高考生物熱點難點演練：專題 酶的應(yīng)用和生物技術(shù)在其他方面的應(yīng)用

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1、專題16 酶的應(yīng)用和生物技術(shù)在其他方面的應(yīng)用[ 1.酶的應(yīng)用： (1)酶在食品制造和洗滌等方面的應(yīng)用。 (2)制備和應(yīng)用固定化酶。 2.生物技術(shù)的應(yīng)用： (1)植物的組織培養(yǎng)。 (2)蛋白質(zhì)的提取和分離。 (3)PCR技術(shù)的基本操作和應(yīng)用。 一、植物組織培養(yǎng)技術(shù) 1．用流程圖的形式寫出植物組織培養(yǎng)的過程 離體的植物組織或細(xì)胞愈傷組織根、芽等(試管苗)完整植物體。 2．植物組織培養(yǎng)與花藥培養(yǎng)技術(shù)的比較 植物組織培養(yǎng) 花藥培養(yǎng)技術(shù) 理論依據(jù) 細(xì)胞的全能性 細(xì)胞的全能性 基本過程 脫分化―→再分化 脫分化―→再分化 外植體 細(xì)胞類型 體細(xì)胞 生殖

2、細(xì)胞 操作流程 制備MS固體培養(yǎng)基―→外植體消毒―→接種―→培養(yǎng)―→移栽―→栽培 選材―→消毒―→接種、培養(yǎng)―→篩選和誘導(dǎo)―→移栽―→栽培選育 培養(yǎng)結(jié)果 正常植株 單倍體植株 可育性 可育 高度不育，秋水仙素處理，染色體加倍后可育 二、酶的研究和應(yīng)用 1．探尋在酶的實驗探究中應(yīng)注意的問題 (1)實驗設(shè)計時要遵循單一變量和對照兩大原則，嚴(yán)格控制無關(guān)變量。 (2)探究不同溫度(或pH)對酶活性的影響時，溫度(或pH)作為自變量，通常通過設(shè)置合理的梯度來確 2．比較下表中直接使用酶、固定化酶和固定化細(xì)胞的差異 直接使用酶 固定化酶 固定化細(xì)胞 酶的種類

3、 一種或幾種 一種 一系列酶 常用載體 氧化鋁、高嶺土、硅膠、二氧化鈦、硅藻土等 明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉、醋酸纖維素、聚丙烯酰胺等 常用方法 包埋法、化學(xué)結(jié)合法、物理吸附法 包埋法 營養(yǎng)物質(zhì) 基礎(chǔ) 不需要 不需要 需要 化學(xué)反應(yīng) 一種或幾種 一種 一系列 底物 各種物質(zhì) 各種物質(zhì) 能進入載體的小分子物質(zhì) 優(yōu)點 效率高、耗能低、無污染 可回收，反復(fù)使用 成本低、易操作，可催化一系列化學(xué)反應(yīng) 缺點 環(huán)境因素影響大，酶難以回收利用 不利于催化一系列化學(xué)反應(yīng) 反應(yīng)物與細(xì)胞內(nèi)的酶不容易接觸，催化效率下降 3.固定化技術(shù)的比較 方法

4、 定義 適用范圍 模型 包埋法 將酶包裹在多孔的載體中。常見的載體有明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉、醋酸纖維素和聚丙烯酰胺等 多用于細(xì) 胞的固定 化學(xué) 結(jié)合法 將酶分子或細(xì)胞相互結(jié)合，或?qū)⑵浣Y(jié)合到載體上 多用于 酶的固定 物理 吸附法 將酶吸附到固體吸附劑的表面。固體吸附劑多為活性炭、多孔玻璃等 三、DNA和蛋白質(zhì)技術(shù) 1．DNA的粗提取和鑒定方法 (1)材料的選?。哼x用DNA含量相對較高的生物組織。 (2)破碎細(xì)胞 ①動物的紅細(xì)胞，吸水破裂。 ②植物細(xì)胞：加入洗滌劑、食鹽后研磨。 (3)除去雜質(zhì)的方法 方法一：利用DNA在不同濃度的NaCl溶

