2019-2020年高中生物 專題二 細(xì)胞工程 2.2.2 動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體課時(shí)作業(yè) 新人教版選修3.doc

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2019-2020年高中生物 專題二 細(xì)胞工程 2.2.2 動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體課時(shí)作業(yè) 新人教版選修3 目標(biāo)導(dǎo)航　1.掌握動(dòng)物細(xì)胞融合的原理和方法。2.結(jié)合圖2－24，歸納單克隆抗體的制備過(guò)程及應(yīng)用。 一、動(dòng)物細(xì)胞融合(閱讀P52－53) 1．概念：兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程，也稱細(xì)胞雜交。 2．原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性。 3．誘導(dǎo)融合的方法：(1)物理、化學(xué)方法：與植物體細(xì)胞雜交相同，如聚乙二醇、電激等。 (2)生物方法：滅活的病毒。 4．過(guò)程：不同遺傳信息的兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞雜交細(xì)胞。 5．結(jié)果：形成雜交細(xì)胞。 6．意義：突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段。如：利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)，為制造單克隆抗體開(kāi)辟了新途徑。 二、單克隆抗體(閱讀P52－54) 1．傳統(tǒng)抗體的獲得 (1)方法：①向動(dòng)物體內(nèi)反復(fù)注射某種抗原，使動(dòng)物產(chǎn)生抗體；②從動(dòng)物血清中分離所需抗體。 (2)缺陷：產(chǎn)量低、純度低、特異性差。 2．單克隆抗體的制備 (1)制備原理 ①漿細(xì)胞特點(diǎn)：一種B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生一種單一抗體，B淋巴細(xì)胞在體外不能(能/不能)無(wú)限增殖。 ②骨髓瘤細(xì)胞特點(diǎn)：能無(wú)限增殖。 ③雜交瘤細(xì)胞特點(diǎn)：B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合得到雜交瘤細(xì)胞，既能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體。 (2)制備過(guò)程 制備特異性 ①向小鼠注射特定抗原蛋白 ②從小鼠脾臟中獲取相應(yīng)B淋巴細(xì)胞 B淋巴細(xì)胞 　? 獲得雜交 ①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾中形成的B淋巴細(xì)胞融合 ②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，該雜種細(xì)胞既能迅速大量繁殖又能產(chǎn)生專一的抗體) 瘤細(xì)胞 　? 克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè) 　? 將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔中增殖 　? 提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取 (3)單克隆抗體優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高、并可大量制備。 (4)單克隆抗體的應(yīng)用 ①作為診斷試劑，具有準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速的優(yōu)點(diǎn)。 ②用于治療疾病和運(yùn)載藥物。 判斷正誤： (1)動(dòng)物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交，使遠(yuǎn)緣雜交成為現(xiàn)實(shí)。(　　) (2)動(dòng)物細(xì)胞融合常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇、滅活的病毒、電激等。(　　) (3)動(dòng)物細(xì)胞融合的主要用途是制備克隆動(dòng)物。(　　) (4)雜交瘤細(xì)胞是由經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合而成的，具有既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生特定抗體的能力。(　　) (5)單克隆抗體最主要的優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高，并能大量制備。(　　) (6)單克隆抗體可以用于治療疾病。