2019年高考生物二輪復(fù)習(xí) 第1部分 專(zhuān)題突破 第15講 生物技術(shù)實(shí)踐課件.ppt

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二輪專(zhuān)題突破 第一部分 專(zhuān)題八生物技術(shù)實(shí)踐 第15講生物技術(shù)實(shí)踐 1 微生物的分離和培養(yǎng)2 某種微生物數(shù)量的測(cè)定3 培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用4 利用微生物發(fā)酵來(lái)生產(chǎn)特定的產(chǎn)物5 運(yùn)用發(fā)酵加工食品的基本方法6 微生物在其他方面的應(yīng)用7 從生物材料中提取某些特定的成分 欄 目 導(dǎo) 航 水 碳源 氮源 無(wú)機(jī)鹽 滅菌 尿素 稀釋涂布平板 剛果紅 酵母菌 乳酸菌 萃取 1 倒平板時(shí) 應(yīng)將打開(kāi)的皿蓋放到一邊 以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上 2 消毒的原則是既殺死材料表面的微生物 又減少消毒劑對(duì)細(xì)胞的傷害 3 用稀釋涂布平板法純化大腸桿菌時(shí) 只要稀釋度足夠高 就能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落 4 對(duì)細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)只能采用稀釋涂布平板法 而不能用平板劃線(xiàn)法 5 醋酸菌在無(wú)氧條件下利用乙醇產(chǎn)生醋酸 6 酵母菌是嗜溫菌 所以果酒發(fā)酵所需的最適溫度高于果醋發(fā)酵溫度 7 將長(zhǎng)滿(mǎn)毛霉的豆腐裝瓶腌制時(shí) 底層和近瓶口處需加大用鹽量 8 提煉玫瑰精油的玫瑰花應(yīng)在花開(kāi)的初期采收 因?yàn)榇穗A段的花含玫瑰精油最高 9 油水混合物中加入無(wú)水硫酸鈉 有利于分離油層 10 萃取是利用了芳香油易溶于有機(jī)溶劑的特性進(jìn)行提取的一種方法 1 利用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)為什么往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低 提示 是因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí) 平板上觀察到的只是一個(gè)菌落 統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般用菌落數(shù)而不是用活菌數(shù)來(lái)表示 2 怎樣準(zhǔn)確鑒定某種細(xì)菌能夠分解尿素 提示 在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑 如果pH升高 指示劑將變紅 3 說(shuō)出利用水蒸氣蒸餾法提取植物芳香油的原理 提示 利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶出來(lái) 形成油水混合物 冷卻后 混合物又會(huì)重新分出油層和水層 1 2018 全國(guó) T37 在生產(chǎn) 生活和科研實(shí)踐中 經(jīng)常通過(guò)消毒和滅菌來(lái)避免雜菌的污染 回答下列問(wèn)題 1 在實(shí)驗(yàn)室中 玻璃和金屬材質(zhì)的實(shí)驗(yàn)器具 填 可以 或 不可以 放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌 2 牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時(shí)消毒法 與煮沸消毒法相比 這兩種方法的優(yōu)點(diǎn)是 可以 在達(dá)到消毒目的的同時(shí) 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)損失較少 3 密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線(xiàn)照射消毒 其原因是紫外線(xiàn)能 在照射前 適量噴灑 可強(qiáng)化消毒效果 4 水廠供應(yīng)的自來(lái)水通常是經(jīng)過(guò) 填 氯氣 乙醇 或 高錳酸鉀 消毒的 5 某同學(xué)在使用高壓蒸汽滅菌鍋時(shí) 若壓力達(dá)到設(shè)定要求 而鍋內(nèi)并沒(méi)有達(dá)到相應(yīng)溫度 最可能的原因是 破壞DNA 結(jié)構(gòu) 消毒液 氯氣 未將鍋內(nèi)冷空氣排盡 解析 1 能耐高溫的 需要保持干燥的物品 如玻璃器皿 吸管 培養(yǎng)皿 和金屬用具等可以放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌 2 煮沸消毒法即在100 煮沸5 6min可以殺死微生物細(xì)胞和一部分芽孢 巴氏消毒法即在70 75 煮30min或在80 煮15min 可以殺死微生物 并且保證營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不被破壞 因此 與煮沸消毒法相比 牛奶消毒常采用的巴氏消毒法或高溫瞬時(shí)消毒法的優(yōu)點(diǎn)是在達(dá)到消毒目的的同時(shí) 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)損失較少 3 因紫外線(xiàn)能破壞DNA結(jié)構(gòu) 所以密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線(xiàn)照射消毒 在照射前 適量噴灑消毒液 可強(qiáng)化消毒效果 4 通常乙醇消毒是75 的酒精 有氣味 影響水質(zhì) 不適宜消毒自來(lái)水 高錳酸鉀本身有顏色 消毒后溶液呈紫紅色 無(wú)法使用 因此水廠供應(yīng)的自來(lái)水通常是經(jīng)過(guò)氯氣消毒的 5 采用高壓蒸汽滅菌時(shí) 鍋內(nèi)的水加熱煮沸 將其中原有的冷空氣徹底排除后才能將鍋密閉 如果未將鍋內(nèi)冷空氣排盡 則會(huì)出現(xiàn)壓力達(dá)到設(shè)定要求 而鍋內(nèi)并沒(méi)有達(dá)到相應(yīng)溫度的現(xiàn)象 2 2018 全國(guó) T37 將馬鈴薯去皮切塊 加水煮沸一定時(shí)間 過(guò)濾得到馬鈴薯浸出液 在馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂 用水定容后滅菌 得到M培養(yǎng)基 回答下列問(wèn)題 1 M培養(yǎng)基若用于真菌的篩選 則培養(yǎng)基中應(yīng)加入鏈霉素以抑制 的生長(zhǎng) 加入了鏈霉素的培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基 2 M培養(yǎng)基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長(zhǎng)提供了多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)類(lèi)型除氮源外還有 答出兩點(diǎn)即可 氮源進(jìn)入細(xì)胞后 可參與合成的生物大分子有 答出兩點(diǎn)即可 細(xì)菌 選擇 碳源 無(wú)機(jī)鹽 蛋白質(zhì) 核酸 3 若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖 接種土壤濾液并培養(yǎng) 平板上長(zhǎng)出菌落后可通過(guò)加入顯色劑篩選出能產(chǎn)淀粉酶的微生物 加入的顯色劑是 該方法能篩選出產(chǎn)淀粉酶微生物的原理是 4 甲 乙兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測(cè)定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量 在同一稀釋倍數(shù)下得到以下結(jié)果 甲同學(xué)涂布了3個(gè)平板 統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是110 140和149 取平均值133 乙同學(xué)涂布了3個(gè)平板 統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是27 169和176 取平均值124 有人認(rèn)為這兩位同學(xué)的結(jié)果中 乙同學(xué)的結(jié)果可信度低 其原因是 碘液 淀粉遇碘液顯藍(lán)色 產(chǎn)淀粉酶的菌落周?chē)矸郾凰?