5、液中溶解度的不同，通過調(diào)節(jié)NaCl溶液的濃度除去溶于和不溶于NaCl溶液中的雜質(zhì)。 方法二：利用DNA對酶的耐受性，直接在濾液中加入嫩肉粉，反應(yīng)10～15 min，嫩肉粉中的木瓜蛋白3 min，溶液中會出現(xiàn)白色絲狀物，用玻璃棒沿一個方向攪拌，卷起絲狀物。 (5)DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會被染成藍色。 2．比較下表中細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制與PCR技術(shù)的不同 項目 DNA復(fù)制 PCR技術(shù) 場所 細(xì)胞內(nèi) 細(xì)胞外 能量 ATP提供能量 不需ATP提供能量 酶 解旋酶、DNA聚合酶 耐高溫的TaqDNA聚合酶 是否有轉(zhuǎn)錄 伴有轉(zhuǎn)錄，產(chǎn)生引物 無轉(zhuǎn)錄，需

6、加入兩種引物 引物 RNA DNA或RNA 溫度 體內(nèi)溫和條件 高溫 特點 邊解旋邊復(fù)制，半保留復(fù)制 體外迅速擴增 循環(huán)次數(shù) 受生物體自身控制 30多次 3.蛋白質(zhì)的提取和分離 步驟 操作 樣品處理 通過紅細(xì)胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、分離血紅蛋白溶液等操作收集到血紅蛋白溶液 粗分離 通過透析法去除血紅蛋白溶液中相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì) 純化 通過凝膠色譜法分離相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì) 純度鑒定 SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳判斷純化的蛋白質(zhì)是否達到要求 【特別提醒】(1)凝膠色譜柱的直徑大小不影響分離效果，但直徑過大造成洗脫液體積大，樣品稀釋度長狀態(tài)一致

7、、消毒后的莖尖外植體，在適宜條件下培養(yǎng)一段時間后，統(tǒng)計再生叢芽外植體的比率(m)，以及再生叢芽外植體上的叢芽平均數(shù)(n)，結(jié)果如下表。 培養(yǎng)基 編號 濃度/(mg·L－1) 6BA IAA m/% n/個 1 0.5 0 76.7 3.1 2 0.1 77.4 6.1 3 0.2 66.7 5.3 4 0.5 60.0 5.0 回答下列問題。 (1)按照植物的需求量，培養(yǎng)基中無機鹽的元素可分為__________和__________兩類。上述培養(yǎng)基中，6BA屬于________類生長調(diào)節(jié)劑。 (2)在該實驗中，自變量是____

8、____，因變量是________________，自變量的取值范圍是________。 (3)從實驗結(jié)果可知，誘導(dǎo)叢芽總數(shù)最少的培養(yǎng)基是________號培養(yǎng)基。 (4)為了誘導(dǎo)該菊花試管苗生根，培養(yǎng)基中一般不加入________(填“6BA”或“IAA”)。 【例2】 某同學(xué)進行蘋果汁制作實驗，工藝如圖所示。 (1)圖中用KMnO4的溶液浸泡蘋果的目的是________________。黑曲霉提取液中含有的________可分解果膠，從而使果汁澄清。固定化柱中填充的石英砂通過________方式將酶固定化，酶被固定后用蒸餾水洗滌固定化柱是為了除去_____________

9、___。 (2)實驗中，操作流程A和B的先后順序為________。在蘋果汁澄清過程中，應(yīng)關(guān)閉的流速調(diào)節(jié)閥是________。要測定從固定化柱流出的蘋果汁中是否還有果膠，可取一定量的果汁與等量的________混合，如果出現(xiàn)________現(xiàn)象，說明果膠還沒有被完全分解。為使果膠完全分解，應(yīng)將流速調(diào)________。 (3)實驗后，將洗滌過的固定化柱在低溫環(huán)境中保存若干天，該固定化柱仍可用于蘋果汁制作實驗，說明固定化酶可被________使用。 果的消毒作用?？墒构z分解的物質(zhì)是果膠酶。在制備固定化酶時，石英砂具有吸附作用。為了除去未被 【變式探究】 某實驗小組進行固定化酵母細(xì)胞的制備

10、，并開展游離酵母和固定化酵母發(fā)酵產(chǎn)酒酒精度的比較。請回答下列問題。 產(chǎn)酒酒精度的比較 時間/d 游離酵母 固定化酵母 0 0 0 2 1.0 2.5 4 2.1 4.2 6 3.2 5.0 8 3.9 5.4 10 4.3 6.0 12 4.6 6.4 (1)制作凝膠珠的實驗步驟是：酵母細(xì)胞的活化―→________________―→配制海藻酸鈉溶液―→________________―→固定化酵母細(xì)胞。 (2)影響實驗成敗的關(guān)鍵步驟是__________________________________________________。

