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1、
第三章 酶的制備及活力測 第四節(jié) 酶的固定化
1.下列關(guān)于固定化酶和一般酶制劑在應(yīng)用效果上的說法,錯誤的是( ?。?
A.固定化酶生物活性強(qiáng),可長久使用
B.一般酶制劑應(yīng)用后和產(chǎn)物混在一起,產(chǎn)物的純度不高
C.一般酶制劑參加反應(yīng)后不能重復(fù)利用
D.固定化酶可以反復(fù)利用,降低生產(chǎn)成本,提高產(chǎn)量和質(zhì)量
2.下列關(guān)于固定化酶技術(shù)說法正確的是( ?。?
A.固定化酶技術(shù)就是固定反應(yīng)物,將酶依附著載體圍繞反應(yīng)物旋轉(zhuǎn)的技術(shù)
B.固定化酶的優(yōu)勢在于能催化一系列的酶促反應(yīng)
C.固定化酶中的酶無法重復(fù)利用
D.固定化酶是將酶固定在一定空間的技術(shù)
3.下列說法中,哪項(xiàng)不是在應(yīng)用酶的過程中常遇
2、見的一些實(shí)際問題?( ?。?
A.酶與反應(yīng)物混合,產(chǎn)品難以提純
B.酶在生物化學(xué)反應(yīng)中往往難以回收
C.酶遇強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、高溫等條件易失活
D.酶作為催化劑,絕大多數(shù)酶是蛋白質(zhì)
4.高果糖漿的生產(chǎn)需要使用葡萄糖異構(gòu)酶,它能將葡萄糖轉(zhuǎn)化成果糖,而不能轉(zhuǎn)化成其他物質(zhì)。這是根據(jù)酶的特性中的( ?。?
A.特異性 B.專一性 C.高效性 D.多樣性
5.下列有關(guān)固定化技術(shù)的敘述,正確的是( ?。?
A.固定化酶只能在細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮作用
B.固定化酶能提高酶的利用率
C.酶的固定是酶分離純化的常用方法
D.固定化酶的固定化方式就是吸附在固體表面上
6.對固定酶的作用影響較小
3、的固定方法是( )
A.包埋法 B.化學(xué)結(jié)合法
C.物理吸附法 D.生物法
7.下列關(guān)于固定化酶中的酶說法正確的是( ?。?
A.固定化酶活性不穩(wěn)定
B.酶被固定在不溶于水的載體上,可反復(fù)利用
C.酶作為催化劑,反應(yīng)前后結(jié)構(gòu)不改變,所以固定化酶可永遠(yuǎn)利用下去
D.固定化酶由于被固定在載體上,所以喪失了酶的高效性和專一性特點(diǎn)
8.下列說法不正確的是( )
A.固定化酶和固定化細(xì)胞的方法包括包埋法、化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法
B.固定化酶更適合采用化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法
C.由于細(xì)胞個體大,而酶分子很小,因此細(xì)胞多采用物理吸附法固定
D.反應(yīng)物是大分子物質(zhì)時應(yīng)
4、采用固定化酶
9.如果反應(yīng)物是大分子物質(zhì),采用下列哪種方法催化受限制( )
A.直接使用酶 B.使用化學(xué)方法結(jié)合的酶
C.使用固定化細(xì)胞 D.使用物理吸附法固定的酶
10.將谷氨酸棒狀桿菌生產(chǎn)谷氨酸的發(fā)酵過程變?yōu)檫B續(xù)的酶反應(yīng),應(yīng)當(dāng)固定( ?。?;若將谷氨酸棒狀桿菌內(nèi)的蛋白質(zhì)變成氨基酸,應(yīng)當(dāng)固定( ?。?
A.谷氨酸棒狀桿菌 蛋白酶
B.谷氨酸棒狀桿菌 谷氨酸棒狀桿菌
C.蛋白酶 蛋白酶
D.蛋白酶 谷氨酸棒狀桿菌
11.研究認(rèn)為,用固定化酶技術(shù)處理污染物是很有前途的,如從大腸桿菌中得到的三酯磷酸酶固定到尼龍膜上制成制劑,可用于降解殘留在土壤中的有機(jī)磷農(nóng)藥,與微生物
5、降解相比,其作用不需要適宜的( ?。?
