《動物病理學(xué)》本科教學(xué)PPT課件
《動物病理學(xué)》本科教學(xué)PPT課件,動物病理學(xué),動物,病理學(xué),本科,教學(xué),PPT,課件
國家精品課程動物病理學(xué)動物病理學(xué)動物病理學(xué)Animal Pathology本科版精品課程精品課程-動物病理學(xué)建設(shè)概要動物病理學(xué)建設(shè)概要l2000年獲校級精品課程獲校級精品課程l2006年獲省級精品課程年獲省級精品課程l20102010年獲國家精品課程年獲國家精品課程課程組主要成員課程目標課程目標l以培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新能力和實踐能力為宗旨，在正確理解和掌握病理學(xué)基本概念、基本概念、基本理論的基礎(chǔ)基本理論的基礎(chǔ)上，學(xué)習(xí)病理學(xué)的觀察方法，理論聯(lián)系實際，使病理與臨床有機結(jié)合，形態(tài)和功能密切聯(lián)系，提高分析問題和解決問題的能力，為學(xué)習(xí)動物臨床課程奠定理論基礎(chǔ)。l重點重點-強調(diào)基本概念、基本理論、基本技能，基本概念、基本理論、基本技能，必須掌握好疾病的病理過程及相互關(guān)系。課程體系設(shè)置（學(xué)制四年）課程體系設(shè)置（學(xué)制四年）1、動物病理學(xué)（66學(xué)時，第4學(xué)期）（1）理論課，40學(xué)時（2）實驗課，24學(xué)時2、病理學(xué)課程實習(xí)（22學(xué)時，第6學(xué)期）3、獸醫(yī)臨床病理診斷（20學(xué)時，第7學(xué)期）第一章第一章 緒緒 論論第一節(jié)第一節(jié) 動物病理學(xué)概論動物病理學(xué)概論第二節(jié)第二節(jié) 疾病概論疾病概論一、概一、概 述述二、病理學(xué)發(fā)展概要二、病理學(xué)發(fā)展概要三、病理學(xué)研究基本方法三、病理學(xué)研究基本方法四、四、現(xiàn)代病理實驗技術(shù)現(xiàn)代病理實驗技術(shù)五、學(xué)習(xí)動物病理學(xué)的指導(dǎo)思想五、學(xué)習(xí)動物病理學(xué)的指導(dǎo)思想 第一節(jié)第一節(jié) 動物病理學(xué)概論動物病理學(xué)概論 （Introduction to Introduction to Animal Pathology）1.1.掌握病理學(xué)的概念、研究內(nèi)容及其意義掌握病理學(xué)的概念、研究內(nèi)容及其意義lTo master concept,contents and meaning of pathology.2.2.熟悉病理學(xué)的研究方法熟悉病理學(xué)的研究方法 lTo know research methods of pathology.3.3.了解病理學(xué)的發(fā)展史及其進展趨勢了解病理學(xué)的發(fā)展史及其進展趨勢lTo understand history and developing of pathology教學(xué)目標教學(xué)目標（一）基本概念（一）基本概念（二）基本內(nèi)容（二）基本內(nèi)容（三）（三）動物動物動物動物病理學(xué)的任務(wù)病理學(xué)的任務(wù)（四）動物（四）動物（四）動物（四）動物病理學(xué)的范疇病理學(xué)的范疇（五）（五）動物動物動物動物病理學(xué)在獸醫(yī)學(xué)的地位病理學(xué)在獸醫(yī)學(xué)的地位 一、一、概概 述述（一）基本概念（一）基本概念1 1、動物病理學(xué)（動物病理學(xué)（動物病理學(xué)（動物病理學(xué)（animal pathologyanimal pathologyanimal pathologyanimal pathology）研究動物疾病的病因、發(fā)生機理以及患病機體內(nèi)所呈現(xiàn)的形形態(tài)態(tài)、機機能能和和代代謝謝變化，來闡明疾病發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)歸的一門基礎(chǔ)學(xué)科。