實(shí)驗(yàn)-影響酶促反應(yīng)速度的因素
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實(shí)驗(yàn) 影響酶促反應(yīng)速度的因素 1、 實(shí)驗(yàn)?zāi)康? 通過本實(shí)驗(yàn)了解溫度、PH、激活劑、抑制劑對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響。 2、 實(shí)驗(yàn)原理 唾液淀粉酶催化淀粉水解生成各種糊精和麥芽糖。淀粉溶液與碘反應(yīng)呈藍(lán)色;糊精根據(jù)分子大小,與碘反應(yīng)分別呈藍(lán)、紫、紅、無色等不同的顏色;麥芽糖不與碘呈色。唾液淀粉酶的活性受溫度、酸堿度、抑制劑與激活劑等的影響。 溫度:溫度降低,酶促反應(yīng)減弱或停止;溫度升高,反應(yīng)速度加快。當(dāng)上升至某一溫度時(shí),酶促反應(yīng)速度達(dá)最大值,此溫度稱為酶的最適溫度。由于酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì),溫度過高會(huì)導(dǎo)致蛋白質(zhì)構(gòu)象的改變,因此如果溫度繼續(xù)升高,反應(yīng)速度反而會(huì)迅速下降甚至完全喪失。 酸堿度:唾液淀粉酶最適pH為pH6.9,高于或低于酶的最適pH值,都將引起酶活性的降低,過酸或過堿的反應(yīng)條件可使酶活性喪失。 抑制劑與激活劑:酶的活性常受某些物質(zhì)的影響,能增加酶的活性稱為酶的激活劑:降低酶活性且不使酶蛋白變性的稱為酶的抑制劑。如Cl-為唾液淀粉酶的激活劑,Cu2+為唾液淀粉酶的抑制劑。 根據(jù)上述性質(zhì),可以用碘檢查淀粉是否水解及其水解程度,間接判斷唾液淀粉酶是否存在及其活性大小。 三、試劑及器材 1.試劑: 1%淀粉溶液,1%氯化鈉溶液,1%硫酸銅溶液,1%硫酸鈉溶液,碘液,磷酸氫二鈉(0.2mmol/L), 檸檬酸溶液(0.1mmol/L)。 2.器材: 試管,試管夾,恒溫水浴鍋(37℃),吸管,滴管,試管架。 四、實(shí)驗(yàn)操作: 1.收集唾液:實(shí)驗(yàn)者先將痰咳盡, 用自來水漱口, 清除口腔內(nèi)食物殘?jiān)? 再含蒸餾水約15 mL, 作咀嚼咕漱運(yùn)動(dòng), 3min后吐入小燒杯中備用。 2.觀察溫度對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響 取試管3支,編號(hào)1,2,3,按下表操作: 試劑(ml) 1 2 3 唾液 1 1 1 1%淀粉 2 2 2 水浴5min 100℃(冷卻) 37℃ 0℃ 碘液 1滴(冷卻) 1滴 1滴 現(xiàn)象 3. 觀察pH對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響 (1)配制一系列pH不等的緩沖液。 試劑(ml) 1 2 3 0.2mmol/L磷酸氫二鈉 5.15 7.72 9.72 0.1mmol/L檸檬酸 4.85 2.28 0.28 pH 5.00 6.80 8.00 (2)取試管3支,編號(hào)1,2,3,按下表操作: 試劑(ml) 1 2 3 唾液 2 2 2 緩沖液 3(pH5.00) 3(pH6.80) 3(pH8.00) 1%淀粉 2 2 2 37℃水浴10min 碘液 1滴 1滴 1滴 現(xiàn)象 4觀察激活劑和抑制劑對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響 取試管4支,編號(hào)1,2,3,4,按下表操作: 試劑 滴 1 2 3 4 1%淀粉 20 20 20 20 唾液 10 10 10 10 蒸餾水 6 — — — 1%氯化鈉 — 6 — — 1%硫酸銅 — — 6 — 1%硫酸鈉 — — — 6 37℃水浴5—10min 碘液 1滴 1滴 1滴 1滴 現(xiàn)象 5、 實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析 6、 思考題 影響酶促反應(yīng)速度的因素有哪些?它們?nèi)绾斡绊懨傅幕钚裕?- 1.請(qǐng)仔細(xì)閱讀文檔,確保文檔完整性,對(duì)于不預(yù)覽、不比對(duì)內(nèi)容而直接下載帶來的問題本站不予受理。
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