(　　) (7)動(dòng)物雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生單克隆抗體能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性。(　　) (8)動(dòng)物細(xì)胞核融合發(fā)生在雜種細(xì)胞的有絲分裂過(guò)程中。(　　) 答案　(1)　(2)√　(3)　(4)√　(5)√　(6)√　(7)　(8)√ 一、動(dòng)物細(xì)胞融合 1．對(duì)細(xì)胞膜融合過(guò)程的理解 (1)細(xì)胞融合的過(guò)程包括細(xì)胞膜的融合、細(xì)胞質(zhì)融合和細(xì)胞核融合，其中細(xì)胞膜的融合是細(xì)胞融合的先導(dǎo)，在細(xì)胞膜融合中體現(xiàn)出細(xì)胞膜具有流動(dòng)性。 (2)誘導(dǎo)融合的方法有滅活的病毒(最常見(jiàn))、聚乙二醇(PEG)和電激等。 2．動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的對(duì)比 比較項(xiàng)目 植物體細(xì)胞雜交 動(dòng)物細(xì)胞融合 原理 細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞的全能性 細(xì)胞膜的流動(dòng)性 細(xì)胞融 合方法 用纖維素酶、果膠酶去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合 用胰蛋白酶或膠原蛋白酶使細(xì)胞分散后，誘導(dǎo)細(xì)胞融合 誘導(dǎo)手段 離心、電激、振動(dòng)、聚乙二醇等誘導(dǎo) 與植物體細(xì)胞雜交相比，還可用滅活的病毒誘導(dǎo) 結(jié)　果 形成雜種植株 形成雜種細(xì)胞，以生產(chǎn)細(xì)胞產(chǎn)品 用　途 克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，擴(kuò)展雜交親本范圍，培育新品種 制備單克隆抗體、病毒疫苗、干擾素等 意義 突破有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能 1．動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合所用的誘導(dǎo)方法有何不同？ 答案　動(dòng)物細(xì)胞融合可用滅活的病毒進(jìn)行誘導(dǎo)。 2．細(xì)胞融合技術(shù)與有性雜交相比有哪些優(yōu)點(diǎn)？ 答案　有性雜交有著十分嚴(yán)格的時(shí)空關(guān)系和物種界限。動(dòng)物細(xì)胞融合則不同，它通過(guò)人工的方法克服了存在于物種之間的遺傳屏障，從而能夠按照人們的意愿，把不同物種的不同組織類型的細(xì)胞融合在一起。 3．動(dòng)物細(xì)胞融合和受精作用的區(qū)別有哪些呢？ 答案　(1)受精作用是在同種生物之間進(jìn)行的，精子與卵細(xì)胞的融合不需要任何誘導(dǎo)劑就能形成受精卵，受精卵內(nèi)具備同種生物的兩個(gè)親本的遺傳物質(zhì)。 (2)動(dòng)物細(xì)胞融合是在不同物種間進(jìn)行的細(xì)胞融合，由于物種間存在生殖隔離，所以在自然條件下不能融合成雜交細(xì)胞，必須有誘導(dǎo)劑作用才能融合。形成的雜交細(xì)胞具備兩個(gè)親本細(xì)胞的遺傳物質(zhì)，從而體現(xiàn)兩個(gè)親本的遺傳特性。 4．動(dòng)物細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是什么？ 答案　動(dòng)物細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是來(lái)自不同細(xì)胞的兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞核融合成一個(gè)細(xì)胞核。 1．與植物體細(xì)胞雜交相比，動(dòng)物細(xì)胞融合的原理及其特有的誘導(dǎo)因素分別是(　　) A．細(xì)胞膜的流動(dòng)性、離心 B．細(xì)胞膜的流動(dòng)性、滅活的病毒 C．細(xì)胞的全能性、電刺激 D．細(xì)胞的全能性、滅活的病毒 問(wèn)題導(dǎo)析　(1)植物體細(xì)胞雜交的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞的全能性，動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性。 (2)動(dòng)物細(xì)胞融合的常用誘導(dǎo)因素有聚乙二醇、滅活的病毒、電激等，其中滅活的病毒是其特有的誘導(dǎo)因素，而聚乙二醇、電激均可用于誘導(dǎo)植物體細(xì)胞雜交。 答案　B 一題多變 判斷正誤： (1)動(dòng)物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交，是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。(　　) (2)動(dòng)物細(xì)胞融合后形成的具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞遺傳信息的雙核或多核細(xì)胞稱為雜交細(xì)胞。