目的為疾病的診斷和防治提供理論基礎(chǔ)和實踐依據(jù)。lWhat is Pathology?What is Pathology?lPathologyisthescientificstudyofdiseasewhichPathologyisthescientificstudyofdiseasewhichisconcernedwiththecausesandeffectsofisconcernedwiththecausesandeffectsofdisease,andthefunctionalandstructuralchangesdisease,andthefunctionalandstructuralchangesthatoccurduringthecourseofadisease.thatoccurduringthecourseofadisease.2 2、病理過程（、病理過程（pathological processpathological process）l 多種疾病過程中出現(xiàn)的共同的形態(tài)、功能和代謝的病理變化。l 如酸堿平衡紊亂、缺氧、水腫、發(fā)熱、休克等。l 同一疾病可以有不同的病理過程，不同的疾病可以有相同的病理過程。如嚴重肺炎可有炎癥、發(fā)熱、缺氧，甚至休克等不同的病理過程?；静±磉^程與疾病的關(guān)系基本病理過程與疾病的關(guān)系疾病疾病 原因原因 部位部位 基本病理過程基本病理過程肺肺腸腸腦膜腦膜肺炎肺炎腹瀉腹瀉腦炎腦炎肺炎鏈球菌肺炎鏈球菌大腸桿菌大腸桿菌鏈球菌鏈球菌發(fā)熱、炎癥、缺氧、發(fā)熱、炎癥、缺氧、酸堿平衡紊亂、休克酸堿平衡紊亂、休克發(fā)熱、炎癥、水電發(fā)熱、炎癥、水電、酸堿平衡紊亂、休克酸堿平衡紊亂、休克發(fā)熱、炎癥、發(fā)熱、炎癥、DIC、休克休克Pathological process:refer to a process in which some common,regular alterations of function,metabolism and structure take place in many difference diseases.e.g.Fever,shock,edema etc.3、病理狀態(tài)、病理狀態(tài)（pathologicalstate）指相對穩(wěn)定的或局部形態(tài)變化發(fā)展極慢的病理過程的指相對穩(wěn)定的或局部形態(tài)變化發(fā)展極慢的病理過程的后果；后果；如損傷后形成的瘢痕。有些病理狀態(tài)的穩(wěn)定是相對的，在一定條件下可轉(zhuǎn)變?yōu)椴±磉^程，如代償?shù)男陌昴おM窄或關(guān)閉不全（病理狀態(tài)），當心臟負荷過度增加時可傳為心力衰竭（病理過程）。4 4、病理反應(yīng)（、病理反應(yīng)（pathological reactionspathological reactions）l是機體在疾病過程中一些較病理過程更短促而又單純的形態(tài)、機能和代謝的改變。l如白細胞的增多或減少。這是診治疾病的重要依據(jù)，所以在診治疾病時，應(yīng)仔細觀察病理反應(yīng)。（二）基本內(nèi)容（二）基本內(nèi)容l盡管疾病種類繁多，但是所有的疾病，或者是不同器官的許多疾病，都可以發(fā)生一些共同的變化，都具有一些共同的規(guī)律；l而同一器官系統(tǒng)的疾病以至每一種具體的疾病，又各有其特殊的變化和特殊的規(guī)律。l動物病理學(xué)的內(nèi)容：包括總論總論和各論各論兩部分，l1、病理學(xué)總論（General PathologyGeneral Pathology）l共同基本規(guī)律共同基本規(guī)律 general,basic rulegeneral,basic rulel論述疾病過程可能出現(xiàn)的各種基本病理過程的表現(xiàn)及其發(fā)生發(fā)展的一般規(guī)律。