11、 (3)該小組將制備好的固定化酵母與游離酵母分別放在一定的條件下發(fā)酵，定時記錄發(fā)酵液中酒精度的變化。 ①實驗過程中“在一定的條件下發(fā)酵”的條件是________，要求條件相同是為了確保________。 ②由表可知，固定化酵母和游離酵母發(fā)酵都能產(chǎn)生酒精，但固定化酵母在發(fā)酵前期的延遲期的時間比游離酵母在發(fā)酵前期的延遲期的時間要________。 【例3】 多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是一種體外迅速擴增DNA片段的技術(shù)。請回答下列有關(guān)PCR技術(shù)的基本原理及應(yīng)用問題。 (1)DNA的兩條鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械?，通常將________的末端稱為5′端，當(dāng)引物與DNA母鏈通過堿基互補配對結(jié)合后，DNA聚

12、合酶就能從引物的________開始延伸DNA鏈。 (2)PCR利用了DNA的熱變性原理解決了打開DNA雙鏈的問題，但又導(dǎo)致了DNA聚合酶失活的新問題。到20世紀(jì)80年代，科學(xué)家從一種Taq細(xì)菌中分離到________，它的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用解決了上述問題；要將Taq細(xì)菌從其他普通的微生物中分離出來，所用的培養(yǎng)基叫________。 (3)PCR的每次循環(huán)可以分為________三步。假設(shè)在PCR反應(yīng)中，只有一個DNA片段作為模板，請計算在5次循環(huán)后，反應(yīng)物中大約有________個這樣的DNA片段。 (4)請用簡圖表示出一個DNA片段PCR反應(yīng)中第二輪的產(chǎn)物。 (5)簡述PCR技術(shù)的主要應(yīng)用

13、。 ________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________(要求3項以上)。 【變式探究2】下列有關(guān)“血紅蛋白提取和分離”的相關(guān)敘述中，正確的是(　　)。 A．用蒸餾水進行紅細(xì)胞的洗滌，其目的是去除細(xì)胞表面雜蛋白

14、 B．將血紅蛋白溶液進行透析，其目的是去除相對分子質(zhì)量較大的雜質(zhì) C．血紅蛋白釋放時加入有機溶劑，其目的是使血紅蛋白溶于有機溶劑 D．整個過程不斷用磷酸緩沖液處理，是為了維持血紅蛋白的結(jié)構(gòu) 1．下列有關(guān)固定化酶和固定化細(xì)胞的敘述，正確的是(　　)。 A．可用包埋法制備固定化酵母細(xì)胞 B．反應(yīng)產(chǎn)物對固定化酶的活性沒有影響 C．葡萄糖異構(gòu)酶固定前后專一性不同 D．固定化細(xì)胞可以催化各種反應(yīng)底物的一系列反應(yīng) 2．某種極具觀賞價值的蘭科珍稀花卉很難獲得成熟種子。為盡快推廣種植，可應(yīng)用多種技術(shù)獲得大量優(yōu)質(zhì)苗，下列技術(shù)中不能選用的是(　　)。 A．利用莖段扦插誘導(dǎo)生根技術(shù)快

15、速育苗 B．采用花粉粒組織培養(yǎng)獲得單倍體苗 C．采集幼芽嫁接到合適的其他種類植物體上 D．采用幼葉、莖尖等部位的組織進行組織培養(yǎng) 3．請回答下列與菊花莖段組織培養(yǎng)實驗操作有關(guān)的問題。 (1)由于菊花莖段組織培養(yǎng)比較容易，故在配制MS固體培養(yǎng)基時，________(必需添加、不必添加)植物激素。培養(yǎng)基配制完畢后，還需進行________滅菌。 (2)應(yīng)選用生理狀況好的菊花嫩枝莖段作為________，這是因為其更容易被誘導(dǎo)________。 (3)菊花莖段在接種前要用適當(dāng)濃度的________溶液進行表面消毒。 (4)接種前，工作臺要用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精擦拭一遍。之后，所