(　　) (3)常用的誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的因素有：聚乙二醇、滅活的病毒、電激、離心等。(　　) (4)細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。(　　) 答案　(1)√　(2)　(3)√　(4)√ 二、單克隆抗體 1．單克隆抗體和常規(guī)抗體的比較 項(xiàng)目 分泌抗體的細(xì)胞 特點(diǎn) 生產(chǎn) 單克隆抗體 雜交瘤細(xì)胞 特異性強(qiáng)、靈敏度高 產(chǎn)量高，易純化分離 常規(guī)抗體 B淋巴細(xì)胞 特異性差、靈敏度低 產(chǎn)量低，分離困難 2.單克隆抗體的制備及應(yīng)用 (1)原理：要獲得大量的單一抗體，必須克隆單一的B淋巴細(xì)胞，形成細(xì)胞群；將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，其原因如下： ①每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只能分泌一種特異性抗體；不同種類的B淋巴細(xì)胞分泌的抗體不同。 ②B淋巴細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)不能無(wú)限增殖；骨髓瘤細(xì)胞能無(wú)限增殖。 ③B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的雜交細(xì)胞既能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體。 (2)單克隆抗體的制備過(guò)程： (3)單克隆抗體的應(yīng)用 ①作為診斷試劑：能準(zhǔn)確識(shí)別各種抗原物質(zhì)的細(xì)微差異，并跟一定抗原發(fā)生特異性結(jié)合，具有準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速的優(yōu)點(diǎn)。 ②用于治療疾病和運(yùn)載藥物 單獨(dú)使用：直接用于癌癥或其他疾病的治療(作為藥物本身)。 綜合使用：與放射性同位素、化學(xué)藥物或細(xì)胞毒素相結(jié)合，制成“生物導(dǎo)彈”，主要用于治療癌癥，也可少量用于其他疾病的治療。 1．仔細(xì)觀察教材P53圖2－24，探討下列問(wèn)題： (1)制備單克隆抗體過(guò)程中的幾種細(xì)胞有何特點(diǎn)？ 答案?、倜庖叩腂淋巴細(xì)胞：能產(chǎn)生單一抗體，但不能無(wú)限增殖。②骨髓瘤細(xì)胞：能無(wú)限增殖，不能產(chǎn)生抗體。③雜交瘤細(xì)胞：既能產(chǎn)生特定的抗體，又能在組織培養(yǎng)條件下進(jìn)行無(wú)限增殖。 (2)單克隆抗體制備過(guò)程中有兩次篩選，其目的分別是什么？ 答案　第一次篩選是在B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合之后，篩選出只有B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的雜種細(xì)胞。第二次篩選需先在多孔培養(yǎng)皿上培養(yǎng)，在每個(gè)孔只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的情況下開(kāi)始培養(yǎng)，然后再篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群。 2．用單克隆抗體及相關(guān)物質(zhì)制成的“生物導(dǎo)彈”中真正起治療作用的物質(zhì)是什么？是單克隆抗體嗎？ 答案　“生物導(dǎo)彈”中真正發(fā)揮治療作用的物質(zhì)是相關(guān)“藥物”，單克隆抗體所起的作用在于將藥物定向帶到靶細(xì)胞所在位置，借助其導(dǎo)向作用，在原位殺死癌細(xì)胞，這樣既不損傷正常細(xì)胞，又減少了用藥劑量。因此，“生物導(dǎo)彈”可作為一種療效高、毒副作用小的新型藥物。 3．若不采用動(dòng)物細(xì)胞融合的方法，能否生產(chǎn)出單克隆抗體？試簡(jiǎn)要說(shuō)明。 答案　能?？蓮慕?jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞中獲取決定所需抗體的基因(目的基因)，導(dǎo)入骨髓瘤細(xì)胞，然后培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞并從培養(yǎng)液中提取分泌物，便可得到單克隆抗體。 2．單克隆抗體制備過(guò)程中，骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞融合后，要用特定的培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細(xì)胞是(　　) ①B淋巴細(xì)胞?、谛∈蠊撬枇黾?xì)胞?、跙淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞?、苄∈蠊撬枇黾?xì)胞自身融合細(xì)胞?