（病理學(xué)基礎(chǔ)）l 闡述：細胞和組織損傷與修復(fù)、局部血液循環(huán)及體液循環(huán)障礙、炎癥、免疫病理和遺傳以及腫瘤等基本病理過程及其發(fā)生發(fā)展的基本規(guī)律及其本質(zhì)，以便運用這些知識去更深刻地發(fā)現(xiàn)和認識各種疾病的特殊規(guī)律和本質(zhì)。2 2、病理學(xué)各論（、病理學(xué)各論（Systemic PathologySystemic Pathology）各系統(tǒng)、器官特殊規(guī)律（系統(tǒng)病理部分）special rule of systems and organs special rule of systems and organsl 闡明各種疾病的病因、病變及其發(fā)生發(fā)展的特殊規(guī)律，研究其與臨床表現(xiàn)的關(guān)系及其對疾病防治的意義。l 運用各種方法，從整個機體直到細胞分子水平，研究疾病的原因（病因?qū)W，ethiology）、在病因作用下疾病發(fā)生發(fā)展的過程（發(fā)病學(xué)，pathogenesis）以及機體在疾病過程中的功能、代謝和形態(tài)結(jié)構(gòu)的改變（病變，patho1ogica1 changes），闡明其本質(zhì)，從而為認識和掌握疾病發(fā)生發(fā)展的規(guī)律，為防治疾病，提供必要的理論基礎(chǔ)。l 簡而言之，它是研究疾病病因、發(fā)病機制、病理變化（形態(tài)、功能、代謝）以及轉(zhuǎn)歸和后果。（三）基本任務(wù)（三）基本任務(wù)1 1、病因?qū)W（、病因?qū)W（etiologyetiology）即疾病發(fā)生的原因（即疾病發(fā)生的原因（causecause）包括外因、內(nèi)因及其相互關(guān)系。）包括外因、內(nèi)因及其相互關(guān)系。2 2、發(fā)病學(xué)（、發(fā)病學(xué)（pathogenesispathogenesis）即即在在病病因因的的作作用用下下,機機體體疾疾病病的的發(fā)發(fā)生生.發(fā)發(fā)展展的的具具體體環(huán)環(huán)節(jié)節(jié)和和過過程。程。3 3、病理變化或病變、病理變化或病變 （pathological changes or lesionspathological changes or lesions）即即在在疾疾病病發(fā)發(fā)生生發(fā)發(fā)展展過過程程中中，機機體體的的功功能能代代謝謝和和形形態(tài)態(tài)結(jié)結(jié)構(gòu)構(gòu)的的變化。變化。有有時時還還闡闡明明由由于于這這些些變變化化引引起起的的臨臨床床表表現(xiàn)現(xiàn)，稱稱臨臨床床病病理理聯(lián)聯(lián)系系 （clinico pathological correlationclinico pathological correlation）。）。4 4、疾病的轉(zhuǎn)歸和結(jié)局（疾病的轉(zhuǎn)歸和結(jié)局（resultsresults）l significance significance（意義）（意義）l effect effect（影響）（影響）l gross appearancegross appearance（眼觀變化）（眼觀變化）,l microscopic appearance microscopic appearance（鏡下變化）。（鏡下變化）。可見，發(fā)生機制所回答“為什么？”和“怎樣？”的問題：（1）患病機體形態(tài)、機能、代謝變化為什么發(fā)生？（2）疾病為什么從一個階段發(fā)展到另一個階段，各種變化之間系？（3）為什么多數(shù)病畜能恢復(fù)健康？為什么有些疾病會導(dǎo)致死亡？等，等。