形成透明圈 乙同學(xué)的結(jié)果中 1個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另2個(gè)相差懸殊 結(jié)果的重復(fù)性差 解析 1 M培養(yǎng)基若用于真菌的篩選 說(shuō)明M培養(yǎng)基能滿(mǎn)足真菌的生長(zhǎng) 而能抑制其它微生物的生長(zhǎng) 鏈霉素是一種抗生素 可以抑制細(xì)菌的生長(zhǎng) 加入了鏈霉素的培養(yǎng)基能篩選出真菌 該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基 2 微生物生長(zhǎng)需要多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)除氮源外 還需要碳源 無(wú)機(jī)鹽 水以及特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)等 氮元素是蛋白質(zhì)和核酸等生物大分子的組成元素 因此氮源進(jìn)入細(xì)胞后 可參與合成的生物大分子有蛋白質(zhì)和核酸 3 淀粉遇碘液會(huì)變成藍(lán)色 篩選產(chǎn)淀粉酶的微生物 依據(jù)淀粉遇碘液顯藍(lán)色 產(chǎn)淀粉酶的菌落周?chē)矸郾凰?形成透明圈 再根據(jù)透明圈 來(lái)篩選產(chǎn)淀粉酶的微生物 4 乙同學(xué)結(jié)果不合理 因?yàn)?個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另2個(gè)相差懸殊 結(jié)果的重復(fù)性差 不能簡(jiǎn)單的用其平均數(shù)作為最終結(jié)果 3 2014 全國(guó) T39 為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況 某研究小組測(cè)定了該河流水樣中的細(xì)菌含量 并進(jìn)行了細(xì)菌分離等工作 回答下列問(wèn)題 1 該小組采用稀釋涂布平板法檢測(cè)水樣中細(xì)菌含量 在涂布接種前 隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間 這樣做的目的是 然后 將1mL水樣稀釋100倍 在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0 1mL稀釋液 經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后 3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為39 38和37 據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為 2 該小組采用平板劃線(xiàn)法分離水樣中的細(xì)菌 操作時(shí) 接種環(huán)通過(guò) 滅菌 在第二次及以后的劃線(xiàn)時(shí) 總是從上一次劃線(xiàn)的末端開(kāi)始劃線(xiàn) 這樣做的目的是 檢測(cè)培養(yǎng)基平板 無(wú)菌是否合格 3 8 107 灼燒 將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落 3 示意圖A和B中 表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果 4 該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻 一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng) 另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng) 結(jié)果發(fā)現(xiàn) 振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快 分析其原因是 振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中 的含量 同時(shí)可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸 提高 的利用率 B 溶解氧 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 解析 1 為了確定培養(yǎng)基的滅菌是否合格 通過(guò)隨機(jī)取若干滅菌后的空平板培養(yǎng)一段時(shí)間 觀察培養(yǎng)基上是否有菌落生成 用來(lái)進(jìn)行對(duì)照 三個(gè)培養(yǎng)基上平均數(shù)為38 所以每升水樣中活菌數(shù)為38 10 100 1000 3 8 107 2 接種環(huán)用灼燒進(jìn)行滅菌 在第二次及以后劃線(xiàn)時(shí) 總是從上一次的末端開(kāi)始劃線(xiàn) 這樣做的目的是 通過(guò)劃線(xiàn)次數(shù)的增加 使每次劃線(xiàn)時(shí)菌體的數(shù)目逐漸減少 以便得到菌落 3 A是平板劃線(xiàn)法 B是稀釋涂布平板法 4 振蕩培養(yǎng)可以增加液體培養(yǎng)基的氧氣含量 促進(jìn)好氧型微生物的生長(zhǎng) 同時(shí)還能使菌體與培養(yǎng)液充分接觸 提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率 4 2017 全國(guó) T37 某些土壤細(xì)菌可將尿素分解成CO2和NH3 供植物吸收和利用 回答下列問(wèn)題 1 有些細(xì)菌能分解尿素 有些細(xì)菌則不能 原因是前者能產(chǎn)生 能分解尿素的細(xì)菌不能以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源 原因是 但可用葡萄糖作為碳源 進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是 答出兩點(diǎn)即可 脲酶 分解尿素的細(xì)菌是異養(yǎng)型生物 不能利用CO2來(lái)合成有機(jī)物 為細(xì)胞生物生命活動(dòng)提供能量 為其他有機(jī)物的合成提供原料 2 為了篩選可分解尿素的細(xì)菌 在配制培養(yǎng)基時(shí) 應(yīng)選擇 填 尿素 NH4NO3 或 尿素 NH4NO3 作為氮源 不選擇其他兩組的原因是 3 用來(lái)篩選分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4 其作用有 答出兩點(diǎn)即可 尿素 其他兩組都含有NH4NO3 能分解尿素的細(xì)菌和不能分解尿素的細(xì)菌都能利用NH4NO3 不能起到篩選作用 為細(xì)菌生長(zhǎng)提供無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng) 作為緩沖劑保持細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中pH穩(wěn)定 解析 1 細(xì)菌分解尿素是由于細(xì)菌體內(nèi)合成脲酶的結(jié)果 尿素是有機(jī)物 分解尿素的細(xì)菌是分解者 而不是生產(chǎn)者 只能生產(chǎn)者才能利用CO2作為碳源合成有機(jī)物 葡萄糖通常既作為碳源 也可作為能源 作為碳源可轉(zhuǎn)變成其它有機(jī)物 2 篩選分解尿素的細(xì)菌 通常只能用尿素作為唯一氮源 對(duì)于 NH4NO3 或 尿素 NH4NO3 均含有無(wú)機(jī)氮源 3 KH2PO4和Na2HPO4為微生物培養(yǎng)可提供P元素和無(wú)機(jī)鹽離子如鉀離子和鈉離子 5 2014 全國(guó) T39 