16、有的接種操作都必須在________旁進行，并且每次使用器械后，都需要用________滅菌。 (5)接種后的錐形瓶最好放在________中培養(yǎng)。培養(yǎng)期間應(yīng)注意事項主要有：定期________、控制好________，并每日給予適當(dāng)時間光照。 (5)無菌箱　消毒　培養(yǎng)溫度 4．紅細(xì)胞含有大量的血紅蛋白，紅細(xì)胞的機能主要由血紅蛋白完成，血紅蛋白的主要功能是攜帶氧氣或二氧化碳，我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動物的血液來提取和分離血紅蛋白，請回答下列有關(guān)問題。 (1)實驗前取新鮮的血液，要切記在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉，取血回來，馬上進行離心，收集血紅蛋白溶液。 ①加入檸檬酸鈉的

17、目的是_______________________________________________。 ②以上所述的過程為樣品處理，它包括________、______、收集血紅蛋白溶液。 (2)收集的血紅蛋白溶液可以在透析袋中透析，這就是樣品的粗分離。 ①透析的目的是________；②透析的原理是________。 (3)通過凝膠色譜法將樣品進一步純化，最后經(jīng)SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳進行純度鑒定。 ①樣品純化的方法是________。 ②加入SDS可以使蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠電泳中的遷移率完全取決于________。 5．生物技術(shù)實踐與人們的生產(chǎn)和生活密切相關(guān)。請回答下列

18、有關(guān)問題。 (1)進行菊花組織培養(yǎng)的基本操作步驟是制備MS固體培養(yǎng)基、________、接種、培養(yǎng)、移栽、栽培?；ㄋ庪x體培養(yǎng)時，選擇合適發(fā)育時期的花粉能提高誘導(dǎo)成功率，確定花粉發(fā)育時期最常用的染色方法是________。花粉經(jīng)脫分化產(chǎn)生胚狀體還是愈傷組織主要取決于培養(yǎng)基中________。 (2)如圖一表示制備固定化酵母細(xì)胞的有關(guān)操作，圖中的X溶液為________，其作用是________________。用注射器滴加海藻酸鈉與酵母菌混合液時，應(yīng)將溶化好的海藻酸鈉溶液冷卻至室溫，才能加入已活化的酵母菌，目的是防止________________。 (3)為了探究某加酶洗衣粉中堿性蛋

19、白酶含量與洗滌效果的關(guān)系，某同學(xué)通過實驗獲得如圖二所示的結(jié)果。由圖可知，加酶洗衣粉中堿性蛋白酶的最適含量是________%，本實驗的自變量是________________。 膠珠　高溫殺死酵母菌　(3)0.6　堿性蛋白酶的含量 1．請回答下列生物技術(shù)方面的問題。 (1)微生物接種的方法中最常用的是平板劃線法和______法，后者是將菌液進行一系列的________，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基的表面，再進行________。菌落是在固體培養(yǎng)基上由________繁殖而來的形態(tài)可見的子細(xì)胞群體。 (2)菊花的組織培養(yǎng)的大致過程如圖所示，請回答下列問題： 圖中B

20、、C依次表示________(填名稱)過程，該過程中使用的關(guān)鍵激素是________。該實驗操作成功的關(guān)鍵是__________，所以要對外植體、超凈工作臺等消毒，對________等滅菌。 2．固定化酶是從20世紀(jì)60年代迅速發(fā)展起來的一種技術(shù)。東北農(nóng)業(yè)大學(xué)科研人員利用雙重固定法，即采用戊二醛作交聯(lián)劑(使酶相互連接)，海藻酸鈉作為包埋劑來固定小麥酯酶，研究固定化酶的性質(zhì)，并對其最佳固定條件進行了探究。如圖顯示的是部分研究結(jié)果(注：酶活力為固定化酶催化化學(xué)反應(yīng)的總效率，包括酶活性和酶的數(shù)量)，分析回答有關(guān)問題。 (1)從對溫度變化適應(yīng)性和應(yīng)用范圍的角度分析，甲圖所示結(jié)果可以得出的結(jié)

21、論是________________________________________________________________________。 (2)乙圖曲線表明濃度為________的海藻酸鈉包埋效果最好，當(dāng)海藻酸鈉濃度較低時，酶活力低的原因是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (3)固定化酶的活力隨使用次數(shù)的增多而下降，由