（四（四（四（四)病理學(xué)的范疇病理學(xué)的范疇病理學(xué)的范疇病理學(xué)的范疇主要包括三部分 1 1 1 1、病理解剖學(xué)、病理解剖學(xué)、病理解剖學(xué)、病理解剖學(xué)（pathology anatomypathology anatomy）著重從形態(tài)變化角度闡明疾病發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)歸的規(guī)律。2 2 2 2、病理生理學(xué)、病理生理學(xué)、病理生理學(xué)、病理生理學(xué) (pathology physiology)(pathology physiology)著重從功能和代謝的角度來闡明疾病發(fā)生.發(fā)展和轉(zhuǎn)歸的規(guī)律。3 3、臨床病理學(xué)、臨床病理學(xué)（clinic pathologyclinic pathology）主要畜禽常見疾病的發(fā)病機理、畜禽疾病的特征病變和病理診斷技術(shù)。病理生理學(xué)病理生理學(xué)病理解剖學(xué)病理解剖學(xué)研究角度不同研究角度不同（五）病理學(xué)在獸醫(yī)學(xué)中的地位（五）病理學(xué)在獸醫(yī)學(xué)中的地位l 動物病理學(xué)是動物醫(yī)學(xué)專業(yè)一門必修的專業(yè)基礎(chǔ)主干課程。l 最終目的是服務(wù)于動物醫(yī)學(xué)臨床實踐，為現(xiàn)代動物醫(yī)學(xué)提供理論、知識和研究方法。1 1、基礎(chǔ)基礎(chǔ)獸獸醫(yī)學(xué)與臨床醫(yī)學(xué)與臨床獸獸醫(yī)學(xué)之間的橋梁醫(yī)學(xué)之間的橋梁 （A bridge between preclinical and clinical A bridge between preclinical and clinical medicinemedicine）以解剖學(xué)、組織胚胎學(xué)、生理學(xué)、生物化學(xué)、微生物學(xué)和免疫學(xué)等學(xué)科的知識為基礎(chǔ)，研究疾病的病因、發(fā)病機理和病理改變，揭示疾病發(fā)生發(fā)展的一般規(guī)律。同時，動物病理學(xué)的基本內(nèi)容又為內(nèi)科學(xué)、外科學(xué)、產(chǎn)科、傳染病學(xué)和寄生蟲病學(xué)等學(xué)科的學(xué)習(xí)提供必要的理論基礎(chǔ)?？梢?pathology是基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)之間的一門橋梁課程，起承上啟下的作用，在醫(yī)學(xué)教學(xué)中占有重要的地位。（在醫(yī)學(xué)界，病理學(xué)長期以來被喻為“橋梁醫(yī)學(xué)”和“審判醫(yī)學(xué)”充分表明它在醫(yī)學(xué)中，特別是在臨床醫(yī)學(xué)中占有不可替代的雙重地位。）基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與與與與 臨床醫(yī)學(xué)臨床醫(yī)學(xué)臨床醫(yī)學(xué)臨床醫(yī)學(xué)的橋梁的橋梁的橋梁的橋梁預(yù)防動物醫(yī)學(xué)預(yù)防動物醫(yī)學(xué)(寄寄.傳傳)臨床動物醫(yī)學(xué)臨床動物醫(yī)學(xué)(內(nèi)內(nèi).外外.產(chǎn)產(chǎn))公共衛(wèi)生學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)動物學(xué)、解剖學(xué)、動物學(xué)、解剖學(xué)、組織胚胎學(xué)、生理學(xué)組織胚胎學(xué)、生理學(xué)生物化學(xué)、微生物學(xué)生物化學(xué)、微生物學(xué)藥理學(xué)、毒理學(xué)藥理學(xué)、毒理學(xué)免疫學(xué)、分子生物學(xué)免疫學(xué)、分子生物學(xué)細胞生物學(xué)、發(fā)育生物學(xué)細胞生物學(xué)、發(fā)育生物學(xué)病病理理學(xué)學(xué) 緒緒 論論 2 2 2 2、病理學(xué)（診斷）是最具有權(quán)威性的一級診斷病理學(xué)（診斷）是最具有權(quán)威性的一級診斷病理學(xué)（診斷）是最具有權(quán)威性的一級診斷病理學(xué)（診斷）是最具有權(quán)威性的一級診斷 病理學(xué)在動物疾病的診斷和研究上具有重要的作用。