植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解 回答下列問(wèn)題 1 分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶 該酶是由3種組分組成的復(fù)合酶 其中葡萄糖苷酶可將 分解成 2 在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅 CR 時(shí) CR可與纖維素形成 色復(fù)合物 用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時(shí) 培養(yǎng)基上會(huì)出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的 纖維二糖 葡萄糖 紅 透明圈 3 為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落 某同學(xué)設(shè)計(jì)了甲 乙兩種培養(yǎng) 成分見(jiàn)下表 據(jù)表判斷 培養(yǎng)基甲 填 能 或 不能 用于分離和鑒別纖維素分解菌 原因是 培養(yǎng)基乙 填 能 或 不能 用于分離和鑒別纖維素分解菌 原因是 不能 液體培養(yǎng)基不能用于分離單菌落 不能 培養(yǎng)基中沒(méi)有纖維素 不會(huì)形成CR 纖維素紅色復(fù)合物 即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌 解析 1 葡萄糖苷酶可將纖維二糖分解成葡萄糖 2 剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物 當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后 紅色復(fù)合物無(wú)法形成 出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈 可以通過(guò)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌 3 纖維素分解菌分離和鑒別培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基 而培養(yǎng)基甲中沒(méi)有瓊脂 是液體培養(yǎng)基 要分離和鑒別纖維素分解菌 需要以纖維素為主要碳源的培養(yǎng)基 培養(yǎng)基乙不具有選擇的作用 6 2016 全國(guó) T39 某同學(xué)用新鮮的泡菜濾液為實(shí)驗(yàn)材料分離純化乳酸菌 分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明 乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣 回答下列問(wèn)題 1 分離純化乳酸菌時(shí) 首先需要用 對(duì)泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋 進(jìn)行梯度稀釋的理由是 2 推測(cè)在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有 和 分離純化時(shí)應(yīng)挑選出 的菌落作為候選菌 3 乳酸菌在 20 長(zhǎng)期保存時(shí) 菌液中常需要加入一定量的 填 蒸餾水 甘油 或 碳酸鈣 無(wú)菌水 泡菜濾液中菌的濃度高 直接培養(yǎng)很難分離得到單菌落 鑒別乳酸菌 中和產(chǎn)生的乳酸 具有透明圈 甘油 解析 1 分離純化乳酸菌時(shí) 首先需要用無(wú)菌水對(duì)泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋 進(jìn)行梯度稀釋的理由是在稀釋度足夠高的菌液里 聚集在一起的乳酸菌將被分散成單個(gè)細(xì)胞 從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落 若直接培養(yǎng) 由于泡菜濾液中菌的濃度高 則很難分離得到單菌落 2 由題意可知 分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明 乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣 由此可推測(cè)在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有中和乳酸菌代謝過(guò)程中產(chǎn)生的乳酸和鑒別能產(chǎn)生乳酸的乳酸菌 根據(jù)產(chǎn)酸菌在含CaCO3的培養(yǎng)基上產(chǎn)生透明圈的原理 分離純化時(shí)應(yīng)挑選出具有透明圈的菌落作為候選菌 然后用平板劃線(xiàn)法進(jìn)一步分離純化 3 對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種 可以采用甘油管藏的方法 即將1mL培養(yǎng)的菌種轉(zhuǎn)移到已滅菌的盛有1mL甘油的甘油瓶中 與甘油充分混勻后 放在 20 的冷凍箱中保存 所以乳酸菌在 20 長(zhǎng)期保存時(shí) 菌液中常需要加入一定量的甘油 7 2015 全國(guó) T39 已知微生物A可以產(chǎn)生油脂 微生物B可以產(chǎn)生脂肪酶 脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生產(chǎn) 回答有關(guān)問(wèn)題 1 顯微觀察時(shí) 微生物A菌體中的油脂通?？捎糜?染色 微生物A產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā) 可選用 填 萃取法 或 水蒸氣蒸餾法 從菌體中提取 2 為了從自然界中獲得能產(chǎn)生脂肪酶的微生物B的單菌落 可從含有油料作物種子腐爛物的土壤中取樣 并應(yīng)選用以 為碳源的固體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng) 蘇丹 或者蘇丹 萃取法 油脂 3 若要測(cè)定培養(yǎng)液中微生物B的菌體數(shù) 可在顯微鏡下用 直接計(jì)數(shù) 若要測(cè)定其活菌數(shù)量 可選用 法進(jìn)行計(jì)數(shù) 4 為了確定微生物B產(chǎn)生的脂肪酶的最適溫度 某同學(xué)測(cè)得相同時(shí)間內(nèi) 在35 40 45 溫度下降解10g油脂所需酶量依次為4mg 1mg 6mg 則上述三個(gè)溫度中 條件下該酶活力最小 為了進(jìn)一步確定該酶的最適溫度 應(yīng)圍繞 設(shè)計(jì)后續(xù)實(shí)驗(yàn) 血細(xì)胞計(jì)數(shù)板 稀釋涂布平板 45 40 解析 1 油脂可被蘇丹 染液 或蘇丹 染液染成橘黃色 或紅色 由于微生物A產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā) 故采用萃取法 2 能產(chǎn)生脂肪酶的微生物B可以分解脂肪 故可以以脂肪為碳源的固體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng) 不產(chǎn)生脂肪酶的微生物無(wú)法生存 3 微生物B的菌體數(shù) 可在顯微鏡下用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板直接計(jì)數(shù) 活菌用稀釋涂布平板法 只有活的菌體才能形成菌落 4 45 降解10g油脂所需酶量最大 故酶活性最小 40 溫度下 降解10g油脂所需酶量最小 故酶活性最大 由此可知要想探究該酶的最適溫度需要圍繞40 溫度設(shè)置溫度梯度進(jìn)行實(shí)驗(yàn) 考點(diǎn)一微生物的應(yīng)用 1 微生物純化培養(yǎng)的方法比較 1 平板劃線(xiàn)操作 2 稀釋涂布平板操作 先將菌液進(jìn)行一系列梯度稀釋后涂布平板 在稀釋度足夠高的菌液里 聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞 從而在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落 如圖所示 1 