22、丙圖可知，固定化酶一般可重復(fù)使用________次，之后酶活力明顯下降。 (4)固定小麥酯酶采用雙重固定法，這是因為______________________________________________。 【解析】通過分析圖甲可知，固定化酶與游離酶相比，對溫度變化的適應(yīng)性更強且應(yīng)用范圍較廣。乙圖曲線表明濃度為3%的海藻酸鈉包埋效果最好，此時的酶活力最高，當(dāng)海藻酸鈉濃度較低時包埋不緊密， 3．通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)可以快速繁殖、生產(chǎn)藥物及培育無病毒的植株等。如圖是植物組織培養(yǎng)的過程，請回答相關(guān)問題。 離體的植物器官、組織或細(xì)胞①―→愈傷組織②―→叢芽③―→植株④ (1)離體的植物器

23、官、組織或細(xì)胞能夠被培養(yǎng)成新的植物體的根本原因是________。植物組織培養(yǎng)技術(shù)所用的MS培養(yǎng)基中________提供植物細(xì)胞生活所必需的無機鹽；________提供碳源，同時能夠維持細(xì)胞的滲透壓。 (2)利用月季的花藥離體培養(yǎng)產(chǎn)生單倍體時， 選材非常重要。一般來說，在________期花藥培養(yǎng)的成功率最高。為了選擇該期的花藥，通常選擇________的花蕾。若要得到可育植株，需要對④進行處理的方法有____________________________。 (3)若要進行蘭花無病毒植株的培育，首先選擇蘭花的________作為外植體，其原因是________________。從外植體到

24、無病毒植株試管苗，要人為控制細(xì)胞的________和________過程。研究人員研究了莖尖外植體大小對苗的成活率和脫毒率的影響，實驗結(jié)果如圖所示： 實驗結(jié)果表明，莖尖越小，________，因此脫毒培養(yǎng)中莖尖外植體的適宜大小為________mm。 (4)在植物組織培養(yǎng)過程中，愈傷組織的成功誘導(dǎo)是至關(guān)重要的步驟。某研究小組以食用稗的成熟胚作為外植體，在基本培養(yǎng)基上研究植物生長調(diào)節(jié)劑對食用稗愈傷組織誘導(dǎo)率的影響。實驗結(jié)果如下表： 培養(yǎng)基 代號 愈傷組織 誘導(dǎo)率/% L1 1.0 0 65.41 L2 2.0 0 68.76 L3 3.0 0 91

25、.01 L4 3.0 0.2 54.84 L5 3.0 0.5 57.35 L6 3.0 1.0 51.71 注：愈傷組織誘導(dǎo)率(%)＝產(chǎn)生愈傷組織的外植體數(shù)/接種的外植體總數(shù)×100% 從上表可知，在基本培養(yǎng)基中添加較高濃度的________有利于食用稗的胚形成愈傷組織，而添加________則不利于食用稗的胚形成愈傷組織。 4．如圖表示菊花的嫩枝和月季的花藥的離體培養(yǎng)過程，請回答下列有關(guān)問題。 (1)植物組織培養(yǎng)常用的培養(yǎng)基名稱為________________，從物理性質(zhì)來分為________培養(yǎng)基。 (2)菊花組織培養(yǎng)中選取生長旺盛的嫩枝的原因

26、是__________________________________________ ________________________________________________________________________。 對月季來說，花粉發(fā)育的過程中適宜花粉培養(yǎng)的時期是________期，為確定花粉是否處于該時期，最常用的鏡檢方法是________。 (3)兩種植物組織培養(yǎng)都需要接種，接種前為確定培養(yǎng)基是否滅菌徹底，檢測的方法是________________________________________________________________________，植

27、物組織培養(yǎng)無菌操作應(yīng)注意_________________________________________________(答兩點)。 (4)月季的花藥培養(yǎng)與菊花的嫩枝組織培養(yǎng)不同，從植物產(chǎn)生的途徑來說，花粉植株產(chǎn)生的途徑除了圖中所示外，還可以通過________階段發(fā)育而來，這兩種發(fā)育途徑的差別主要取決于________________________________________________________________________。 5．請回答有關(guān)果酒制作及固定化細(xì)胞的問題。 (1)葡萄汁發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生，可用________來檢驗，若在酸性條件下液體呈現(xiàn)___

