提取和分離纖維素酶的過程中，為了抵制外界酸和堿對酶活性的影響，采取的措施是向提取液和分離液中添加________。若探究纖維素酶活性的最適溫度，如何設(shè)置對照？________________________________________________________________

13、________。 解析：(1)剛果紅與纖維素形成的紅色復(fù)合物在纖維素被分解后將不再形成，則在培養(yǎng)基上出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。 (2)牛胃是一個厭氧的環(huán)境，所以其中的纖維素分解菌與需氧的醋酸菌培養(yǎng)條件有所不同。因是活菌計數(shù)法，所以部分死亡菌無法計數(shù)。另外當(dāng)兩個或多個細(xì)菌連在一起時平板上只觀察到一個菌落，所以偏小。 (3)探究最適溫度可設(shè)置一系列的溫度梯度相互對照，其他無關(guān)變量要適宜。 答案：(1)剛果紅　A　(2)保證無氧環(huán)境　小(低) (3)緩沖溶液　不同的溫度梯度之間相互對照 10．氯苯化合物是重要的有機化工原料，因其不易降解，會污染環(huán)境。某研究小組依照下列實驗方案(

14、圖1)篩選出能高效降解氯苯的微生物SP1菌。培養(yǎng)基配方如表1。 2可知，SP1菌在__________培養(yǎng)條件下最早停止生長，其原因是________________________________________________________________________。 解析：配制固體培養(yǎng)基時應(yīng)在液體培養(yǎng)基的成分中再加入瓊脂作為凝固劑。在配制培養(yǎng)基時應(yīng)先調(diào)節(jié)pH，后進(jìn)行滅菌，防止滅菌后在調(diào)節(jié)pH的過程中污染培養(yǎng)基。據(jù)表可知，培養(yǎng)基Ⅰ為牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，包括碳源、氮源、水、無機鹽和生長因子，適用于多種微生物的培養(yǎng)。培養(yǎng)基Ⅱ不加牛肉膏和蛋白胨，以硝酸銨為氮源，可以選擇出以硝酸銨為氮源的微生物，是選擇培養(yǎng)基。在營養(yǎng)缺乏、環(huán)境惡劣時，微生物可以形成休眠體——芽孢，來度過不良環(huán)境。據(jù)圖2可知，SP1菌在20 mg/L氯苯培養(yǎng)條件下菌體數(shù)最早達(dá)到最大值，即最早停止生長，原因是在培養(yǎng)基Ⅲ中，氯苯是唯一碳源，由于20 mg/L氯苯培養(yǎng)條件氮源最少，因此也最早被耗盡，使SP1菌停止生長。 答案：(1)瓊脂　(2)先調(diào)pH，后滅菌　(3)通用　選擇　硝酸銨　(4)芽孢　(5)20 mg/L氯苯　碳源最早耗盡 6