為了確定培養(yǎng)基的滅菌是否合格 微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)一般會(huì)設(shè)置空白對(duì)照 隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板培養(yǎng)基在適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間 觀察培養(yǎng)基上是否有菌落生成 2 觀察菌落需用固體培養(yǎng)基 因此培養(yǎng)基要添加瓊脂 3 倒平板的溫度一般在50 左右適宜 溫度過(guò)高會(huì)燙手 溫度過(guò)低培養(yǎng)基又會(huì)凝固 4 平板需倒置 這樣既可使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā) 又防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基 造成培養(yǎng)基污染 5 平板劃線(xiàn)法只適用于微生物的提純 不適合進(jìn)行計(jì)數(shù) 并且在最后一次劃線(xiàn)的末端處的菌種最純 6 利用平板菌落計(jì)數(shù)法的計(jì)算公式估算水樣中的活菌數(shù) C V M 稀釋倍數(shù) 7 菌種用甘油管藏法長(zhǎng)期保存 保存時(shí)菌液中常添加一定量的甘油 2 把握微生物分離與計(jì)數(shù)的兩個(gè)實(shí)例 1 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù) 篩選菌株 利用選擇培養(yǎng)基篩選菌株 測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法 活菌計(jì)數(shù)法和顯微鏡直接計(jì)數(shù) 過(guò)程 土壤取樣 樣品稀釋 微生物的培養(yǎng)與觀察 鑒定方法 含酚紅指示劑以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基 細(xì)菌 出現(xiàn)紅色透明圈 則該菌能分解尿素 2 分解纖維素的微生物的分離 實(shí)驗(yàn)原理 即 可通過(guò)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌 流程 土壤取樣 選擇培養(yǎng) 梯度稀釋 涂布平板 挑選菌落 微生物的分離與計(jì)數(shù) 1 篩選微生物的 兩 種選擇培養(yǎng)基 以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基 篩選尿素分解菌 富含纖維素的培養(yǎng)基 篩選纖維素分解菌 2 鑒別微生物的 兩 種鑒別培養(yǎng)基 添加酚紅指示劑的培養(yǎng)基 尿素分解菌可使該培養(yǎng)基變紅 添加剛果紅的培養(yǎng)基 纖維素分解菌的菌落周?chē)a(chǎn)生透明圈 3 微生物計(jì)數(shù)的 兩 種方法 直接計(jì)數(shù)法 顯微鏡直接計(jì)數(shù)法 間接計(jì)數(shù)法 稀釋涂布平板法 活菌計(jì)數(shù)法 統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低 1 2016 全國(guó) T39 空氣中的微生物在重力等作用下 可以一定程度地沉降 某研究小組欲用平板收集教室空氣中的微生物 以了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況 實(shí)驗(yàn)步驟如下 配制培養(yǎng)基 成分 牛肉膏 蛋白胨 NaCl X H2O 制作無(wú)菌平板 設(shè)置空白對(duì)照組和若干實(shí)驗(yàn)組 進(jìn)行相關(guān)操作 將各組平板置于37 恒溫箱中培養(yǎng)一段時(shí)間 統(tǒng)計(jì)各組平板上菌落的平均數(shù) 回答下列問(wèn)題 1 該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來(lái)源于 若要完成步驟 該培養(yǎng)基中的成分X通常是 2 步驟 中 實(shí)驗(yàn)組的操作是 3 若在某次調(diào)查中 某一實(shí)驗(yàn)組平板上菌落平均數(shù)為36個(gè) 平板 而空白對(duì)照組的一個(gè)平板上出現(xiàn)了6個(gè)菌落 這種結(jié)果說(shuō)明在此次調(diào)查中出現(xiàn)了 現(xiàn)象 若將30 即36 6 個(gè) 平板作為本組菌落數(shù)的平均值 該做法 填 正確 或 不正確 牛肉膏 蛋白胨 瓊脂 污染 不正確 將各實(shí)驗(yàn)組平板分別放置在教室不同高度的位置上 開(kāi)蓋暴露一段時(shí)間 解析 1 依據(jù)配制培養(yǎng)基的成分可知 該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來(lái)源于牛肉膏 蛋白胨 因?yàn)樵搶?shí)驗(yàn)是 用平板收集教室空氣中的微生物 所使用的培養(yǎng)基應(yīng)為固體培養(yǎng)基 配制時(shí) 需加入凝固劑 據(jù)此推知 該培養(yǎng)基中的成分X通常是瓊脂 2 依題意可知 該實(shí)驗(yàn)的目的是 用平板收集教室空氣中的微生物 以了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況 所以步驟 中 實(shí)驗(yàn)組的操作是 將各實(shí)驗(yàn)組平板分別放置在教室不同高度的位置上 開(kāi)蓋暴露一段時(shí)間 以收集教室不同高度空氣中的微生物 3 設(shè)置的空白對(duì)照組 在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中沒(méi)有用來(lái)收集空氣中的微生物 若空白對(duì)照組的一個(gè)平板上出現(xiàn)了6個(gè)菌落 說(shuō)明培養(yǎng)基的配制是不成功的 在此次調(diào)查中出現(xiàn)了污染現(xiàn)象 所以若將30 即36 6 個(gè) 平板作為本組菌落數(shù)的平均值 該做法不正確 2 2018 安徽六校教育研究會(huì)聯(lián)考 為解決塑料袋造成的 白色污染 問(wèn)題 某同學(xué)試圖從土壤中尋找一種能加速塑料袋自然降解的目的菌 請(qǐng)根據(jù)有關(guān)知識(shí)回答下列問(wèn)題 1 為培養(yǎng)該目的菌 需要配制出供其 所需的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì) 培養(yǎng)基 對(duì)培養(yǎng)基滅菌常用的方法是 在接種前需要檢驗(yàn)使用的培養(yǎng)基滅菌是否合格 方法是 生長(zhǎng)繁殖 高壓蒸汽滅菌法 將未接種的培養(yǎng)基在37 或適宜溫度 恒溫箱中倒置培養(yǎng)一段時(shí)間 或1 2天 觀察是否有菌落生成 2 為了確保能夠從樣品中分離得到所需要的微生物 我們可在接種之前進(jìn)行 培養(yǎng) 以增加目的菌的濃度 實(shí)驗(yàn)室常用的接種方法有 和 3 該同學(xué)在稀釋倍數(shù)為104的培養(yǎng)基中測(cè)得平板上菌落數(shù)分別為24 23 25 則每毫升樣品中的菌落數(shù)是 個(gè) 涂布平板時(shí)所用稀釋液的體積為0 2mL 用該方法統(tǒng)計(jì)的數(shù)目往往比活菌的實(shí)際數(shù)目 選擇 平板劃線(xiàn)法 稀釋涂布平板法 1 2 106 少 解析 1 培養(yǎng)基可以為目的菌的生長(zhǎng)繁殖提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法 在接種前需要檢測(cè)使用的培養(yǎng)基是否被污染 可以將未接種的培養(yǎng)基在37 或適宜溫度 恒溫箱中倒置培養(yǎng)一段時(shí)間 觀察是否有菌落生成 2 為了確保能夠從樣品中分離得到所需要的微生物 在接種之前用以聚乙烯塑料為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng) 以增加目的菌的濃度 