A.溫度 B.酸堿度 C.水分 D.營養(yǎng)
12.固定化酶和固定化細(xì)胞的主要區(qū)別是( )
A.前者只能固定胞外酶,后者只能固定胞內(nèi)酶
B.前者只能固定胞內(nèi)酶,后者只能固定胞外酶
C.前者可以固定胞內(nèi)酶和胞外酶,后者只可以固定胞內(nèi)酶
D.前者只可以固定胞外酶,后者可以固定胞外酶和胞內(nèi)酶
13.右圖為固定化酶的反應(yīng)柱示意圖,請據(jù)圖回答下面的問題。
(1)與一般酶制劑相比,固定化酶的突出優(yōu)點(diǎn)是__________________________
__________
6、______________________________________;固定化細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)是
________________________________。
(2)③的作用是________________________________________________________。
(3)制作固定化酶所用的方法有______、______、______。
(4)據(jù)圖說出反應(yīng)柱的作用原理。
________________________________________________________________________
__________________
7、______________________________________________________。
14.某同學(xué)進(jìn)行蘋果汁制作實(shí)驗(yàn),工藝如下圖所示。
(1)圖中用KMnO4溶液浸泡蘋果的目的是______。黑曲霉提取液中含有的________可水解果膠,從而使果汁澄清。固定化柱中填充的石英砂通過______方式將酶固定化,酶被固定后用蒸餾水洗滌固定化柱是為了除去__________________。
(2)實(shí)驗(yàn)中,操作流程A和B的先后順序?yàn)開_____。在蘋果汁澄清過程中,應(yīng)關(guān)閉的流速調(diào)節(jié)閥是______。要測定從固定化柱流出的蘋果汁中是否還有果膠,可取一定量的果汁與等量
8、的______混合,如果出現(xiàn)______現(xiàn)象,說明果膠還沒有被完全水解。為使果膠完全水解,應(yīng)將流速調(diào)____。
(3)實(shí)驗(yàn)后,將洗滌過的固定化柱在低溫環(huán)境中保存若干天,該固定化柱仍可用于蘋果汁制作實(shí)驗(yàn),說明固定化酶可被______使用。
15.下面是生啤酒的釀造實(shí)驗(yàn),分析回答問題。
實(shí)驗(yàn)原理:固定化酵母的凝膠珠由酵母細(xì)胞和海藻酸鈉組成,麥芽汁可以滲入由海藻酸鈉和啤酒酵母制成的凝膠珠中。啤酒酵母可以利用自身細(xì)胞內(nèi)的一系列酶,將可發(fā)酵性糖轉(zhuǎn)化成酒精。
實(shí)驗(yàn)過程:
Ⅰ.取新鮮斜面上的啤酒酵母,接種于10 mL麥芽汁液體培養(yǎng)基中,25 ℃培養(yǎng)20~30 h。
Ⅱ.取1.6 g海藻酸鈉于無菌
9、小燒杯中,加無菌水少許調(diào)成糊狀,再加入無菌水至40 mL,在98 kPa條件下滅菌15 min。待冷卻到45 ℃左右后,與預(yù)熱35 ℃左右的10 mL酵母培養(yǎng)液混拌均勻,立即倒入帶噴嘴的無菌小塑料瓶中(或裝有5號針頭的注射外套中),以恒定的速度滴入盛有葡萄糖、氯化鈣混合液的容器中,浸泡30 min制成凝膠珠。
Ⅲ.倒去葡萄糖、氯化鈣混合液,加入無菌水洗滌凝膠珠三次后,將凝膠珠放入500 mL三角瓶中,加入300 mL無菌麥芽汁液體培養(yǎng)基,置于25 ℃下封口發(fā)酵5 d左右,倒出發(fā)酵后的麥芽汁即為啤酒,品嘗其口味。
(1)凝膠珠是由什么組成的?____________________;它們有什
10、么作用?
________________________________________。
(2)如果進(jìn)行多批次生產(chǎn),本實(shí)驗(yàn)中的啤酒酵母與普通發(fā)酵中的酵母菌在使用上的區(qū)別是________________________________________。
(3)固定化酶或固定化細(xì)胞技術(shù)是利用______或______方法將酶或細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù),包括______、______和______。其中酶更適合采用______和______固定化,而細(xì)胞多采用______固定化。
參考答案
1.解析:固定化酶與普通酶制劑相比,在活性上沒有多大差別,固定化酶的成分也是蛋白質(zhì),蛋
11、白質(zhì)經(jīng)過一定的時間后會變性失活,所以固定化酶一般能使用半年,不可能長久使用。
答案:A
2.解析:固定化酶是利用物理或化學(xué)的方法將酶固定在一定空間內(nèi)的技術(shù),其優(yōu)點(diǎn)是酶被固定在一定裝置內(nèi)可重復(fù)利用,不足是無法同時催化一系列酶促反應(yīng)。
答案:D
