生物《DNA的粗提取與鑒定》教案(新人教版選修1)高二

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1、DNA的粗提取與鑒定 教學(xué)目標(biāo)： 1、知識(shí)與能力目標(biāo) 理解DNA勺理化特性及根據(jù)其理化特性而提取和鑒定的原理，初步掌握DNA勺粗提取和鑒定 方法，理解相關(guān)溶液的作用機(jī)理，培養(yǎng)學(xué)生的分析能力，通過(guò)實(shí)驗(yàn)使學(xué)生能夠簡(jiǎn)述科學(xué)探究 的基本過(guò)程。 2、情感態(tài)度與價(jià)值目標(biāo) 通過(guò)探索培養(yǎng)科學(xué)的懷疑精神和創(chuàng)新精神；通過(guò)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，學(xué)生樹立生命物質(zhì)性的觀點(diǎn)。 教學(xué)重點(diǎn)：提取DNA勺相關(guān)原理和步驟 教學(xué)難點(diǎn)：提取DNA勺相關(guān)原理和步驟 教學(xué)過(guò)程： 開門見山： 講解本實(shí)驗(yàn)的目的是提取 DN解口 DNA勺鑒定，其中提取 DNA是本實(shí)驗(yàn)的重點(diǎn)和難點(diǎn)。 提出問(wèn)題：“ DNAfe要存在于什么結(jié)構(gòu)上？ ”

2、 “如何提取DNA ” “選什么材料好？” 達(dá)成共識(shí)： 1、造適宜材料：選動(dòng)物細(xì)胞，易打破細(xì)胞結(jié)構(gòu) 2、破壞細(xì)胞膜、核膜結(jié)構(gòu)，得核物質(zhì)。 3、將DNAW蛋白質(zhì)等物質(zhì)分開，得 DNA 4、去掉 DNA中雜質(zhì)，提純 DNA 探究實(shí)驗(yàn)原理： 屏幕展示表格1 NaCl2mo1/L NaC10.14mo1/L NaC10.015mo1/L DNA 蛋白質(zhì) 表格2 DNA 蛋白質(zhì) 雜質(zhì) 95%酉精 不同濃度的NaC1溶液可溶解或析出 DNA 95%g精可提取 DNA 填表1 : NaCl2mo1/L

3、NaC10.4mo1/L NaC10.015mo1/L DNA 取大 最小 變大 蛋白質(zhì) 解聚 取大 變小 填表2: DNA 蛋白質(zhì) 雜質(zhì) 95%酉精 不溶 可溶 可溶 通過(guò)對(duì)實(shí)驗(yàn)原理的預(yù)習(xí)，表格的比較，使學(xué),生明確了各溶液的用途，保證理解實(shí)驗(yàn)。 請(qǐng)學(xué)生代表簡(jiǎn)述DN砥取實(shí)驗(yàn)步驟 投影展示實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路： 雞血細(xì)胞液①aDNA釋放②bDNAf蛋白質(zhì)的分離 ③cDN麗出④dDNAfet （提純） 獲得雞血細(xì)胞核物質(zhì)：提核物質(zhì)一溶解一析出一溶解一析出 實(shí)驗(yàn)步驟： 方法步驟 加入物質(zhì) 目的 1.制備雞血細(xì)胞 檸檬酸衲溶液 ① 2

4、.提取雞血細(xì)胞的細(xì)胞核物 質(zhì) 20 mL蒸圈水 ② 3,溶解細(xì)胞核內(nèi)的DNA 2 mol/L 的 NaCl 溶液 40 mL ③ 4.析出含DNA的黏稠物 蒸僵水 5,港取含DNA的黏稠物 _ .-~ ⑤ 亂將DNA的黏稠物再溶解 2 moVL 的 NaCl 溶液 2D mL 7,過(guò)港含DNA的NaCl溶液 亂提取含有雜質(zhì)較少的DNA 冷卻的95%的酒精50 mL 工DNA的鑒定 A（1）向試管中加入0,015 mul/L的 溶液5 mL C2）加入DNA C3）加入4 mL二基胺試劑 B； （1）向前管中加入0.015 mol/L

5、的NaCl 溶液5 mL （2）加入4 mL二年胺試劑 引導(dǎo)學(xué)生討論、回憶并回答目的① 逆。 ①防止血凝。 ②加速血細(xì)胞破裂。 ③溶解DNA ④使2 mol/L的NaCl溶液稀釋至 0.14 mol/L，促DNAt大限度地析出。 ⑤使含DNA的黏稠物被留在紗布上。 ⑥使含DNA的黏稠物盡可能多地溶于溶液中。 ⑦除去含DNA的濾液中的雜質(zhì)。 ⑧提取DNA ⑨A:出現(xiàn)藍(lán)色。B:無(wú)變化 討論與結(jié)論： 投影給出如下討論提綱，供學(xué)生討論。 （1） DNA?提取過(guò)程中的關(guān)鍵是哪幾步？ （2）提取雞血中的DNA寸，為什么要除去血液中的上清液？ （3）