實(shí)驗(yàn)室常用的接種方法有平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法 3 根據(jù)題意可知 每克樣品中的菌落數(shù) 平板上菌落數(shù)的平均值 體積 稀釋倍數(shù) 24 23 25 0 2 104 1 2 106 由于細(xì)菌會(huì)相互重疊 因此用該方法統(tǒng)計(jì)的數(shù)目往往比活菌的實(shí)際數(shù)目少 接種 黑 鑒別 培養(yǎng)基 3 分離幽門(mén)螺桿菌配制培養(yǎng)基時(shí) 要加入尿素和 指示劑 這是因?yàn)橛拈T(mén)螺桿菌含有 若有幽門(mén)螺桿菌 則菌落周?chē)鷷?huì)出現(xiàn) 色透明圈 臨床上常讓病人喝一定量用14C標(biāo)記的尿素 檢測(cè)呼出的氣體中有無(wú)14CO2來(lái)判斷是否感染了幽門(mén)螺桿菌 14C呼氣試驗(yàn) 其基本原理是 酚紅 脲酶 紅 幽門(mén)螺桿菌能將14C標(biāo)記的尿素分解為NH3和14CO2 解析 1 滅菌 倒平板后的X步驟表示接種 在無(wú)菌條件下操作時(shí) 先將菌液稀釋 然后將菌液涂布到培養(yǎng)基平面上 菌液稀釋的目的是為了獲得單一菌落 2 測(cè)定飲用水中大腸桿菌的數(shù)目的方法 將已知體積的水過(guò)濾后 將濾膜放在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上培養(yǎng) 在該培養(yǎng)基上大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)黑色 可根據(jù)培養(yǎng)基上黑色菌落的數(shù)目 計(jì)算出水樣中大腸桿菌的數(shù)目 從功能上看 伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基被稱(chēng)做鑒別培養(yǎng)基 3 由于幽門(mén)螺桿菌在分解尿素的過(guò)程中合成脲酶 脲酶將尿素分解成氨 會(huì)使培養(yǎng)基堿性增強(qiáng) pH升高 所以可在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑和尿素 若有幽門(mén)螺桿菌 尿素被分解后產(chǎn)生氨 pH升高 指示劑變紅 則菌落周?chē)鷷?huì)出現(xiàn)紅色透明圈 臨床上常讓病人喝一定量用14C標(biāo)記的尿素 檢測(cè)呼出的氣體中有無(wú)14CO2來(lái)判斷是否感染了幽門(mén)螺桿菌 14C呼氣試驗(yàn) 其基本原理是幽門(mén)螺桿菌能將14C標(biāo)記的尿素分解為NH3和14CO2 4 2018 安徽滁州期末 科學(xué)家篩選培育良種纖維素分解菌對(duì)玉米芯進(jìn)行降解 并進(jìn)一步利用酵母菌發(fā)酵制備乙醇 回答下列問(wèn)題 1 篩選纖維素分解菌時(shí) 一般在以 為唯一碳源的培養(yǎng)基中添加染料 通過(guò)是否產(chǎn)生 來(lái)篩選纖維素分解菌 2 請(qǐng)用文字?jǐn)⑹鰣D1中分解玉米芯絲菌用量與還原糖濃度的關(guān)系 3 圖2表示酵母菌量與酒精產(chǎn)生量的關(guān)系 酵母菌接種量超過(guò)40mL后 酒精產(chǎn)量反而減少的原因是 為確定發(fā)酵罐內(nèi)酵母菌的數(shù)量 常用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)細(xì)菌數(shù)量 統(tǒng)計(jì)的數(shù)據(jù)往往會(huì)偏小的原因是 纖維素 透明圈 在底物玉米芯用量一定的情況下 菌用量的增加有利于玉米芯酶解為還原糖 當(dāng)菌用量過(guò)大時(shí) 還原糖含量下降 酵母菌接種量過(guò)大導(dǎo)致酵母菌種群密度過(guò)大 不利于酵母菌的發(fā)酵活動(dòng) 兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌形成一個(gè)菌落 解析 1 纖維素分解菌具有分解纖維素的能力 因此其培養(yǎng)基中一般添加纖維素作為唯一碳源 剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物 當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后 剛果紅 纖維素的復(fù)合物就無(wú)法合成 培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈 所以我們就可以通過(guò)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌 2 根據(jù)圖1中的曲線(xiàn)變化分析 隨著纖維素分解菌用量的增加 還原糖濃度先增加后降低 即在底物玉米芯用量一定的情況下 菌用量的增加有利于玉米芯酶解為還原糖 當(dāng)菌用量過(guò)大時(shí) 還原糖含量下降 3 圖2顯示 酵母菌接種量超過(guò)40mL后 酒精產(chǎn)量反而減少 其主要原因是酵母菌接種量過(guò)大導(dǎo)致酵母菌種群密度過(guò)大 不利于酵母菌的發(fā)酵活動(dòng) 稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)細(xì)菌數(shù)量時(shí) 由于兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌形成一個(gè)菌落 所以統(tǒng)計(jì)的數(shù)據(jù)往往會(huì)偏小 5 2018 河南中原名校第六次質(zhì)考 多氯聯(lián)苯 PCB 是一種對(duì)人體有害的有機(jī)物 某科技小組欲從受PCB污染的土壤中分離出能分解PCB的細(xì)菌 請(qǐng)回答下列問(wèn)題 1 要從受PCB污染的土壤中分離出能分解PCB的細(xì)菌 應(yīng)配制以 作為唯一的碳源的選擇培養(yǎng)基 配制培養(yǎng)基時(shí)用到的玻璃器皿需用 進(jìn)行滅菌 2 分離前可通過(guò)選擇培養(yǎng)增加土壤中PCB分解菌的濃度 選擇培養(yǎng)時(shí)需要不斷震蕩錐形瓶的目的是 多氯聯(lián)苯 PCB 干熱滅菌法 讓PCB分解菌充分利用營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 3 用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)PCB分解菌的濃度時(shí) 常需同時(shí)培養(yǎng)空白培養(yǎng)基 其目的是 若實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)空白培養(yǎng)基上生長(zhǎng)有3個(gè)菌落 為準(zhǔn)確測(cè)定樣液中PCB分解菌的濃度 則需要 4 在純化土壤中的PCB分解菌時(shí) 發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片 最可能的原因是 應(yīng)當(dāng)怎樣操作才可避免此種現(xiàn)象 檢測(cè)所用培養(yǎng)基滅菌是否徹底 重新配制培養(yǎng)基進(jìn)行實(shí)驗(yàn) 菌液濃度過(guò)高 對(duì)菌液進(jìn)行梯度稀釋 加大稀釋倍數(shù) 解析 1 分析題意可知 要從土壤中篩選出能分解PCB的細(xì)菌 應(yīng)采用以PCB作為唯一的碳源的選擇培養(yǎng)基 實(shí)驗(yàn)中的玻璃器皿一般采用干熱滅菌法進(jìn)行滅菌 2 培養(yǎng)PCB分解菌時(shí) 需要不斷的震蕩錐形瓶 目的是為了讓PCB分解菌充分與培養(yǎng)液接觸 進(jìn)而充分利用營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 3 用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)PCB分解菌的濃度時(shí) 為了檢測(cè)所用培養(yǎng)基滅菌是否徹底 需要培養(yǎng)空白培養(yǎng)基作為對(duì)照 若實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)空白培養(yǎng)基上生長(zhǎng)有3個(gè)菌落 