2022年高考生物大一輪復(fù)習(xí) 1微生物培養(yǎng)技術(shù)考題演練 中圖版選修1
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1、2022年高考生物大一輪復(fù)習(xí) 1微生物培養(yǎng)技術(shù)考題演練 中圖版選修1 1.(xx·青島模擬)急性腸胃炎、手足口病分別是由細(xì)菌和病毒通過消化道進入人體導(dǎo)致的,因此檢驗飲用水的細(xì)菌含量和病毒含量是有效監(jiān)控疾病發(fā)生的必要措施。請回答下列與檢驗飲用水有關(guān)的問題: (1)檢驗大腸桿菌的含量時,通常將水樣進行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的水樣用涂布器分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng),記錄菌落數(shù)量,這種方法稱為________________________________。在下圖所示的四種菌落分布圖中,不可能是用該方法得到的是________。 (2)圖中用該方法得到的菌落分布圖中,
2、最符合計數(shù)要求的是圖中的________。 (3)用該方法統(tǒng)計樣本菌落數(shù)時是否需要設(shè)置對照組?____________。為什么? ___________________________________________________________________。 (4)分別取0.1 mL、已稀釋103倍的水樣分別涂布到3個瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng),培養(yǎng)基記錄到大腸桿菌的菌落平均數(shù)為50。則每升原水樣中大腸桿菌數(shù)為_____________________________________________________________。 【解析】(1)據(jù)圖可知,D圖所示的菌落分布
3、為平板劃線法接種獲得的。 (2)利用稀釋涂布平板法進行微生物計數(shù)時,需要得到30~300個菌落的平板進行計數(shù)。 (3)為了增強實驗的說服力,通常要設(shè)置對照實驗,本實驗可設(shè)置空白對照排除培養(yǎng)基污染產(chǎn)生的影響。 (4)根據(jù)公式計算每升原水樣中大腸桿菌數(shù)為50×103÷0.1×1 000=5.0×108。 答案:(1)稀釋涂布平板法 D (2)C (3)需要 培養(yǎng)基制備不合格會導(dǎo)致菌落數(shù)增加 (4)5.0×108 【易錯提醒】(1)不理解平板劃線法和稀釋涂布平板法接種的結(jié)果而不能對圖中結(jié)果作出正確的判斷。 (2)套用計算公式時要注意單位,容易將升與毫升混淆而出錯。 2.(xx·新課
4、標(biāo)全國卷Ⅱ)臨床使用抗生素前,有時需要做細(xì)菌耐藥實驗。實驗時,首先要從病人身上獲取少量樣本,然后按照一定的實驗步驟操作,以確定某致病菌對不同抗生素的敏感性。 回答下列問題: (1)為了從樣本中獲取致病菌單菌落,可用________________法或__________________法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面,經(jīng)過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。 (2)取該單菌落適當(dāng)稀釋,用__________法接種于固體培養(yǎng)基表面,在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h,使其均勻生長,布滿平板。 (3)為了檢測該致病菌對于抗生素的敏感性,將分別含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置,培養(yǎng)
5、一段時間后,含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈,說明該致病菌對抗生素A________________________;含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈,說明該致病菌對抗生素B____________;含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小,說明______________________________________;含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小,且透明圈中出現(xiàn)了一個菌落,在排除雜菌污染的情況下,此菌落很可能是抗生素D的________________。 (4)根據(jù)上述實驗結(jié)果,為達(dá)到抗菌目的,最好應(yīng)選用抗生素____________________。 【解題指南】解答本題可從以下兩個方面著