隨著獸醫(yī)科學(xué)的發(fā)展，盡管臨床診斷疾病的手段不斷增多，如影像診斷技術(shù)、實驗室化驗、內(nèi)窺鏡檢查等已廣泛應(yīng)用于臨床診斷，但病理學(xué)診斷仍是很多疾病的最后診斷。病理學(xué)通過尸體剖解、活體組織檢查和動物實尸體剖解、活體組織檢查和動物實驗驗等研究方法，直接應(yīng)用于臨床實踐，在疾病的診斷、疾病發(fā)生發(fā)展規(guī)律的闡明和臨床工作水平提高方面均具有重要地位。（國外將“法典”的病理醫(yī)生稱之為“doctordoctor s s doctordoctor”）3 3、借助病理學(xué)研究、借助病理學(xué)研究-揭示疾病規(guī)律和本質(zhì)揭示疾病規(guī)律和本質(zhì),為防治為防治疾病提供科學(xué)理論疾病提供科學(xué)理論(支撐點支撐點)Animal experiment*Laboratory research(in vitro)*Clinical investigation“As is our pathologyAs is our pathology，so is our medicineso is our medicine”二、二、動物病理學(xué)發(fā)展概要動物病理學(xué)發(fā)展概要 （一）發(fā)展簡史（一）發(fā)展簡史 病理學(xué)的發(fā)展史可以追溯到兩千多年前。病理學(xué)的發(fā)展史可以追溯到兩千多年前。公元前公元前460460前前377377，古希臘學(xué)者，古希臘學(xué)者-希波克拉底希波克拉底希波克拉底希波克拉底-HippocratesHippocratesHippocratesHippocrates，提出，提出“液體病理學(xué)液體病理學(xué)液體病理學(xué)液體病理學(xué)”；公元前公元前128年56年，Asclepiades提出提出“固體病理學(xué)固體病理學(xué)固體病理學(xué)固體病理學(xué)”為為原始的病理學(xué)原始的病理學(xué)原始的病理學(xué)原始的病理學(xué)代表；代表；它控制和影響了歐洲醫(yī)學(xué)思想它控制和影響了歐洲醫(yī)學(xué)思想長達長達20002000年之久。年之久。我國我國,以以皇帝內(nèi)經(jīng)皇帝內(nèi)經(jīng)皇帝內(nèi)經(jīng)皇帝內(nèi)經(jīng)為代表為代表,它的它的“陰陽五行陰陽五行”學(xué)說支學(xué)說支配和影響了祖國醫(yī)學(xué)配和影響了祖國醫(yī)學(xué)20002000多年。多年。病理學(xué)發(fā)展簡史歷史年代歷史年代學(xué)說學(xué)說支持的技術(shù)手段支持的技術(shù)手段創(chuàng)始人創(chuàng)始人遠古時代遠古時代萬物有靈論萬物有靈論無無公元前公元前4-5世紀世紀體液學(xué)說體液學(xué)說無無Hippocrates1500年左右年左右化學(xué)物理化學(xué)物理無無1761年年器官病理學(xué)器官病理學(xué)尸體解剖尸體解剖Giovanni Battista Morgagni 1854年年細胞病理學(xué)細胞病理學(xué)光學(xué)顯微鏡光學(xué)顯微鏡Rudolf Virchow 