說(shuō)明培養(yǎng)基滅菌不徹底 為準(zhǔn)確測(cè)定樣液中PCB分解菌的濃度 則需要重新配制培養(yǎng)基進(jìn)行實(shí)驗(yàn) 4 若PCB分解菌的菌落在培養(yǎng)基上連成一片 說(shuō)明菌液濃度過(guò)高 則應(yīng)該對(duì)菌液進(jìn)行梯度稀釋 考點(diǎn)二傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用 1 果酒和果醋的制作 2 腐乳的制作 1 制作原理 2 實(shí)驗(yàn)流程及影響因素 3 泡菜的制作 1 把握控制雜菌的 四大措施 1 通過(guò)發(fā)酵條件控制雜菌 無(wú)氧發(fā)酵時(shí)的無(wú)氧環(huán)境可以抑制好氧菌 乳酸菌發(fā)酵 酒精發(fā)酵形成的酸性環(huán)境抑制雜菌繁殖 2 利用鹽控制雜菌 如腐乳的制作 3 利用酒精控制雜菌 如果酒 腐乳的制作 4 利用香辛料控制雜菌 如腐乳 泡菜的制作 2 乳酸菌 乳酸 亞硝酸鹽的數(shù)量隨時(shí)間變化的曲線(xiàn)模型構(gòu)建 1 2018 全國(guó) T37 回答下列與酵母菌有關(guān)的問(wèn)題 1 分離培養(yǎng)酵母菌通常使用 填 牛肉膏蛋白胨 MS 或 麥芽汁瓊脂 培養(yǎng)基 該培養(yǎng)基應(yīng)采用 滅菌法滅菌 若將酵母菌劃線(xiàn)接種在平板上 培養(yǎng)一段時(shí)間后會(huì)觀察到菌落 菌落的含義是 麥芽汁瓊脂 高壓蒸汽 由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的肉眼可見(jiàn)的子細(xì)胞群體 2 酵母菌液體培養(yǎng)時(shí) 若通入氧氣 可促進(jìn) 填 菌體快速增殖 乙醇產(chǎn)生 或 乳酸產(chǎn)生 若進(jìn)行厭氧培養(yǎng) 可促進(jìn) 填 菌體快速增殖 乙醇產(chǎn)生 或 乳酸產(chǎn)生 3 制作面包時(shí) 為使面包松軟通常要在面粉中添加一定量的酵母菌 酵母菌引起面包松軟的原因是 菌體快速增殖 乙醇產(chǎn)生 酵母菌分解葡萄糖會(huì)產(chǎn)生CO2 CO2使面包松軟 解析 1 麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基的碳氮比較高 而且含糖量高 更適合酵母菌 該培養(yǎng)基應(yīng)采用高壓蒸汽滅菌法滅菌 若將酵母菌劃線(xiàn)接種在平板上 培養(yǎng)一段時(shí)間后可觀察到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的肉眼可見(jiàn)的子細(xì)胞群體 這就是菌落 2 酵母菌液體培養(yǎng)時(shí) 若通入氧氣 進(jìn)行有氧呼吸產(chǎn)生H2O和CO2 釋放能量多 細(xì)胞增殖快 若進(jìn)行無(wú)氧培養(yǎng) 進(jìn)行無(wú)氧呼吸 產(chǎn)生酒精和CO2 釋放能量少 增殖慢 3 制作面包時(shí) 在面粉中添加一定量的酵母菌 因酵母菌可以分解面粉中的葡萄糖 產(chǎn)生二氧化碳 二氧化碳是氣體 遇熱膨脹而形成小孔 使得面包松軟多孔 細(xì)胞質(zhì)基質(zhì) 重鉻酸鉀 線(xiàn)粒體 快 有氧 低于 原 不含有 解析 1 圖示中的過(guò)程 和 分別表示無(wú)氧呼吸的第一 第二階段 其場(chǎng)所均為細(xì)胞質(zhì)基質(zhì) 橙色的重鉻酸甲溶液在酸性條件下與乙醇 酒精 反應(yīng)變成灰綠色 過(guò)程 表示有氧呼吸的第二 第三階段 其場(chǎng)所分別為線(xiàn)粒體基質(zhì)和線(xiàn)粒體內(nèi)膜 即過(guò)程 在酵母菌細(xì)胞的線(xiàn)粒體中進(jìn)行 與無(wú)氧條件相比 在有氧條件下 酵母菌的增殖速度快 2 醋酸桿菌是一種好氧菌 在氧氣充足的條件下才能進(jìn)行旺盛的生命活動(dòng) 因此將第一階段產(chǎn)生的乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿岬倪^(guò)程 需要在有氧條件下才能完成 3 第一階段即果酒的制作 所控制的溫度范圍是18 25 第二階段即果醋的制作 所控制的溫度范圍是30 35 所以第一階段的溫度低于第二階段的 4 醋酸桿菌屬于原核生物 其細(xì)胞結(jié)構(gòu)中不含線(xiàn)粒體等復(fù)雜的細(xì)胞器 3 2017 全國(guó) T37 豆豉是大豆經(jīng)過(guò)發(fā)酵制成的一種食品 為了研究影響豆豉發(fā)酵效果的因素 某小組將等量的甲 乙兩菌種分別接入等量的A B兩桶煮熟大豆中并混勻 再將兩者置于適宜條件下進(jìn)行發(fā)酵 并在32h內(nèi)定期取樣觀測(cè)發(fā)酵效果 回答下列問(wèn)題 1 該實(shí)驗(yàn)的自變量是 2 如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵容器內(nèi)上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好 說(shuō)明該發(fā)酵菌是 菌種 發(fā)酵時(shí)間 好氧菌 3 如果在實(shí)驗(yàn)后 發(fā)現(xiàn)32h內(nèi)的發(fā)酵效果越來(lái)越好 且隨發(fā)酵時(shí)間呈直線(xiàn)上升關(guān)系 則無(wú)法確定發(fā)酵的最佳時(shí)間 若要確定最佳發(fā)酵時(shí)間 還需要做的事情是 4 從大豆到豆豉 大豆中的成分會(huì)發(fā)生一定的變化 其中 蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)?脂肪轉(zhuǎn)變?yōu)?延長(zhǎng)發(fā)酵時(shí)間 觀測(cè)發(fā)酵效果 最好的發(fā)酵效果所對(duì)應(yīng)的時(shí)間即為最佳發(fā)酵時(shí)間 氨基酸和肽 脂肪酸和甘油 解析 1 該實(shí)驗(yàn)的自變量是菌種 發(fā)酵時(shí)間 2 如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵容器內(nèi)上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好 說(shuō)明該發(fā)酵菌是好氧菌 3 如果在實(shí)驗(yàn)后 發(fā)現(xiàn)32h內(nèi)的發(fā)酵效果越來(lái)越好 且隨發(fā)酵時(shí)間呈直線(xiàn)上升關(guān)系 則無(wú)法確定發(fā)酵的最佳時(shí)間 若要確定最佳發(fā)酵時(shí)間 還需要做的事情是延長(zhǎng)發(fā)酵時(shí)間 觀測(cè)發(fā)酵效果 最好的發(fā)酵效果所對(duì)應(yīng)的時(shí)間即為最佳發(fā)酵時(shí)間 4 從大豆到豆豉 大豆中的成分會(huì)發(fā)生一定的變化 其中 蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)榘被岷碗?