、蓦s交瘤細(xì)胞 A．①②③④ B．①②③ C．②④ D．②③ 問(wèn)題導(dǎo)析　(1)單克隆抗體的制備過(guò)程中，骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞融合時(shí)，有三種情況：未發(fā)生融合的細(xì)胞；自身融合的細(xì)胞；骨髓瘤細(xì)胞與單個(gè)B淋巴細(xì)胞融合的雜交瘤細(xì)胞。 (2)在特定的培養(yǎng)基上只有雜交瘤細(xì)胞才能存活增殖。 答案　A 一題多變 判斷正誤： (1)制備單克隆抗體所用的B淋巴細(xì)胞是經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞。(　　) (2)細(xì)胞融合之后需要一次篩選，方可獲得能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞。(　　) (3)利用單克隆抗體制成的“生物導(dǎo)彈”，其選擇性是由藥物決定的，與抗體無(wú)關(guān)。(　　) 答案　(1)√　(2)　(3) 1．下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較中，敘述正確的是(　　) A．誘導(dǎo)融合的方法完全相同 B．所用的技術(shù)手段完全相同 C．所采用的原理完全相同 D．都能形成雜種細(xì)胞 答案　D 解析　兩種細(xì)胞工程技術(shù)都要進(jìn)行細(xì)胞融合，但融合的方法不完全相同；誘導(dǎo)的方法，除動(dòng)物細(xì)胞的融合常用滅活的病毒做誘導(dǎo)劑外，其他的兩者基本相同；兩者采用的原理不同，動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性，最終形成的是雜種細(xì)胞。植物體細(xì)胞雜交的原理有細(xì)胞膜的流動(dòng)性和細(xì)胞的全能性。故正確答案為D。 2．單克隆抗體在醫(yī)療、診斷等方面發(fā)揮著越來(lái)越重要的作用。英國(guó)科學(xué)家米爾斯坦和科勒設(shè)計(jì)了一個(gè)用已免疫的B淋巴細(xì)胞制備單克隆抗體的實(shí)驗(yàn)，下圖為其實(shí)驗(yàn)流程圖。則相關(guān)的敘述或說(shuō)法中，不正確的是(　　) A．a(chǎn)是骨髓瘤細(xì)胞，②表示在選擇培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng) B．制備單克隆抗體時(shí)，選擇B淋巴細(xì)胞的原因是它只能分泌多種特異性抗體 C．③過(guò)程如在體外培養(yǎng)，則需要無(wú)菌、無(wú)毒，營(yíng)養(yǎng)充足，溫度、pH適宜等環(huán)境條件 D．誘導(dǎo)動(dòng)、植物細(xì)胞融合常用的一種化學(xué)誘導(dǎo)劑是聚乙二醇 答案　B 解析　對(duì)于B淋巴細(xì)胞來(lái)說(shuō)，每一種B淋巴細(xì)胞經(jīng)特定抗原刺激只能產(chǎn)生一種特異性抗體。根據(jù)單克隆抗體制備的流程判斷：a是骨髓瘤細(xì)胞、b是雜交瘤細(xì)胞。①是誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的過(guò)程。②表示在選擇培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)、篩選能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞。③包括體外培養(yǎng)和注入小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)。選擇培養(yǎng)基只允許雜交瘤細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖，其他細(xì)胞不能生存。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需具備的條件是：無(wú)菌、無(wú)毒，營(yíng)養(yǎng)充足，溫度適宜，pH適宜，充足的空氣。誘導(dǎo)細(xì)胞融合時(shí)常用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑。 3．下面為制備單克隆抗體過(guò)程示意圖，下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(　　) A．④中的篩選是為了獲得能產(chǎn)生多種抗體的雜交瘤細(xì)胞 B．②中培養(yǎng)基應(yīng)加入選擇性抑制骨髓瘤細(xì)胞DNA分子復(fù)制的物質(zhì) C．上圖中有一處明顯錯(cuò)誤 D．⑤可以無(wú)限增殖 答案　A 解析?、苤械暮Y選是為了獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；②中培養(yǎng)基應(yīng)加入選擇性抑制骨髓瘤細(xì)胞DNA分子復(fù)制的物質(zhì)，這樣才能篩選出雜交瘤細(xì)胞；圖中的小鼠沒(méi)有經(jīng)過(guò)免疫處理，應(yīng)該注射相應(yīng)的抗原，小鼠才能形成相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。 