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1、植物激素的檢測方法
1. 生物測試
生物測試法是最早采用的植物激素測定方法它是利用植物激素 的生理活性通過某些植物的組織和器官對植物激素產(chǎn)生的特異性反 應(yīng)進行測定的。
優(yōu)點：簡便易行也能反映植物激素的生理活性
缺點：專一性較差且植物體內(nèi)含有生長素類似物T拮抗物等影響測
定的結(jié)果 需在前處理中盡可能純化所要測定的組分 過程復(fù) 雜此外重復(fù)性差工作量大
2. 免疫檢測
免疫學(xué)技術(shù)應(yīng)用于植物激素的測定有力地促進了激素定量研究的 發(fā)展它的基本原理是利用抗原和抗體的特異性競爭結(jié)合。
優(yōu)點：了檢測靈敏度可檢測出10-12 g的微量物質(zhì)相應(yīng)其前處理也 得到了簡化又改善了測定的專一性。
缺點：
2、抗體的制備較復(fù)雜。
3. 物理化學(xué)方法
物理化學(xué)方法分光譜法和色譜法兩種
1)分光譜法：主要有紫外吸收光漕紅外吸收光譜和熒光法 優(yōu)點：靈敏度高
缺點：專一性差
2)色譜法：利用物質(zhì)在不同介質(zhì)中的分配原理進行測定的，包括 紙上層析，薄層層析(TLC)，氣相色譜(GC)，高效液相色譜(HPLC)以 及氣質(zhì)聯(lián)用（GC-MS）等，將分離和測定結(jié)合起來是色譜法的基本特點。
（1） 紙上層析和TLC：
優(yōu)點：設(shè)備簡單易操作
缺點：分離效率和靈敏度有限制
（2） GC 和 HPLC：
是在紙上層析和TLC的基礎(chǔ)上裝備了商品化的色譜柱和檢測
器，保證了檢測方法的專一、靈敏和準確
（3）
3、 GC 和 HPLC 方法：
分析植物激素,靈敏度和選擇性高,重復(fù)性好，但對前處理要 求較高；又因保留時間的分辨有一定限制，若達不到所需純度要 求可能會出現(xiàn)多種化合物的保留時間相同或接近而影響測定結(jié)果。 （4）在植物激素的理化檢測中儀器聯(lián)用是當代的發(fā)展趨勢：
最常用的結(jié)合系統(tǒng)是氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用（GCMSD，技術(shù)，它是 目前最為可靠的激素檢測方法還可驗證其它測定方法的可靠性 而且還可鑒定未知物質(zhì)的結(jié)構(gòu)，但需經(jīng)冗長的樣品純化程序設(shè) 備昂貴，使用和維護成本高。此外有氣液相色譜GLCD配以火焰 熱離子檢測器（FTDD快速靈敏地對植物細胞分裂素定量測定25], 也有薄層色譜與氣相色譜結(jié)合分析ABA。
4、
內(nèi)源植物激素：植物體內(nèi)產(chǎn)生的激素
主要有：、生長素（auxin）、赤霉素（GA3）、細胞分裂素（CTK）、
脫落酸（abscisic acid, ABA）、乙烯（ethyne，ETH）
和油菜素甾醇、 吲哚乙酸（IAA）玉米素（Z）、
玉米素核苷（ZR）反玉米素（ZT）復(fù)合胺、褪黑 激素秋水仙素吲哚丁酸
外源植物激素：人工合成加到植物中
2,4-D（2,4-二氯苯氧乙酸），吲哚丙酸、、蔡乙酸、
4-碘苯氧乙酸乙稀利水楊酸（SA）茉莉酸b9
（必久）矮壯素（ccc）:又叫三西，碌化碌代膽堿 青 鮮素（mh）奈乙酸吲哚丙酸（IPA）吲哚丁酸（IBA） 6-芐基腺嘌吟（BA）激動
5、素（K）
蔡乙酸（NAA）
實驗儀器
中文：
LC-6A高效液相色譜儀
日本島津制作所產(chǎn)品
。。，硅膠柱（250mmX5mm）
日本島津制作所產(chǎn)品
SPD-6AV紫外-可見光度檢測器
日本島津制作所產(chǎn)品
C-R3A數(shù)據(jù)處理機
日本島津制作所產(chǎn)品
HPLC
Waters公司產(chǎn)
Alliance系列HPLC及Premier LCT MS/ MS質(zhì)譜聯(lián)用設(shè)備 加拿大
Waters公 司
Xterra C18色 譜柱（100 mm x2.1 mm x3.5u m,加拿大 Waters公 司
美國HP-5890II型氣相色譜儀，配備FID檢測器，HP-3395積分儀
6、
1100型高效液相色譜儀
美國Aglent公司
SLC-10A VP高效液相色譜儀 日本島津公司
英文：
HPLC-UV analysis, an Agilent 1100 series HPLC-UV system (Agilent
Technologies, USA）
Both methanol and ethanol（HPLC grade） Merck （Darmstadt, Germany）
Acetic acid （analytical reagent grade） Fisher Scientific （Hanover Park, IL, USA）.