脂肪轉(zhuǎn)變?yōu)橹舅岷透视?1 在微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)中 獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是 因此需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌 空氣中的細(xì)菌可用紫外線(xiàn)殺滅 其原因是紫外線(xiàn)能使破壞DNA的結(jié)構(gòu) 也能使蛋白質(zhì) 防止外來(lái)雜菌的入侵 變性 空間結(jié)構(gòu)破壞 2 上圖中 過(guò)程與 過(guò)程需要接種的發(fā)酵菌分別是 3 某同學(xué)計(jì)劃統(tǒng)計(jì)食醋中該發(fā)酵菌的總數(shù) 他選用10 4 10 5 10 6稀釋液進(jìn)行涂布 每種稀釋液都設(shè)置了3個(gè)培養(yǎng)皿 從對(duì)照實(shí)驗(yàn)的角度看 還應(yīng)設(shè)置的一組對(duì)照組是 設(shè)置對(duì)照組的目的是 4 對(duì)同一濃度的發(fā)酵菌稀釋液 分別用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)和稀釋涂布平板法計(jì)數(shù) 若不存在實(shí)驗(yàn)誤操作 則前者的數(shù)量 填 多于 等于 或 小于 后者 其原因是 酵母菌和醋酸菌 不接種的空白培養(yǎng)基 證明培養(yǎng)基制備過(guò)程中是否被雜菌污染 多于 有些菌落連接在一起 計(jì)數(shù)偏小 解析 1 微生物培養(yǎng)時(shí) 獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌的入侵 對(duì)于培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿需要進(jìn)行滅菌處理 人的雙手需要消毒處理 空氣中的細(xì)菌可用紫外線(xiàn)殺滅 其原因是紫外線(xiàn)能讓蛋白質(zhì)變性 同時(shí)還能破壞DNA的結(jié)構(gòu) 2 圖中 過(guò)程是制作果酒的過(guò)程 使用的微生物菌種是酵母菌 過(guò)程是制作果醋的過(guò)程 使用的微生物菌種是醋酸菌 3 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)過(guò)程應(yīng)遵循對(duì)照原則 該實(shí)驗(yàn)還應(yīng)增設(shè)一組不接種的空白培養(yǎng)基作為對(duì)照 以證明培養(yǎng)基制備過(guò)程中是否被雜菌污染 4 血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法 統(tǒng)計(jì)的是直接看到的細(xì)菌 無(wú)論死活都會(huì)被記錄上 相比之下平板計(jì)數(shù)法只能統(tǒng)計(jì)活的且能在所使用的平板上生長(zhǎng)繁殖的細(xì)菌 此外平板計(jì)數(shù)法統(tǒng)計(jì)的是菌落數(shù)而不是細(xì)菌的個(gè)數(shù) 有些菌落連接在一起 那么只能形成一個(gè)菌落 計(jì)數(shù)偏小 5 2018 安徽江南十校檢測(cè) 乳酸菌和我們的生活緊密相連 現(xiàn)欲從泡菜濾液中分離乳酸菌 請(qǐng)回答下列相關(guān)問(wèn)題 1 要純化培養(yǎng)乳酸菌 在配制固體培養(yǎng)基時(shí) 除了要加入各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外 一般還要加入 培養(yǎng)基中的碳酸銨 能 不能 為乳酸菌提供碳源 原因是 2 純化培養(yǎng)乳酸菌時(shí) 可采用 法進(jìn)行接種 為了能鑒別乳酸菌菌落 往往在配制培養(yǎng)基時(shí)加入碳酸鈣 原因是 瓊脂 不能 乳酸菌為異養(yǎng)生物只能利用含碳有機(jī)物 平板劃線(xiàn)法或稀釋涂布平板 乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣 形成透明圈 3 若要調(diào)查統(tǒng)計(jì)泡菜濾液中微生物的濃度 要設(shè)置空白對(duì)照組和多個(gè)實(shí)驗(yàn)組 若某個(gè)實(shí)驗(yàn)組平板上菌落平均數(shù)為46個(gè) 平板 而空白對(duì)照組中一個(gè)平板上出現(xiàn)了6個(gè)菌落 這種結(jié)果說(shuō)明此次調(diào)查出現(xiàn)了 現(xiàn)象 那么這次調(diào)查數(shù)據(jù)如何處理 雜菌 污染 丟棄本次調(diào)査數(shù)據(jù) 在防止污染情況下重新實(shí)驗(yàn) 獲得準(zhǔn)確數(shù)據(jù) 解析 1 純化培養(yǎng)乳酸菌 需要固體培養(yǎng)基 在配制固體培養(yǎng)基時(shí) 除了要加入各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外 一般還要加入瓊脂 乳酸菌為異養(yǎng)生物只能利用含碳有機(jī)物 而碳酸銨為無(wú)機(jī)物 乳酸菌不能利用 2 純化培養(yǎng)乳酸菌時(shí) 可采用平板劃線(xiàn)法或稀釋涂布平板法進(jìn)行接種 由于乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣 形成透明圈 因此為了能鑒別乳酸菌菌落 往往在配制培養(yǎng)基時(shí)加入碳酸鈣 3 空白對(duì)照組中一個(gè)平板上出現(xiàn)了6個(gè)菌落 這種結(jié)果說(shuō)明此次調(diào)查出現(xiàn)了 雜菌 污染現(xiàn)象 為了避免出現(xiàn)較大誤差 應(yīng)該丟棄本次調(diào)査數(shù)據(jù) 在防止污染情況下重新實(shí)驗(yàn) 獲得準(zhǔn)確數(shù)據(jù) 6 我國(guó)利用不同微生物的發(fā)酵作用來(lái)制作果酒 果醋 腐乳和酸奶等食品的歷史悠久 一般稱(chēng)作傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù) 根據(jù)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的相關(guān)知識(shí) 回答以下問(wèn)題 1 制作高粱酒和蘋(píng)果醋要用到的微生物分別是 2 果酒和果醋的制作 傳統(tǒng)發(fā)酵時(shí)發(fā)酵液未經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的滅菌處理 雜菌卻不能正常生長(zhǎng) 這是由于果酒發(fā)酵的 條件抑制了雜菌的生長(zhǎng) 與果酒發(fā)酵不同 果醋發(fā)酵需要在 條件下進(jìn)行 溫度較高時(shí)果酒發(fā)酵時(shí)間可縮短 原因是 喝剩的葡萄酒放置一段時(shí)間后變酸的原因是 酵母菌和醋酸菌 無(wú)氧 pH呈酸性 供氧充足 溫度較高 溫度較高時(shí)發(fā)酵酶活性增強(qiáng) 發(fā)酵速度更快酒精轉(zhuǎn)變成了醋酸 C2H5OH O2 CH3OOH 醋酸 H2O 3 腐乳和乳酸發(fā)酵 腐乳的色香味主要是由 決定的 久置變質(zhì)的酸奶不能食用 原因是 泡菜制作過(guò)程中常會(huì)產(chǎn)生大量的亞硝酸鹽 亞硝酸鹽會(huì) 填 直接 或 間接 致癌 鹵湯 其他有害微生物大量繁殖 并產(chǎn)生了對(duì)人體有害的物質(zhì) 直接 解析 1 制作果酒利用的是酵母菌的無(wú)氧呼吸 而制作果醋利用的是醋酸菌的有氧呼吸 所以分別是酵母菌和醋酸菌 2 果酒和果醋的制作 傳統(tǒng)發(fā)酵時(shí)發(fā)酵液未經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的滅菌處理 雜菌卻不能正常生長(zhǎng) 這是由于果酒發(fā)酵時(shí)需要的無(wú)氧和酸性環(huán)境會(huì)抑制其它雜菌的生長(zhǎng) 果醋發(fā)酵是一定需要氧氣的 且醋酸菌生長(zhǎng)的溫度要高于酵母菌的溫度 醋酸菌適宜的溫度在30 35 溫度較高時(shí)果酒發(fā)酵時(shí)間可縮短 原因是溫度較高時(shí)發(fā)酵酶活性增強(qiáng) 發(fā)酵速度更快 喝剩的葡萄酒放置一段時(shí)間后變酸的原因是在有氧氣的情況下將乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿?3 腐乳的色香味主要是由鹵湯來(lái)決定的 久置變質(zhì)的酸奶不能食用 原因是此時(shí)其他有害微生物大量繁殖 并產(chǎn)生了對(duì)人體有害的物質(zhì) 在泡菜制作過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生亞硝酸鹽 而其可以作為化學(xué)因素直接致癌 考點(diǎn)三從生物材料中提取某些特定的成分 1 三種生物成分的提取方法 原理及步驟的比較 2 把握物質(zhì)分離的5種方法 1 分離油水混合物 分液法 2 除去固體物和殘?jiān)?