4．科學(xué)家從某些能無(wú)限增殖細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中分離出無(wú)限增殖調(diào)控基因(prG)，該基因能激發(fā)許多動(dòng)物細(xì)胞的分裂，這為單克隆抗體的制備提供了更為廣闊的前景。請(qǐng)回答下面的問(wèn)題： (1)利用細(xì)胞融合技術(shù)制備單克隆抗體，一般選用的是____________和____________________融合。 (2)有人提出，可以直接通過(guò)基因工程導(dǎo)入該調(diào)控基因來(lái)制備單克隆抗體，其思路如圖所示。 ①酶A是指____________，酶B是指____________。 ②對(duì)已導(dǎo)入重組質(zhì)粒的Ⅱ進(jìn)行“檢測(cè)”的原因是_______________________________；Ⅲ指代的細(xì)胞具有的特點(diǎn)__________________________________________________。 ③有人提出用細(xì)胞核移植技術(shù)構(gòu)建重組細(xì)胞來(lái)生產(chǎn)單克隆抗體，試用相關(guān)的圖示及文字表示該過(guò)程：________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 答案　(1)骨髓瘤細(xì)胞　經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞(漿細(xì)胞)　(2)①限制酶　DNA連接酶?、趯?dǎo)入成功率很低　既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體 ③如圖所示 解析　(1)制備單克隆抗體選用的融合細(xì)胞一般為骨髓瘤細(xì)胞(能無(wú)限增殖)與經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞(能產(chǎn)生 特異性抗體)。(2)圖示Ⅰ過(guò)程為獲取目的基因，需用限制酶切取出目的基因片段；由于目的基因?qū)氤晒β什⒉桓撸食Ｐ柽M(jìn)行導(dǎo)入檢測(cè)；由于Ⅲ的細(xì)胞具有“無(wú)限增殖”的調(diào)控基因，故可進(jìn)行無(wú)限增殖，從而產(chǎn)生大量的單克隆抗體。 基礎(chǔ)鞏固 1．關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞融合的說(shuō)法，不正確的是(　　) A．動(dòng)物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交，是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程 B．動(dòng)物細(xì)胞融合后形成的具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞稱為雜交細(xì)胞 C．常用于誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的手段有：聚乙二醇、滅活的病毒、電激、紫外線照射 D．細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能 答案　C 解析　動(dòng)物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交，是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞融合成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程，A正確；融合后形成的具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞，稱為雜交細(xì)胞，B正確；誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有電激、聚乙二醇、滅活的病毒等，不能用紫外線照射，C錯(cuò)誤；細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交不親和的障礙，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能，D正確。 2．動(dòng)物細(xì)胞融合的目的中最重要的是(　　) A．克服遠(yuǎn)緣雜交不親和 B．制備單克隆抗體 C．培育新物種 D．生產(chǎn)雜交細(xì)胞 答案　B 解析　動(dòng)物細(xì)胞融合不像植物體細(xì)胞雜交那樣主要是為了克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，以培育新品種。另外，植物體細(xì)胞雜交還應(yīng)用了植物體細(xì)胞的全能性，動(dòng)物細(xì)胞作為整體，它的全能性受到限制，目前只見(jiàn)到高度分化的細(xì)胞核在去核卵細(xì)胞中表現(xiàn)出全能性，還未見(jiàn)到融合細(xì)胞核表現(xiàn)出全能性的例子，因此動(dòng)物細(xì)胞融合不能用來(lái)培育新物種。