6、手: (1)分離微生物方法:平板劃線法和稀釋涂布平板法。 (2)透明圈的大小表示此種抗生素抗菌能力的強弱。 【解析】(1)在微生物的培養(yǎng)過程中,常用來分離微生物的方法是稀釋涂布平板法或平板劃線法。 (2)為了使微生物在培養(yǎng)基上能夠均勻分布,一般用涂布法將微生物接種在培養(yǎng)基上。 (3)在抗藥性檢驗過程中,如果在菌落周圍出現(xiàn)透明的圓圈,說明此種抗生素可抑制該細(xì)菌生長;透明圈的大小表示此種抗生素抗菌能力的強弱,據(jù)此可判斷A、B、C抗菌能力強弱依次是A、C、B;D的透明圈中出現(xiàn)了一個菌落,說明該菌落對此種抗生素具有耐藥性。 (4)實驗結(jié)果表明抗生素A對該致病菌的抗菌效果最好。 答案:(1
7、)平板劃線 稀釋涂布平板 (2)涂布 (3)敏感 不敏感 該致病菌對C的敏感性比對A的弱 耐藥菌 (4)A 【加固訓(xùn)練】(xx·德州模擬)35%~40%的甲醛水溶液(福爾馬林)可作為防腐劑,其防腐的原理是使蛋白質(zhì)變性。自然界中有能分解甲醛的細(xì)菌和真菌。下圖為分離和純培養(yǎng)分解甲醛細(xì)菌的實驗過程。請分析回答: (1)②過程的目的是_________________________________________________, ③過程培養(yǎng)出的是__________________________________________________。 (2)上述實驗中,不需要進行滅菌處
8、理的是______________,培養(yǎng)基滅菌的常用方法為____________________。 (3)由③→④的接種可選用____________________法,通過培養(yǎng)能獲得________________。經(jīng)過⑤過程后,取樣測定甲醛濃度,選出________________________________________,再分離、培養(yǎng)菌株。此菌種異化作用的類型是____________。 (4)為研究甲醛初始濃度對菌株降解甲醛能力的影響,進行了相應(yīng)實驗并得到如下圖所示結(jié)果。由圖可知,當(dāng)甲醛的初始濃度小于1 200 mg/L時,菌株_______________;當(dāng)甲醛的初始濃
9、度增高至1 600 mg/L時,48小時后菌株對甲醛的降解能力很弱,甚至失去降解能力,其原因可能是__________________。 【解題指南】解答本題需要明確以下三方面: (1)微生物的選擇培養(yǎng)的原理和方法。 (2)無菌技術(shù)的方法及其意義。 (3)環(huán)境條件對微生物生長的影響。 【解析】(1)②過程用的肉湯培養(yǎng)基主要是對污泥中的微生物進行擴大培養(yǎng),以增加目的菌的菌群數(shù)量(提高目的菌的種群密度),③過程用的培養(yǎng)基以甲醛為唯一碳源,因此可以選擇出以甲醛為碳源的細(xì)菌(甲醛分解菌)。 (2)培養(yǎng)過程中,目的菌來自活性污泥,因此活性污泥不能進行滅菌處理,其他的器材均需滅菌處理。其中
10、培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌。 (3)微生物的純培養(yǎng)可以利用平板劃線法或稀釋涂布平板法進行接種,通過培養(yǎng)后能獲得單個菌落。通過⑤過程培養(yǎng)后,分解甲醛能力強的菌株可使培養(yǎng)液中的甲醛大量分解,含量下降。由培養(yǎng)條件需振蕩培養(yǎng)可知,此菌種的異化作用為需氧型。 (4)由曲線可知,當(dāng)甲醛的初始濃度小于或等于1 200 mg/L時,曲線均能降至0,因此可以完全降解甲醛;當(dāng)甲醛的初始濃度增高至1 600 mg/L時,甲醛下降到一定濃度便不再下降,說明甲醛分解菌已經(jīng)失去分解甲醛的能力,可能是甲醛濃度過高會使菌體蛋白質(zhì)變性,從而降低了細(xì)菌降解甲醛的能力(甲醛濃度過高會產(chǎn)生毒害作用,降低了細(xì)菌降解甲醛的能力