1930年代年代神經(jīng)生理和病理神經(jīng)生理和病理學(xué)學(xué)動物實驗動物實驗20世紀世紀60年代起年代起細胞病理學(xué)細胞病理學(xué)電子顯微鏡電子顯微鏡免疫病理學(xué)免疫病理學(xué)免疫學(xué)技術(shù)免疫學(xué)技術(shù)分子病理學(xué)分子病理學(xué)生物化學(xué)技術(shù)生物化學(xué)技術(shù)2022/10/9321、體液病理學(xué)說l古希臘名醫(yī)-希波克拉底Hippocrates，公元前460-377，根據(jù)當時希臘人認為水、土、氣、火為自然界萬物共性而提出“體體液病理學(xué)說液病理學(xué)說”認為外界因素促使人體內(nèi)血液、粘液、黃膽汁、黑液發(fā)生質(zhì)和量的某種改變形成四體液之間的比例失衡而引起疾病。Hippocrates(460-370B.C.)2 2、固體病理學(xué)、固體病理學(xué)說l此后，Asclepiades，約公元前128-56，則極力反對液體病理學(xué)說，他根據(jù)Demoeritos公元前5世紀中葉至公元前4世紀中葉的萬物皆始于不可分的原子的設(shè)想，提出固體病理提出固體病理學(xué)學(xué)說。認為人體也是由原子構(gòu)成的血液是攜帶固體的介質(zhì)。l l 這兩種觀點由于受歷史條件和唯心論的影響脫離了客觀實際因而在醫(yī)療實踐中并未能起到理論指導(dǎo)作用。l 公元1世紀以后的整個中世紀的歐洲科學(xué)被禁錮在神學(xué)之中達1000多年之久使科學(xué)活動蒙受挫折嚴重地阻礙了醫(yī)學(xué)事業(yè)的發(fā)展。3、解剖學(xué)和生理學(xué)發(fā)展為病理學(xué)建立良好開端解剖學(xué)和生理學(xué)發(fā)展為病理學(xué)建立良好開端l直至15-16世紀，歐洲歷史上稱為文藝復(fù)興時代，自然科學(xué)在各個領(lǐng)域中才又興旺起來，病理學(xué)也迎來了發(fā)芽開花的春天。文藝復(fù)興時，維薩里(VesaliusA)建立人體解剖學(xué)維薩里(Vesalius，A.15141564)l1543年出版人體的構(gòu)造l維薩里第一次與蓋侖相反地描述了靜脈和人類心臟的解剖。人體解剖活動的奠基人：維薩里人體解剖活動的奠基人：維薩里17世紀人體生理學(xué)建立-以哈維(Harvey W)發(fā)現(xiàn)血液循環(huán)為標志哈維哈維(Harvey，W15781657)1628年年,論動物心臟與血液運動的解剖學(xué)研究論動物心臟與血液運動的解剖學(xué)研究哈維細心地計算了心臟的容量，心臟流出的血量哈維細心地計算了心臟的容量，心臟流出的血量和回心血量，血液流動時間。和回心血量，血液流動時間。證明心臟是血證明心臟是血液循環(huán)的原動力。液循環(huán)的原動力。1.左右心室各容血液二英兩左右心室各容血液二英兩2.脈搏每分鐘脈搏每分鐘72次次3.一小時脈搏一小時脈搏72604320次次4.一小時內(nèi)，從左心室流入主動脈的血量和有一小時內(nèi)，從左心室流入主動脈的血量和有心室流入肺動脈的血量就分別為心室流入肺動脈的血量就分別為243208640英兩，約合英兩，約合540磅磅Harvey 157816574 4、器官病理學(xué)、器官病理學(xué) 真真正正的的病病理理學(xué)學(xué)起起源源于于文文藝藝復(fù)復(fù)興興時時期期意意大大利利的的解解剖學(xué)院剖學(xué)院。直到18世紀中后期，1761年，意大利臨床醫(yī)學(xué)家莫莫爾爾加加尼尼-Morgagni（1682-1771），根據(jù)一生所經(jīng)歷過的約700例病人的尸檢記錄和臨床癥狀發(fā)表：器官病理學(xué)器官病理學(xué)一書 器器官官病病理理學(xué)學(xué)的的問問世世標標志志著著病病理理形形態(tài)態(tài)學(xué)學(xué)的的開開端端，是古代醫(yī)學(xué)向現(xiàn)代醫(yī)學(xué)發(fā)展的一個轉(zhuǎn)折點是古代醫(yī)學(xué)向現(xiàn)代醫(yī)學(xué)發(fā)展的一個轉(zhuǎn)折點。18世紀意大利病理學(xué)家-莫爾加尼莫爾加尼l論疾病的位置和原因l一切疾病的發(fā)生都有一定的位置。