生產(chǎn)雜交細(xì)胞，不是細(xì)胞融合的主要目的，雜交細(xì)胞只是細(xì)胞融合完成后所形成的結(jié)構(gòu)名稱。 3．單克隆抗體與血清抗體相比，其優(yōu)越之處在于(　　) A．單克隆抗體可作為某些藥物的載體 B．單克隆抗體可以在體外制備 C．單克隆抗體特異性強(qiáng)、靈敏度高，并可大量制備 D．單克隆抗體的制備過(guò)程簡(jiǎn)單，操作方便 答案　C 解析　普通的抗體其實(shí)也可作為藥物的載體，并可在體外通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)制備，但因其純度低、特異性差，在“生物導(dǎo)彈”應(yīng)用上沒(méi)有價(jià)值。單克隆抗體的制備過(guò)程比普通抗體的制備過(guò)程要復(fù)雜得多。 4．“生物導(dǎo)彈”是指(　　) A．單克隆抗體 B．雜交瘤細(xì)胞 C．產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞 D．在單克隆抗體上連接抗癌藥物 答案　D 解析　把抗癌細(xì)胞的單克隆抗體跟放射性同位素、化學(xué)藥物或細(xì)胞毒素相結(jié)合，制成“生物導(dǎo)彈”，注入體內(nèi)，借助單克隆抗體的導(dǎo)向作用，能將藥物定向帶到癌細(xì)胞所在位置，在原位殺死癌細(xì)胞。 5．科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交瘤細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體。與骨髓瘤細(xì)胞融合的細(xì)胞是(　　) A．經(jīng)過(guò)特定抗原免疫的B淋巴細(xì)胞 B．不經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞 C．經(jīng)過(guò)特定抗原免疫的T淋巴細(xì)胞 D．不經(jīng)過(guò)免疫的T淋巴細(xì)胞 答案　A 解析　骨髓瘤細(xì)胞必須與經(jīng)過(guò)特定抗原免疫的B淋巴細(xì)胞融合，形成雜交瘤細(xì)胞，才能大量增殖并產(chǎn)生能夠與相應(yīng)的抗原特異性結(jié)合的單克隆抗體。 6．制備單克隆抗體所采用的細(xì)胞工程技術(shù)包括(　　) ①細(xì)胞培養(yǎng)?、诩?xì)胞融合　③胚胎移植?、芗?xì)胞核移植 A．①② B．①③ C．②③ D．③④ 答案　A 解析　制備單克隆抗體時(shí)，首先采用細(xì)胞融合技術(shù)得到雜交瘤細(xì)胞，再采用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)獲得能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞群。 7．下面是單克隆抗體制備過(guò)程示意圖，其中1過(guò)程注射的物質(zhì)和A細(xì)胞的名稱分別為(　　) A．抗體、T淋巴細(xì)胞 B．抗原、T淋巴細(xì)胞 C．抗體、B淋巴細(xì)胞 D．抗原、B淋巴細(xì)胞 答案　D 解析　單克隆抗體是由骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合而成的雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的，其中B淋巴細(xì)胞必須首先經(jīng)過(guò)抗原刺激后才能成為具有分泌抗體功能的細(xì)胞。 鞏固提升 8．科學(xué)家用滅活的病毒把骨髓瘤細(xì)胞與經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞融合得到雜交瘤細(xì)胞，滅活病毒的作用是(　　) A．病毒比較小，可鉆入到細(xì)胞內(nèi) B．滅活的病毒已完全死亡，死亡的病毒可以讓細(xì)胞聚集 C．滅活的病毒已失去感染性，對(duì)各種動(dòng)物細(xì)胞不造成破壞，但所保留的融合活性可使不同的動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行融合 D．滅活的病毒帶有目的基因，通過(guò)融合可以讓雜交細(xì)胞帶有目的基因 答案　C 解析　動(dòng)物細(xì)胞融合常用滅活的病毒作誘導(dǎo)劑是因?yàn)闇缁畹牟《静辉倬哂懈腥拘?，不?huì)對(duì)細(xì)胞造成破壞，但仍可促使不同的動(dòng)物細(xì)胞融合。 9．單克隆抗體技術(shù)在疾病診斷和治療以及生命科學(xué)研究中具有廣泛的應(yīng)用。下列關(guān)于單克隆抗體的敘述，錯(cuò)誤的是(　　) A．特異性強(qiáng)、靈敏度高 B．與抗癌藥物結(jié)合可制成“生物導(dǎo)彈” C．體外培養(yǎng)B淋巴細(xì)胞可大量分泌單克隆抗體 D．由經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合而成的雜交瘤細(xì)胞分泌 答案　C 解析　抗體是由B淋巴細(xì)胞分泌的，每一種B淋巴細(xì)胞只能分泌一種抗體。要想獲得大量單一抗體，需要將某一種B淋巴細(xì)胞大量克隆，但是在體外培養(yǎng)的條件下，B淋巴細(xì)胞不能無(wú)限增殖。