3.解析:酶的作用條件比較溫和,易受溫度、酸堿度的影響;酶在生物化學(xué)反應(yīng)中與反應(yīng)物、產(chǎn)物混合在一起,很難回收,影響產(chǎn)品質(zhì)量。這些都是酶應(yīng)用過程中常遇見的一些問題。
答案:D
4.解析:葡萄糖異構(gòu)酶將葡萄糖轉(zhuǎn)化成果糖,而不能轉(zhuǎn)化成其他物質(zhì),體現(xiàn)了酶的專一性。
答案:B
5.解析:制成固定化酶的步驟是:酶的生產(chǎn)、提取、酶的分離純化、酶的固定化。
12、制成固定化酶的方法有吸附在固體表面,有將酶相互連接起來,將酶包埋在細(xì)微的網(wǎng)格里等;這樣的固定化酶能重復(fù)利用,從而提高了酶的利用率;而酶在條件適宜時,既可在細(xì)胞內(nèi)起作用,也能在細(xì)胞外起作用,制成的固定化酶,更是主要在細(xì)胞外發(fā)揮作用。
答案:B
6.解析:酶適合用化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法固定,而對酶影響較小的是物理吸附法。
答案:C
7.解析:固定化酶活性穩(wěn)定;固定化酶可反復(fù)利用,但不能永遠(yuǎn)利用下去;固定化酶保持了一般酶的特性。
答案:B
8.解析:在酶和細(xì)胞的固定化技術(shù)中,通常有包埋法、化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法,其中由于酶分子小,又多帶電荷,易從多孔性物質(zhì)中漏出,因此多使用化學(xué)結(jié)合法與物
13、理吸附法,而細(xì)胞個體大,難以被多孔性物質(zhì)吸附或結(jié)合,因而多采用包埋法。
答案:C
9.解析:固定化細(xì)胞被包埋在載體內(nèi)部,大分子物質(zhì)不易通過載體和固定細(xì)胞的細(xì)胞膜,小分子物質(zhì)易于通過。
答案:C
10.解析:谷氨酸棒狀桿菌生產(chǎn)谷氨酸是連續(xù)的酶反應(yīng),應(yīng)固定谷氨酸棒狀桿菌;蛋白質(zhì)變成氨基酸是蛋白酶的作用,應(yīng)固定蛋白酶。
答案:A
11.解析:二者的正?;顒佣夹枰欢ǖ臈l件,如溫度、酸堿度、水分等,但是酶本身是一種大分子物質(zhì),不需要營養(yǎng),而細(xì)胞的生活離不開營養(yǎng)物質(zhì)。
答案:D
12.解析:微生物產(chǎn)生的酶的種類很多,有的存在于細(xì)胞內(nèi),有的分泌到細(xì)胞外。因此,固定化酶可以固定胞內(nèi)酶和胞外酶
14、,固定化細(xì)胞只能固定胞內(nèi)酶。
答案:C
13.解析:與一般的酶制劑相比,固定化酶不僅能與反應(yīng)物充分接觸,還能與產(chǎn)物分離,并且可以反復(fù)利用;與固定化酶相比,固定化細(xì)胞能催化一系列的化學(xué)反應(yīng),并且固定化細(xì)胞成本更低,操作更容易;使用固定化酶技術(shù)往往利用反應(yīng)柱,反應(yīng)柱下端有一個分布著小孔的篩板,酶顆粒無法通過篩板,而反應(yīng)溶液卻可以自由出入。
答案:(1)既能與反應(yīng)物接觸,又能與產(chǎn)物分離,還能被反復(fù)利用 成本更低,操作更容易,且能催化一系列的反應(yīng)
(2)使酶顆粒無法通過,反應(yīng)溶液卻可以自由出入
(3)吸附法 共價鍵結(jié)合法 包埋法
(4)反應(yīng)液從反應(yīng)柱的上端注入,使反應(yīng)物溶液流過反應(yīng)柱,與固
15、定化酶接觸,得到的產(chǎn)物從反應(yīng)柱下端流出
14.解析:在制作工藝中必須對原材料消毒,這樣才能保證后續(xù)實(shí)驗(yàn)的成功。KMnO4是強(qiáng)氧化劑,可以起到對蘋果的消毒作用。
答案:(1)消毒 果膠酶 吸附 未被固定的酶等?。?)AB 閥1 乙醇 渾濁(沉
淀) 慢?。?)重復(fù)
15.解析:本題考查固定化細(xì)胞的應(yīng)用實(shí)例,同時考查分析實(shí)驗(yàn)的能力。凝膠珠是由啤酒酵母和海藻酸鈉組成的,啤酒酵母能產(chǎn)生酶,可以將糖轉(zhuǎn)化成酒精。凝膠珠在較長時間內(nèi)反復(fù)連續(xù)使用,但普通發(fā)酵中的酶或菌種不能反復(fù)使用。固定化酶或固定化細(xì)胞技術(shù)有包埋法、共價鍵結(jié)合法和物理吸附法,酶分子很小,適合采用共價鍵結(jié)合法和物理吸附法固定化;細(xì)胞個大
16、,難以被吸附或結(jié)合,多采用包埋法固定化。
答案:(1)啤酒酵母和海藻酸鈉 啤酒酵母能將滲入凝膠珠的麥芽汁中的糖轉(zhuǎn)化成乙醇,海藻酸鈉可以使啤酒酵母固定 (2)將生啤酒倒出后,將凝膠珠再投入新鮮的麥芽汁中,可以反復(fù)使用?。?)物理 化學(xué) 包埋法 共價鍵結(jié)合法 物理吸附法 共價鍵結(jié)合法 物理吸附法 包埋法
6EDBC3191F2351DD815FF33D4435F3756EDBC3191F2351DD815FF33D4435F3756EDBC3191F2351DD815FF33D4435F3756EDBC3191F2351DD815FF33D4435F3756EDBC3191F2351DD815FF33D4435F3756EDBC3191F2351DD815FF33D4435F375