過(guò)濾法 3 除去液體中質(zhì)量較小的固體殘留物 離心法 4 除去芳香油中的殘留水分 加入無(wú)水硫酸鈉后過(guò)濾的方法 5 除去萃取液中的有機(jī)溶劑 蒸餾法 3 明確冷凝管的2種用法 1 冷凝收集油水混合物 如玫瑰精油的提取 2 冷凝回流 如胡蘿卜素的提取 植物有效成分提取應(yīng)注意的五個(gè)關(guān)鍵點(diǎn) 1 水蒸氣蒸餾過(guò)程中可用明火加熱 萃取過(guò)程應(yīng)該避免明火加熱 采取水浴加熱 這是因?yàn)橛袡C(jī)溶劑都是易燃物 直接用明火加熱容易引起燃燒 爆炸 2 在用水蒸氣蒸餾法制取玫瑰精油的過(guò)程中 油水混合物中要加入NaCl的目的是增大水的密度 有利于玫瑰精油與水的分層 加入無(wú)水Na2SO4的目的是吸收精油中殘留的水分 3 蒸餾時(shí)若溫度太高 時(shí)間太短 產(chǎn)品品質(zhì)較差 若提高產(chǎn)品品質(zhì) 可適當(dāng)延長(zhǎng)蒸餾時(shí)間 4 橘皮壓榨前 可在石灰水中浸泡10h以上 既防止壓榨時(shí)滑脫 提高出油率 又不會(huì)在過(guò)濾時(shí)堵塞篩眼 5 萃取時(shí)一般來(lái)說(shuō)原料顆粒小 萃取溫度高 時(shí)間長(zhǎng) 則提取的物質(zhì)能夠充分溶解 萃取效果較好 1 2017 全國(guó) T37 綠色植物甲含有物質(zhì)W 該物質(zhì)為無(wú)色針狀晶體 易溶于極性有機(jī)溶劑 難溶于水 且受熱 受潮易分解 其提取流程為 植物甲 粉碎 加溶劑 振蕩 收集提取液 活性炭處理 過(guò)濾去除活性炭 蒸餾 含回收溶劑 重結(jié)晶 成品 回答下列問(wèn)題 1 在提取物質(zhì)W時(shí) 最好應(yīng)選用的一種原料是 填 高溫烘干 晾干 或 新鮮 的植物甲 不宜選用其他兩種的原因是 晾干 高溫烘干過(guò)程中 植物甲中的物質(zhì)W易被破壞 新鮮的植物甲含水量高 用于提取的極性有機(jī)溶劑會(huì)被稀釋 進(jìn)而降低對(duì)物質(zhì)W的提取效果 2 提取物質(zhì)W時(shí) 振蕩的作用是 3 活性炭具有很強(qiáng)的吸附能力 在提取過(guò)程中 用活性炭處理提取液的目的是 4 現(xiàn)有丙酮 沸點(diǎn)56 乙醇 沸點(diǎn)約78 兩種溶劑 在提取物質(zhì)W時(shí) 應(yīng)選用丙酮作用提取劑 理由是 5 該實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中應(yīng)注意的事項(xiàng)是 答出兩點(diǎn)即可 使原料和溶劑充分混勻 去除提取液中的色素 丙酮沸點(diǎn)低于乙醇 蒸餾時(shí)物質(zhì)W分解較少 在溫度較低的情況下操作 防火 解析 1 依據(jù)題干信息 受熱 受潮易分解 進(jìn)行推斷 即可得知最好應(yīng)選用的一種原料是晾干的植物甲 2 振蕩易于溶解 是基本實(shí)驗(yàn)知識(shí) 3 題干信息 活性炭具有吸附能力 雜質(zhì)色素易被吸附 4 根據(jù)題干信息 受熱易分解 所以選擇沸點(diǎn)低的丙酮 5 根據(jù)題干信息 受熱易分解 所以注意溫度控制 用的丙酮 丙酮揮發(fā) 對(duì)人體有害 所以通風(fēng) 減少W分解 所以操作要快 2 2015 全國(guó) T39 回答與胡蘿卜有關(guān)的問(wèn)題 1 胡蘿卜含有的胡蘿卜素中 最主要的是 填 胡蘿卜素 或 胡蘿卜素 或 胡蘿卜素 該胡蘿卜素在人體內(nèi)可以轉(zhuǎn)變成兩分子 后者缺乏會(huì)引起人在弱光下視物不清的病癥 該疾病稱(chēng)為 胡蘿卜素是 填 揮發(fā)性 或 非揮發(fā)性 物質(zhì) 2 工業(yè)生產(chǎn)上 用養(yǎng)殖的巖藻作為原料提取胡蘿卜素時(shí) 填 需要 或 不需要 將新鮮的巖藻干燥 3 現(xiàn)有乙醇和乙酸乙酯兩種溶劑 應(yīng)選用其中的 作為胡蘿卜素的萃取劑 不選用另外一種的理由是 胡蘿卜素 維生素A 夜盲癥 非揮發(fā)性 需要 乙酸乙酯 萃取胡蘿卜素的有機(jī)溶劑應(yīng)不與水混溶 而乙醇為水溶性有機(jī)溶劑 解析 1 胡蘿卜中含有的主要是 胡蘿卜素 胡蘿卜素可在人體內(nèi)可轉(zhuǎn)變成維生素A 夜盲癥是由于維生素A缺乏導(dǎo)致 胡蘿卜素沒(méi)有揮發(fā)性 3 作為萃取胡蘿卜素的萃取劑要有較高的沸點(diǎn) 能充分溶解胡蘿卜素且與水不混溶 胡蘿卜素雖可溶于乙醇 但乙醇是水溶性有機(jī)溶劑 萃取中能與水混溶而影響萃取效果 所以不能用乙醇做萃取劑 3 2018 湖北孝感期末 玫瑰精油在玫瑰花瓣中含量最高 工業(yè)上常以玫瑰花瓣為原料 采用水蒸氣蒸餾法提取玫瑰精油 回答下列問(wèn)題 1 采用水蒸氣蒸餾時(shí) 水蒸氣能將玫瑰精油從花瓣中攜帶出來(lái) 是因?yàn)槊倒寰途哂?的特點(diǎn) 2 水蒸氣蒸餾后 能收集到乳白色的油水混合物 向油水混合物中加入 就會(huì)出現(xiàn)明顯的油層與水層 分離出油層 一般可加入一些 以吸收油層中的水分 揮發(fā)性強(qiáng) NaCl 無(wú)水Na2SO4 3 蒸餾時(shí) 會(huì)存在許多因素影響玫瑰精油的產(chǎn)量 下圖是當(dāng)玫瑰花瓣與清水的質(zhì)量比為1 4時(shí) 出油率與蒸餾時(shí)間的變化關(guān)系 一般蒸餾時(shí)間最好控制在 h 4 植物芳香油的提取方法有多種 具體采用哪種方法 要根據(jù)植物原料的特點(diǎn)來(lái)決定 提取玫瑰精油 填 可以 或 不可以 采用有機(jī)溶劑萃取法 理由是 4 可以 玫瑰精油易溶于有機(jī)溶劑 解析 1 玫瑰精油化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定 難溶于水 易溶于有機(jī)溶劑 揮發(fā)性強(qiáng) 能隨水蒸氣一同蒸餾 2 在提取過(guò)程中加入NaCl 可以增加水的比重 使油水分層 分離出油層后 一般可加入一些無(wú)水Na2SO4 以吸收油層中的水分 3 根據(jù)出油率與蒸餾時(shí)間的變化關(guān)系曲線(xiàn)圖可知 一般蒸餾4小時(shí) 出油率最大 再延長(zhǎng)時(shí)間 出油率不變 因此蒸餾時(shí)間最好控制在4h 4 由于玫瑰精油易溶于有機(jī)溶劑 所以提取玫瑰精油可以采用有機(jī)溶劑萃取法 4 2018 湖南張家界三模 胡蘿卜素是一種天然色素類(lèi)食品添加劑 圖1是獲取胡蘿卜素的兩種操作流程 圖2是樣品層析結(jié)果與 胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)樣品的比對(duì)結(jié)果圖 回答下列問(wèn)題 1 進(jìn)行篩選酵母菌R前 需對(duì)酵母菌R進(jìn)行選擇培養(yǎng) 選擇培養(yǎng)用液體培養(yǎng)基的目的是 2 篩選酵母菌R時(shí) 可使用 法接種 通過(guò)觀察單菌落的 來(lái)區(qū)分出酵母菌R 3 圖1中 干燥過(guò)程應(yīng)控制好溫度和干燥時(shí)間 目的是 萃取過(guò)程中宜采用水浴加熱 原因是 4 圖中A過(guò)程表示過(guò)濾 獲得的濾液是 5 紙層析法可用于鑒定所提取的胡蘿卜素 圖2中色帶 填 或 為 胡蘿卜素 理由是 獲得大量菌體 有利于酵母菌的大量繁殖 平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板 形態(tài) 顏色和隆起度 防止胡蘿卜素的分解 有機(jī)溶劑都是易燃物 直接使用明火加熱容易引起燃燒 爆炸 含有胡蘿卜素等的萃取劑 標(biāo)準(zhǔn)樣品是 胡蘿卜素 相同色素在濾紙條上的擴(kuò)散速率相同 解析 1 液體培養(yǎng)基有利于酵母菌的大量繁殖 以獲得更多的酵母菌 因此對(duì)酵母菌R進(jìn)行選擇培養(yǎng) 選擇培養(yǎng)用液體培養(yǎng)基 2 微生物常用的接種方法有平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法 可以通過(guò)觀察單菌落的形態(tài) 顏色和隆起度來(lái)區(qū)分出酵母菌R 3 為了防止胡蘿卜素的分解 干燥過(guò)程應(yīng)控制好溫度和干燥時(shí)間 由于有機(jī)溶劑都是易燃物 直接使用明火加熱容易引起燃燒 爆炸 因此萃取過(guò)程中宜采用水浴加熱 4 圖中A過(guò)程表示過(guò)濾 則獲得的濾液是含有胡蘿卜素等的萃取劑 5 由于標(biāo)準(zhǔn)樣品是 胡蘿卜素 而相同色素在濾紙條上的擴(kuò)散速率相同 因此圖2中色帶 為 胡蘿卜素 謝 謝 觀 看