由B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合而成的雜交瘤細(xì)胞，能在體外培養(yǎng)的條件下大量增殖，并分泌單克隆抗體。 10．20世紀(jì)30年代，科學(xué)家們發(fā)現(xiàn)肺結(jié)核、天花、水痘和麻疹等疾病患者的病理組織中存在多核細(xì)胞，這些多核細(xì)胞最可能的來(lái)源是(　　) A．細(xì)胞進(jìn)行了無(wú)絲分裂造成的 B．細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂時(shí)，染色體復(fù)制后沒(méi)有分開(kāi)形成兩個(gè)子細(xì)胞 C．有絲分裂時(shí)，細(xì)胞核進(jìn)行了分裂，而細(xì)胞質(zhì)沒(méi)有進(jìn)行分裂 D．細(xì)胞在體內(nèi)病毒的作用下發(fā)生了細(xì)胞融合 答案　D 解析　選項(xiàng)C、D都可形成多核細(xì)胞，但結(jié)合題干信息，此種現(xiàn)象與感染病毒有關(guān)，故選項(xiàng)D最有可能。 11．用動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)制備單克隆抗體，下列實(shí)驗(yàn)步驟中錯(cuò)誤的是(　　) A．將抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞 B．用氯化鈣作誘導(dǎo)劑，促使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合 C．篩選雜交瘤細(xì)胞，并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞群，培養(yǎng)后提取單克隆抗體 D．該雜交瘤細(xì)胞株的增殖方式和產(chǎn)物分別是有絲分裂和單克隆抗體 答案　B 解析　B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合需要滅活的病毒、聚乙二醇或物理因素來(lái)誘導(dǎo)。氯化鈣不能作為誘導(dǎo)劑，氯化鈣的作用是在基因工程中用于提高細(xì)胞壁的通透性，便于重組質(zhì)粒進(jìn)入微生物細(xì)胞內(nèi)。 12．右圖為細(xì)胞融合過(guò)程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題： (1)若A、B是植物細(xì)胞，則其融合形成的D細(xì)胞培養(yǎng)成植株，還要應(yīng)用________________________________________________________________________技術(shù)。 (2)若A、B是動(dòng)物細(xì)胞，則一般取自________、幼齡動(dòng)物的器官或組織，然后用胰蛋白酶使其分散開(kāi)來(lái)。A、B到C的過(guò)程中，常用的不同于植物細(xì)胞工程的方法是用________________誘導(dǎo)細(xì)胞融合。 (3)若該過(guò)程用于制備干擾素，A為小鼠________細(xì)胞，在獲得此細(xì)胞之前，應(yīng)給小鼠注射相應(yīng)的抗原，此時(shí)的B為_(kāi)_______細(xì)胞。 (4)從A、B到C的過(guò)程中，可形成________種類型的C細(xì)胞(僅考慮兩個(gè)細(xì)胞間的融合)。若該過(guò)程用于制備單克隆抗體，應(yīng)篩選出符合要求的D細(xì)胞，方法是用特定的________________________培養(yǎng)基培養(yǎng)，篩選出的D細(xì)胞稱為_(kāi)___________________________________________，常用的培養(yǎng)方法有體外培養(yǎng)和體內(nèi)培養(yǎng)兩種；前者是在________培養(yǎng)基中培養(yǎng)，后者是在________________內(nèi)增殖。 答案　(1)植物組織培養(yǎng)　(2)胚胎　滅活的(仙臺(tái))病毒　(3)效應(yīng)T　骨髓瘤　(4)3　選擇　雜交瘤細(xì)胞　液體　動(dòng)物的腹腔 解析　若A、B是植物細(xì)胞，則D代表雜種植株，若A、B是動(dòng)物細(xì)胞，進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)首先要用胰蛋白酶將器官、組織塊分散成單個(gè)細(xì)胞，選用的材料一般為胚胎、幼齡動(dòng)物的器官或組織，因?yàn)檫@些部位的細(xì)胞代謝旺盛，細(xì)胞分裂能力強(qiáng)；如欲通過(guò)雜交細(xì)胞產(chǎn)生干擾素，類比“單克隆抗體的制備”方法，應(yīng)融合效應(yīng)T細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞；能夠產(chǎn)生單克隆抗體的是雜交瘤細(xì)胞，需用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，經(jīng)抗體專一檢測(cè)后大量克隆，以便進(jìn)行體內(nèi)或體外的單抗生產(chǎn)。 13．