實驗試劑
7、中文：
,a-蔡乙酸（NAA）,吲哚乙酸（IAA ）, 6-芐基嘌吟（BA）,K,GA（上
海伯奧生物科技公司）
ZT （上海麗珠東風(fēng)生物技術(shù)有限公司
IBA （英國產(chǎn)，上?；瘜W(xué)試劑分裝站），
IPA（Sigma公 司）
褪黑激素、吲哚乙酸（山入）和復(fù)合胺（Sigma Chemica公司
甲醇和乙腈（HPLC級，加拿大VWR Scientific公司
甲酸（分析純，Sigma公司
IAA,GA3，Z （玉米素）和ABA Fluka公司
GA3 和 ABA Sigma 公司
IAA,ABA,GA 中國藥品生物制品檢定所
甲醇、三氯甲烷和乙酸乙酯
分析純
赤霉素GA3、
8、生長素、IAA和ABA (純度大于97%, Sigma公司)
冰醋酸(AR，上?；瘜W(xué)試劑公司)
玉米素核苷(zR) Sigma公司
玉米素(z) 中國科學(xué)院上海生物化學(xué)研究所
玉米素、赤霉素、生長素、脫落酸 Sigma,純度A99%
腺素、激動素、6-芐氨基嘌吟、秋水仙素、吲柴3-丁酸(科
密歐，純度A95%)
色譜純甲醇 德國MERCK公司
分析純乙酸、甲醇、乙酸乙酯、石油醚 西安化學(xué)試劑廠
英文：
GA3, IAA, ABA (脫落酸)，JA, IBA, NAA, 2,4-D(2, 4-二氯苯酚代乙 酚)，1-ethyl-3-(3-
dimethylaminoprop
9、yl) carbodiimide (EDC) and sodium dodecyl sulphate (SDS) Sigma-Aldrich (St. Louis, MO,USA).
Z, BA, GA, ABA and IBA Sigma-Aldrich (Steinheim, Germany)
IAA,NAAand 2,4-D PhytoTechnology
Laboratories(Shawnee Mission, USA)
植物激素的危害
矮壯素：毒理學(xué)的研究表明:即使在低于日允許攝入量濃度水平 下，矮壯素對動物的繁殖能力仍有不良影響。美國國家職業(yè)安全和健 康研究所發(fā)布的化學(xué)
10、物質(zhì)毒性數(shù)據(jù)庫已將矮壯素列為疑似內(nèi)分泌十 擾物質(zhì)。
赤霉素：赤霉素可能干擾人體正常的內(nèi)分泌系統(tǒng)袁長期食用會 在人體中蓄積袁造成器官的慢性中毒袁并可能引起癌變袁嚴重危及 消費者的身心健康?？捎绊憴C體的內(nèi)分泌系統(tǒng)受試動物的甲狀腺、 卵巢、腎上腺等內(nèi)分泌腺重量明顯增加使得動物某些激素水平發(fā)生 改變，影響動物的生長發(fā)育 甚至發(fā)生癌變。
乙烯利：具有一定的神經(jīng)毒性、致突變性和弱的激素樣作用。對 小鼠的免疫功能具有一定的抑制作用能導(dǎo)致小鼠體細胞、生殖細胞遺 傳損傷，使小鼠骨髓細胞微核率和雄性生殖細胞畸形率提高干擾精 子正常生成和成熟過程導(dǎo)致小鼠體細胞染色體畸變和生殖細胞基 因突變。乙烯利對人類具有潛在
11、的誘癌、致畸及其他多方面的危險。
蔡乙酸：有一定抑制睪丸細胞增殖活性、誘發(fā)睪丸細胞凋亡的作 用。
2, 4七：小鼠長期暴露在2, 4 - D的環(huán)境中會造成骨骼畸形,致 病率和死亡率增加;2, 4 - D具有急性神經(jīng)毒性,對皮膚和眼睛有刺 激作用,吸入或接觸后,其急性毒性作用主要表現(xiàn)為神經(jīng)性毒性； 慢性毒性作用表現(xiàn)為對血液、肝、腎的毒性及抑制某些酶的活力,抑 制某些蛋白質(zhì)的合成。
NAA:屬于低毒農(nóng)藥，大白鼠急性口服1_。50為1 000?5 900
mg - kg- 1。對人的眼睛、皮膚、粘膜和上呼吸道有刺激作用吸入后 可引起咳嗽、喘息、喉炎、氣短、頭痛、惡心、嘔吐通過食道引起 中毒，對肝、腎造成損害。
青鮮素：可能是致癌物 因為它能引起老鼠的染色體斷裂和畸
變。
多效唑：高劑量的多效唑?qū)游镄坌陨称鞴儆袚p傷子代體重 和繁殖指數(shù)降低、肝臟受損 可能是致癌物質(zhì) 應(yīng)慎用；多效唑粉劑 對皮膚和眼睛有輕微至中等的刺激作用。
廠家：上海喜潤化學(xué)工業(yè)有限公司
植物組培及激素-上海世澤生物科技有限公司（比較全）
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