28、_____色，則證明有酒精產(chǎn)生。 (2)為提高果汁的出汁率及使果汁變得澄清，在果汁生產(chǎn)中常用到________。 (3)利用果汁可以釀制果酒，現(xiàn)為提高果酒的品質(zhì)及節(jié)約生產(chǎn)成本，某廠家已嘗試使用固定化細(xì)胞技術(shù)。在制備固定化酵母細(xì)胞時，常采用下圖中的方法________(填出序號及名稱)。采用該方法的原因是________________________________________________________________________。 (4)制作固定化酵母細(xì)胞時，要將已冷卻至________的溶化好的海藻酸鈉溶液與已________的酵母細(xì)胞充分?jǐn)嚢?，?jīng)充分混合均勻的酵母

29、細(xì)胞溶液可在飽和的________溶液中形成凝膠珠。如果得到的凝膠珠顏色過淺、呈白色，說明________，如果得到的凝膠珠不是圓形或橢圓形，則可能的原因是________________________________________________________________________。 【解析】在果汁生產(chǎn)中加入果膠酶，能夠提高果汁的出汁率及使果汁變得澄清。酵母細(xì)胞的固定多采用包埋法，采用該種方法的原因是體積大的細(xì)胞難以被吸附或結(jié)合，但它不容易從包埋材料中漏出；在包 6．(1)PCR是一種DNA體外擴增技術(shù)。1988年，PCR儀問世，并被廣泛應(yīng)用于基因擴增和DNA序列測定。如

30、圖是PCR技術(shù)示意圖，請回答下列問題。 ①引物是此過程中必須加入的物質(zhì)，從化學(xué)本質(zhì)上說，引物是一小段________________________________________________________________________。 ②將雙鏈DNA________________，使之變性，從而導(dǎo)致 ________________________________________________________________________。 ③引物延伸需提供________________作為原料。 (2)紅細(xì)胞含有大量血紅蛋白，我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎

31、動物的血液進行實驗，來提取和分離血紅蛋白，血紅蛋白提取和分離的程序可分為四步：樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定。請回答下列有關(guān)問題： ①樣品處理，它包括紅細(xì)胞的洗滌、________、分離血紅蛋白溶液。 ②收集的血紅蛋白溶液在透析袋中經(jīng)過透析，這就是樣品的粗分離。透析的目的是________________。透析的原理是________________________________________________________________________。 (2)血紅蛋白的提純中，樣品處理可分為四步：①紅細(xì)胞的洗滌，②血紅蛋白的釋放，③分離血紅蛋 7．某生物興趣小組

32、開展DNA粗提取的相關(guān)探究活動。具體步驟如下： 材料處理：稱取新鮮的花菜、辣椒和蒜黃各2份，每份10 g。剪碎后分成兩組，一組置于20 ℃、另一組置于－20 ℃條件下保存24 h。 DNA粗提?。? 第一步：將上述材料分別放入研缽中，各加入15 mL研磨液，充分研磨，用兩層紗布過濾，取濾液備用。 第二步：先向6只小燒杯中分別注入10 mL濾液，再加入20 mL體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精，然后用玻璃棒緩緩地向一個方向攪拌，使絮狀物纏繞在玻璃棒上。 第三步：取6只試管，分別加入等量的2 mol/L的NaCl溶液溶解上述絮狀物。 DNA檢測：在上述試管中各加入4 mL二苯胺試劑?；旌暇鶆蚝?，

33、置于沸水中加熱5 min，待試管冷卻后比較溶液的顏色深淺，結(jié)果如下表。 材料保存溫度 花菜 辣椒 蒜黃 20 ℃ ＋＋ ＋ ＋＋＋ －20 ℃ ＋＋＋ ＋＋ ＋＋＋＋ 注：“＋”越多表示藍色越深。 分析上述實驗過程，回答下列問題。 (1)該探究性實驗的課題名稱是____________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (2)第二步中“緩緩地”攪拌，這是為了減少__

34、__________________________________________。 (3)根據(jù)實驗結(jié)果，得出結(jié)論并分析。 ①結(jié)論1：與20 ℃相比，相同實驗材料在－20 ℃條件下保存，DNA的提取量較多。 結(jié)論2：________________________________________________________________________。 ②針對結(jié)論1，請給出合理的解釋：______________________________________________ ________________________________________________________________________。 (4)氯仿密度大于水，能使蛋白質(zhì)變性沉淀，與水和DNA均不相溶，且對DNA影響極小。為了進一步提高DNA純度，依據(jù)氯仿的特性，在DNA粗提取第三步的基礎(chǔ)上繼續(xù)操作的步驟是________________________________________________________________________， 然后用體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精使DNA析出。