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1、專題重點專題難點植物組織培養(yǎng)的基本原理產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑影響組織培養(yǎng)的因素影響花藥培養(yǎng)的因素專題 3 3植物的組織培養(yǎng)技術課題 1 菊花的組織培養(yǎng)菊花的組織培養(yǎng)1植物組織培養(yǎng)的概念當植物細胞脫離了原來所在植物體的器官或組織而處于_狀態(tài)時,在一定的營養(yǎng)物質、激素和其他外界條件的作用下,發(fā)育成完整的植株。離體2理論基礎:植物細胞的_。全能性3基本過程:4(1)脫分化:由高度分化的植物組織或細胞產(chǎn)生_組織的過程。愈傷(2)再分化:脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進行培養(yǎng),又重新分化成根或芽等器官的過程。5實驗操作步驟消毒制備 MS 培養(yǎng)基外植體_接種培養(yǎng)移栽栽培脫分化影響植物組織培養(yǎng)的因素植物的種類1材
2、料:_、年齡、保存時間長短等。2營養(yǎng)微量元素維生素(1)無機營養(yǎng):大量元素、_。(2)有機營養(yǎng):甘氨酸、煙酸、_、肌醇以及蔗糖等。生長素3激素:_和細胞分裂素。5.84pH:_左右。5溫度:1822 。6光照:每日光照 12 h。與植物組織培養(yǎng)相關的基礎知識1理論基礎(1)細胞具有全能性:生物體的每一個細胞都含有該物種所特有的全套基因,都有發(fā)育成為完整個體所必需的全部基因。(2)細胞分化:植物的個體發(fā)育過程中,細胞在形態(tài)、結構和生物功能上形成穩(wěn)定性差異的過程。2愈傷組織:原來已經(jīng)分化的細胞,重新分裂,形成沒有組織結構、分裂快、結構疏松、顏色淺而透明、高度液泡化的細胞團稱為愈傷組織。比較內(nèi)容脫分
3、化再分化過程外植體愈傷組織愈傷組織幼苗形成體的特點排列疏松、高度液泡化的薄壁細胞有根、芽需要條件a.離體b適宜的營養(yǎng)c生長素/細胞分裂素比例適中d不需光a.離體b適宜的營養(yǎng)c生長素/細胞分裂素的比例高或低分別誘導生芽或生根d光照3脫分化與再分化的比較成分作用微量元素和大量元素提供植物細胞生活所必需的無機鹽蔗糖提供碳源、維持細胞滲透壓甘氨酸、維生素、煙酸、肌醇滿足離體植物細胞在正常代謝途徑受一定影響后所產(chǎn)生的特殊營養(yǎng)需要菊花組織培養(yǎng)的實驗1實驗操作步驟(1)制備 MS 固體培養(yǎng)基基本過程包括:配制各種母液配制培養(yǎng)基高壓蒸汽滅菌。MS 培養(yǎng)基的成分及各成分作用(2)外植體消毒(3)接種:始終在酒精
4、燈火焰旁進行,對接種工具要用火焰灼燒滅菌。將菊花莖段插入培養(yǎng)基中時注意不要倒插。(4)培養(yǎng)與移栽:在 1822的無菌箱中培養(yǎng),得到試管菌后進行移栽。2實驗操作中應注意的幾個問題(1)材料的選取:菊花的組織培養(yǎng)實驗中,應選擇未開花植株的莖上部新萌生的側枝。(2)外植體消毒:所用消毒劑為體積分數(shù)為 70%的酒精和質量分數(shù)為 0.1%的氯化汞溶液,所使用的清洗液是無菌水。(3)培養(yǎng)過程:在初期,菊花的組織培養(yǎng)需光照。使用順序結果先生長素,后細胞分裂素有利于分裂,但細胞不分化先細胞分裂素,后生長素細胞既分裂也分化同時使用分化頻率提高植物激素對組織培養(yǎng)的影響生長素和細胞分裂素是啟動細胞分裂、脫分化和再分
5、化的關鍵性激素,其作用及特點為:1在生長素存在的情況下,細胞分裂素的作用呈現(xiàn)加強的趨勢。2使用順序不同,結果不同,具體如下:生長素/細胞分裂素比值結果比值高時促進根的分化,抑制芽的形成比值低時促進芽的分化,抑制根的形成比值適中時促進愈傷組織生長3.用量比例不同,結果也不同,具體如下:植物的組織培養(yǎng)技術【例 1】用高度分化的植物細胞、組織或器官進行組織培養(yǎng)可以形成愈傷組織,下列敘述錯誤的是()A該愈傷組織是細胞經(jīng)過脫分化和分裂形成的B該愈傷組織的細胞沒有全能性C該愈傷組織是由排列疏松的薄壁細胞組成的D該愈傷組織可以進行再分化形成叢芽【名師點撥】:植物組織培養(yǎng)過程:離體的植物細胞、組織或器官愈傷組
6、織根、芽植物體。離體的植物細胞、組織或器官分裂形成愈傷組織,這一過程叫脫分化,脫分化離不開細胞分裂。愈傷組織的細胞排列疏松而無規(guī)則,是一種高度液泡化的無定形狀態(tài)的薄壁細胞。愈傷組織經(jīng)過再分化形成叢芽,最后可培養(yǎng)成完整的植物體,這反映了愈傷組織的細胞具有全能性。從離體的植物細胞、組織或器官形成愈傷組織,雖然新個體還沒有長出來,但是全能性依然存在?!敬鸢浮浚築【配對練習 1】下列屬于組織培養(yǎng)的是()A菊花花瓣培養(yǎng)成植株B芽發(fā)育成枝條C根尖分生區(qū)發(fā)育成成熟區(qū)D受精卵發(fā)育成植株解析:B、C、D 選項都屬于植物正常的生長發(fā)育過程。答案:A影響植物組織培養(yǎng)的因素【例 2】某同學在進行植物組織培養(yǎng)過程中,發(fā)
7、現(xiàn)組織只形成愈傷組織,而不能分化形成胚芽、胚根,可能的原因是()A缺少光照B培養(yǎng)時間不夠C營養(yǎng)物質太多D細胞分裂素與生長素的比例不合適【名師點撥】:生長素與細胞分裂素的比例對植物組織分化方向有很大影響。生長素與細胞分裂素比值高時,促進根的分化,抑制芽的形成;比值低時,促進芽的分化,抑制根的形成。由于這些外植體已經(jīng)分裂形成愈傷組織,因此不會是營養(yǎng)物質、溫度、pH 等因素影響,而當生長素與細胞分裂素比值適中時,才促進愈傷組織再分化?!敬鸢浮浚篋【配對練習 2】愈傷組織是生根還是生芽均與細胞分裂素同生長素的比例有關。有利于誘導根的分化時,細胞分裂素/生)長素的比值(A低C高B相等D不確定解析:利于誘導根的分化時,生長素/細胞分裂素的比值要高,即細胞分裂素/生長素的比值應該為低。答案:A