11、)。 答案:(1)增加目的菌的菌群數(shù)量(提高目的菌的種群密度) 以甲醛為碳源的細(xì)菌 (2)活性污泥 高壓蒸汽滅菌法 (3)平板劃線(稀釋涂布平板) 單個菌落 甲醛濃度最低的培養(yǎng)瓶 需氧型 (4)可以完全降解甲醛 甲醛濃度過高會使菌體蛋白質(zhì)變性,從而降低了細(xì)菌降解甲醛的能力(甲醛濃度過高會產(chǎn)生毒害作用,降低了細(xì)菌降解甲醛的能力) 3.(xx·濰坊模擬)據(jù)報道,從部分企業(yè)生產(chǎn)的速凍食品中檢出葡萄球菌超標(biāo),“細(xì)菌門”事件引起公眾普遍關(guān)注。葡萄球菌能分解卵黃中的卵磷脂,在含卵黃的固體培養(yǎng)基上形成的菌落周圍會出現(xiàn)特有的乳白色的乳濁環(huán)。請回答下列問題: (1)某興趣小組欲檢測某果汁類食品中是否含
12、有葡萄球菌,請幫他們完善下列步驟。 ①配制培養(yǎng)基:稱取適量的牛肉膏、蛋白胨、NaCl、瓊脂等,加入蒸餾水,攪拌加熱至完全溶解后調(diào)節(jié)pH,分裝到錐形瓶后進行________,在無菌狀態(tài)下加入卵黃液(100 mL 10%滅菌NaCl溶液中加一個雞蛋黃,振蕩均勻)搖勻后立即倒平板。 ②接種:取待檢測果汁2.5 mL加入22.5 mL滅菌生理鹽水中,制成接種樣液。 實驗組:將接種樣液用________法接種在含卵黃的固體培養(yǎng)基上。 對照組:將__________________用平板劃線法接種在含卵黃的固體培養(yǎng)基上或不接種作為________對照。 將上述接種后的培養(yǎng)皿同時放在36℃的恒溫箱
13、中培養(yǎng)48 h。 ③觀察:觀察培養(yǎng)基表面______________________________________________。 (2)培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨為葡萄球菌生長和繁殖提供________________________________。葡萄球菌能耐受高濃度的NaCl溶液,所以在配制培養(yǎng)基時加入高濃度的NaCl溶液可以將它分離出來,此培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。 (3)若要統(tǒng)計某土壤樣品中該活菌數(shù)目,宜采用__________法。 【解題指南】(1)關(guān)鍵信息: ①葡萄球菌能分解卵黃中的卵磷脂,在含卵黃的固體培養(yǎng)基上形成的菌落周圍會出現(xiàn)特有的乳白色的乳濁環(huán)。
14、②接種樣液是用滅菌生理鹽水稀釋的。 ③對照組用平板劃線法接種。 (2)必備知識: ①對照實驗除自變量不同,其他均相同。 ②要統(tǒng)計土壤中的活菌數(shù)目宜用稀釋涂布平板法。 【解析】(1)①培養(yǎng)基的制備流程:計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。 ②比較實驗組和對照組可知,實驗的自變量為是否接種接種樣液,接種方法為無關(guān)變量,因此實驗組的接種方法應(yīng)與對照組相同,也應(yīng)用平板劃線法。對照組不接種,或接種接種樣液的溶劑,為空白對照。 ③根據(jù)題干關(guān)鍵信息“葡萄球菌能分解卵黃中的卵磷脂,在含卵黃的固體培養(yǎng)基上形成的菌落周圍會出現(xiàn)特有的乳白色的乳濁環(huán)”可知,存在葡萄球菌時,培養(yǎng)基上會出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落,
15、因此可以根據(jù)是否出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落判斷是否存在葡萄球菌。 (2)培養(yǎng)基中的牛肉膏可以為葡萄球菌生長和繁殖提供碳源、氮源、磷酸鹽和維生素,蛋白胨可以為葡萄球菌生長和繁殖提供氮源和維生素。加入高濃度的NaCl溶液的培養(yǎng)基可以抑制大多數(shù)微生物的生長繁殖,因此該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。 (3)統(tǒng)計某土壤樣品中葡萄球菌的活菌數(shù)目應(yīng)采用稀釋涂布平板法。 答案:(1)①滅菌(高壓蒸汽滅菌) ②平板劃線 無菌生理鹽水 空白 ③是否出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落 (2)碳源、氮源、磷酸鹽和維生素 選擇 (3)稀釋涂布平板 4.(xx·煙臺模擬)人和哺乳動物的尿中含有尿素,大量尿素的存在會對環(huán)境造成污染。