下圖表示單克隆抗體制備過(guò)程的各階段圖解，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題： (1)請(qǐng)用箭頭把代表各圖解的字母按單克隆抗體制備過(guò)程的順序連接起來(lái)。 (2)在單克隆抗體制備過(guò)程中選用B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞，是因?yàn)樗鼈內(nèi)诤虾蟮碾s交瘤細(xì)胞具有____________________、____________________的特性。 (3)由圖中可以看出，在單克隆抗體制備過(guò)程中運(yùn)用了________和________的動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)手段。 答案　(1)　(2)可在體外大量繁殖　產(chǎn)生特異性抗體　(3)動(dòng)物細(xì)胞融合　動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 走進(jìn)高考 14．(xx新課標(biāo)卷Ⅰ，40)某研究者用抗原(A)分別免疫3只同種小鼠(X、Y和Z)，每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后測(cè)定各小鼠血清抗體的效價(jià)(能檢測(cè)出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù))，結(jié)果如下圖所示。 若要制備雜交瘤細(xì)胞，需取免疫后小鼠的B淋巴細(xì)胞(染色體數(shù)目為40條)，并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞(染色體數(shù)目為60條)按一定比例加入試管中，再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合，經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測(cè)，得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞。 回答下列問(wèn)題： (1)制備融合所需的B淋巴細(xì)胞時(shí)，所用免疫小鼠的血清抗體效價(jià)需達(dá)到16 000以上，則小鼠最少需要經(jīng)過(guò)________次免疫后才能有符合要求的。達(dá)到要求后的X、Y、Z這3只免疫小鼠中，最適合用于制備B淋巴細(xì)胞的是________小鼠，理由是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (2)細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后，融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外，可能還有__________________________________________________，體系中出現(xiàn)多種類型細(xì)胞的原因________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。 (3)雜交瘤細(xì)胞中有________個(gè)細(xì)胞核，染色體數(shù)目最多是________條。 (4)未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活，原因是________________________________________________________________________。 答案　(1)4　Y　Y小鼠的血清抗體效價(jià)最高 (2)B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞　細(xì)胞融合是隨機(jī)的，且融合率達(dá)不到100% (3)1　100 (4)不能無(wú)限增殖 解析　(1)據(jù)圖分析可知，第四次注射后X、Y、Z小鼠的血清抗體效價(jià)幾乎都達(dá)到16 000以上，小鼠Y的血清抗體效價(jià)最高，最適合用于制備單克隆抗體。(2)融合體系中除了未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞之外，還有骨髓瘤細(xì)胞的自身融合細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的自身融合細(xì)胞。細(xì)胞的融合是隨機(jī)的，并且不可能所有細(xì)胞都融合，故體系中會(huì)出現(xiàn)多種類型的細(xì)胞。(3)動(dòng)物細(xì)胞融合后形成的是具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞。雜交瘤細(xì)胞的細(xì)胞核中的染色體數(shù)目最多為40＋60＝100(條)。(4)正常細(xì)胞的分裂次數(shù)是有限的，且經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞高度分化，不能無(wú)限增殖，而是經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后逐漸衰老死亡。