公共場所茶具微生物檢驗方法大腸菌群測定

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1、公共場所茶具微生物檢驗方法 大腸菌群測定 GB/T 18204.3--2000 1 定義：大腸菌群 指一群在37℃、24h能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸、產(chǎn)氣、需氧和兼性厭癢的革蘭氏陰性無芽胞桿菌。 該菌主要來源于人畜糞便，故以次作為糞便污染指標來評價公用毛巾、床上臥具的衛(wèi)生質(zhì)量。 2 操作步驟 2.1 采樣方法 2.1.1 隨機法：隨機抽取清洗消毒后準備使用的毛巾、床上臥具。 2.1.2 涂抹法：用測定細菌總數(shù)時采集的樣品，無需重采。 2.1.3 紙片法：用滅菌生理鹽水濕潤5cm5cm大腸菌群快速測定紙片兩張，分別貼在毛巾、床上臥具規(guī)定部位和

2、面積范圍內(nèi)，約30s后取下，置于無菌塑料袋內(nèi)。 2.2 檢驗方法 2.2.1 發(fā)酵法 2.2.1.1 用測定細菌總數(shù)剩余的檢樣，倒入雙料乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)液中。置36℃1℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24h。 2.2.1.2 觀察是否產(chǎn)酸、產(chǎn)氣，若有變黃和氣體產(chǎn)生，該管推測是檢驗陽性。如不產(chǎn)酸、產(chǎn)氣則為大腸菌群陰性。 2.2.1.3 自推測性檢驗陽性管中取一接種環(huán)培養(yǎng)液，轉(zhuǎn)種伊紅美藍瓊脂平板上，置36℃1℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)18～24h，然后取出，觀察菌落形態(tài)，并做革蘭氏染色和證實性試驗。 2.2.1.4 在上述平板上，挑取可疑大腸菌群菌落1～2個進行染色鏡檢； 同時接種乳糖發(fā)酵管，只36℃1℃培養(yǎng)24h。 2.3 紙片法將已采樣的紙片置36℃1℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)16～18 h，觀察結(jié)果。