16、土壤中有些細(xì)菌含有脲酶,可通過降解尿素作為其生長的氮源。現(xiàn)對土壤中的這類細(xì)菌進行分離實驗,請回答下列問題。 (1)將樣液進行一系列的梯度稀釋,然后接種培養(yǎng)。在稀釋土壤溶液的過程中每一步都要在____________________旁進行操作。接種后的培養(yǎng)皿________于 37℃的________________中培養(yǎng)。 (2)用含有酚紅指示劑的培養(yǎng)基篩選能分泌脲酶的細(xì)菌,從功能上劃分該培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。若培養(yǎng)基中存在能分解尿素的細(xì)菌,其菌落周圍會出現(xiàn)紅色環(huán)帶,這是由于尿素被分解產(chǎn)生的________使pH升高,酚紅指示劑產(chǎn)生顏色變化,從而證明這一菌株可以以尿素作為氮源
17、。變色區(qū)域越大,表明該菌株利用尿素的能力________。 (3)與全營養(yǎng)培養(yǎng)基中的菌落相比,以尿素為氮源的培養(yǎng)基中菌落數(shù)( ) A.多 B.少 C.相等 D.幾乎為零 【解析】(1)微生物的接種操作要在酒精燈的火焰旁進行,接種后的平板要倒置于37℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 (2)加入指示劑的培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基。加入的酚紅指示劑可以指示培養(yǎng)基pH的變化,當(dāng)分解尿素的細(xì)菌分解尿素時,會產(chǎn)生氨,使培養(yǎng)基pH升高,培養(yǎng)基變紅,并且產(chǎn)生的氨量與紅色的顏色深淺呈正相關(guān)。 (3)以尿素為氮源的培養(yǎng)基上只能生長尿素分解菌,因此該培養(yǎng)基上長出的菌落數(shù)目比全營養(yǎng)培養(yǎng)基上長出的菌落數(shù)少。
18、 答案:(1)酒精燈火焰 倒置 恒溫培養(yǎng)箱 (2)鑒別 氨 越強 (3)B 5.現(xiàn)在大力提倡無紙化辦公,但是每年仍然不可避免地產(chǎn)生大量的廢紙,其主要成分是木質(zhì)纖維,人類正努力將其轉(zhuǎn)化為一種新的資源——乙醇。如圖是工業(yè)上利用微生物由纖維素生產(chǎn)乙醇的基本工藝流程,請回答相關(guān)問題: (1)自然界中①環(huán)節(jié)需要的微生物大多分布在______________的環(huán)境中。將從土壤中獲得的微生物培養(yǎng)在以________為碳源、并加入______的培養(yǎng)基上,篩選周圍有________的菌落。 (2)在如上所述的篩選過程中獲得了三個菌落,對它們分別培養(yǎng),并完成環(huán)節(jié)②,且三種等量酶液中酶的濃度相同,則你
19、認(rèn)為三種酶液的活性__________________(一定相同、不一定相同、一定不同),可以通過________________進行定量測定來鑒定其活性是否相同。 (3)根據(jù)測定結(jié)果,①環(huán)節(jié)常選擇木霉,則②中獲得的酶是________酶。 (4)生產(chǎn)中可以滿足④環(huán)節(jié)的常見菌種是________,為了確保獲得產(chǎn)物乙醇, ⑤環(huán)節(jié)要注意______________________。 【解析】(1)富含纖維素的土壤中,含有大量以纖維素為碳源的纖維素分解菌。剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物,當(dāng)纖維素分解后,復(fù)合物無法形成,培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈,通過此方法來篩選纖維素分解菌。(2)酶液中酶的濃度相同,酶的活性不一定相同,可通過測定纖維素酶分解纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖量是否相等來鑒定其活性是否相同。(3)木霉能產(chǎn)生纖維素酶,可以將纖維素分解。(4)在乙醇發(fā)酵中常用的微生物是酵母菌,在接種過程中一定要避免雜菌污染。乙醇是酵母菌無氧發(fā)酵的產(chǎn)物,發(fā)酵過程中一定要保持無氧的環(huán)境。 答案:(1)富含纖維素(其他答案合理也可,如落葉較多等) 纖維素 剛果紅 透明圈 (2)不一定相同 對纖維素酶分解纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖 (3)纖維素 (4)酵母菌 發(fā)酵裝置的密閉性(或保證無氧條件等)
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