6、DNA勺直徑約為2 nm,實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的絲狀物的粗細(xì)是否表示一個(gè)DN冊(cè)子直徑的大??？ 學(xué)生分組進(jìn)行討論并發(fā)表討論結(jié)果。教師對(duì)討論進(jìn)行全程指導(dǎo)，并與學(xué)生一起歸納總結(jié)。 （1） a.提取雞血細(xì)胞的核物質(zhì)。應(yīng)用低滲原理和機(jī)械攪拌，可得到最大量的DNA b.析出DNAa稠物。加蒸儲(chǔ)水要慢，攪拌要輕。 c.沉淀DNAM,必須用冷酒精。 （2）提取DNA去除雜質(zhì)是關(guān)鍵。由于上清液是血液中的血漿部分，不含DNA所以要除去 （含蛋白質(zhì)）。 （3）實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的絲狀物是肉眼可以觀察到的，這種絲狀物的直徑要比DNA分子的直徑2 nm 大許多倍，所以實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的絲狀物并不表示一個(gè)DN冊(cè)子 的直徑。 實(shí)

7、驗(yàn)結(jié)論：細(xì)胞中有 DNA DNAM二苯胺試劑在沸水浴中變藍(lán)色。 教學(xué)目標(biāo)鞏固 1 .實(shí)驗(yàn)中步驟1和步驟3都需要加入蒸儲(chǔ)水，兩次加入的作用相同嗎？為什么？ 2 .實(shí)驗(yàn)中NaCl的物質(zhì)的量濃度為 2 mol/L和0.14 mol/L 對(duì)DNAW■何影響？ 3 . DNAM二苯胺（沸水?。?huì)染成 A .磚紅色 B.橘黃色 C.紫色D .藍(lán)色 補(bǔ)充知識(shí)： 1、鑒定DNA勺其他方法 用紫外燈照射法鑒定 DN?果很好。具體鑒定方法如下。 1 .配制染色劑。用蒸儲(chǔ)水配制萬(wàn)分之五的澳化乙錠（EB）溶液。 2 .將玻璃棒上纏繞的白色絮狀物抹于蠟紙上，再滴一滴EB溶液染色。 3 .將蠟紙放在紫

8、外燈（260 nm）下照射（暗室中），可見橙紅色的螢光（DNA的紫外吸收高峰 在 280 nm 處）。 2、DNA粗提取與鑒定的另一種 方法 1 .材料用具 新鮮菜花（或蒜黃、菠菜）。 塑料燒杯，量筒，玻璃棒，尼龍紗布，陶瓷研缽，試管，試管架，試管夾，漏斗，酒精燈， 石棉網(wǎng)，三角架，火柴，刀片，天平。 研磨液，體積分?jǐn)?shù)為 95%勺酒精溶液，二苯胺試劑，蒸儲(chǔ)水。 2 .方法步驟 A. DNA勺粗提取 (1)準(zhǔn)備材料：將 新鮮菜花和體積分?jǐn)?shù)為 95%勺酒精溶液放入冰存f冷凍室，至少 24小時(shí)。 (2)取材：稱取30 g菜花，去梗取花，切碎。 (3)研磨：將碎菜花放入研缽中，倒

9、入10 mL研磨液，充分研磨 10 min。 (4)過(guò)濾：在漏斗中墊上尼龍紗布，將菜花研磨液濾入燒杯中(有條件的學(xué)?？蓪V液倒入 塑料離心管中進(jìn)行離心，用1000 r/min 的旋轉(zhuǎn)頻率，離心 2~5 min;取上清液放入燒杯.中)。 在4c冰箱中放置 幾分鐘后，再取上清液。 (5)加冷酒精：將一倍體積的上清液倒入兩倍體積的體積分?jǐn)?shù)為95%勺酒精溶液中，并且玻 璃棒緩緩地輕輕攪拌溶液(玻璃棒不要直插燒杯底部)。沉淀3~5 min后，可見白色的 DNA絮 狀物出現(xiàn)。用玻璃棒緩緩 旋轉(zhuǎn)，絮狀物會(huì)纏在玻璃棒上。 B. DNA勺鑒定 (1)配制二苯胺試劑：取 0.1 mL B液；滴入到10 mL A液中，混勻。 (2)鑒定：取4 mLDN碾取液放入試管中，加入 4 mL二苯胺試劑，混勻后觀察溶液顏色(不 變藍(lán))。用沸水浴(100C)加熱10 min。在加熱過(guò)程中，隨時(shí)注意試管中溶液顏色的變化(逐 漸出現(xiàn)淺藍(lán)色)。 結(jié)課：這節(jié)課咱們驗(yàn)證了細(xì)胞是由化合物按照一定的方式組成的這一結(jié)論。從知識(shí)結(jié)構(gòu)角度 來(lái)說(shuō)，一要加深對(duì)生物的物質(zhì)性理解；二要掌握一般的物質(zhì)提取方法；三要注意不同的化學(xué) 物質(zhì)要用不同的原理鑒定。從實(shí)驗(yàn)過(guò)程角度來(lái)說(shuō)，要理解各種溶液和試劑的作用和目的。