只有臟器變化才是疾病的真正原因。l把“病灶”和臨床癥狀聯(lián)系起來，西醫(yī)診斷學(xué)才開始找病灶，這種思想影響至今。在解剖大量尸體的基礎(chǔ)上，解剖學(xué)家和外科醫(yī)生就有機會在解剖大量尸體的基礎(chǔ)上，解剖學(xué)家和外科醫(yī)生就有機會認識到器官異常，因此病理解剖開始出現(xiàn)了。認識到器官異常，因此病理解剖開始出現(xiàn)了。病理解剖學(xué)的創(chuàng)始人病理解剖學(xué)的創(chuàng)始人Morgagni,Giovanni Battista（1682-1771）17621762年年,在在法法國國里里昂昂（LyonLyon）成成立立了了第第一一所所獸獸醫(yī)學(xué)校。醫(yī)學(xué)校。倫敦皇家獸醫(yī)學(xué)院-John Hunter（17281793）對血管病理的治療研究,他是第一個認識到微血管在炎癥過程中的重要性;加拿大蒙特利爾獸醫(yī)學(xué)院的教授-Wiliam Osler對血小板的發(fā)現(xiàn)及研究,都是在這個時期。病理學(xué)病理學(xué)專著專著l 19世紀初，隨著顯顯微微鏡鏡技技術(shù)術(shù)、切切片片染染色色及及組組織織學(xué)學(xué)方方法法的相繼問世，使人們有可能對各種疾病過程中所表現(xiàn)的形態(tài)學(xué)變化進行比較深入的觀察。l 奧地利病理學(xué)家-Rokitansky(18041878)根據(jù)他對84000多例尸體解剖的觀察資料，撰寫了第一部病病理理解解剖剖學(xué)學(xué)巨著，豐富了器官病理學(xué)的內(nèi)容。l 法國學(xué)者ClaudClaud Bernard Bernard(1813-1902)(1813-1902)首先采用了實驗生理學(xué)的方法研究疾病時的機能障礙及發(fā)生機制，編寫了病病理理生生理理學(xué)學(xué)講講義義，敘述了病理機能實驗的方法，此即病理生理學(xué)的始基。5 5、細胞病理學(xué)創(chuàng)立細胞病理學(xué)創(chuàng)立l現(xiàn)代醫(yī)學(xué)病理學(xué)起源于現(xiàn)代醫(yī)學(xué)病理學(xué)起源于1919世紀世紀8080年代。年代。l 德國病理學(xué)家魏爾嘯魏爾嘯Virchow(18121902)，18481848年年出版細胞病理學(xué)細胞病理學(xué)：提出細胞是生命細胞是生命的基本單位，細胞的形態(tài)改變和細胞的機能障礙的基本單位，細胞的形態(tài)改變和細胞的機能障礙是一切疾病的基礎(chǔ)是一切疾病的基礎(chǔ)。創(chuàng)立了細胞病理學(xué)說l 細胞病理學(xué)問世是病理學(xué)發(fā)展史上具有深遠影響的里程碑。這不僅對病理學(xué)而且對整個醫(yī)學(xué)的發(fā)展作出了具有歷史意義的劃時代的貢獻。17世紀-顯微鏡發(fā)明l胡克(Hooke,1635-1703)，顯微鏡學(xué)，1665l格魯(Grew)，植物的解剖學(xué)1682l馬爾皮基(Malpighi,1628-1694)、發(fā)現(xiàn)毛細血管存在，1661l雷文虎克(Leeuwenhoek,1632-1723)，闡明了毛細血管的功能，于1683年首次在顯微鏡下發(fā)現(xiàn)“細菌”l斯邁丹(Swammerdan,1637-1680)，神經(jīng)肌肉的生理學(xué)實驗 顯微鏡的發(fā)明和利用，大大擴充了人類的視野，把人類的視覺顯微鏡的發(fā)明和利用，大大擴充了人類的視野，把人類的視覺由宏觀引入到微觀，了解到動物體內(nèi)細微結(jié)構(gòu)。由宏觀引入到微觀，了解到動物體內(nèi)細微結(jié)構(gòu)。Robert Hooks microscope施萊登和施旺l19世紀德國動物學(xué)家施旺(SchwannTh)和植物學(xué)家施萊登(SchleidenMJ)創(chuàng)立細胞學(xué)說，為微爾嘯的研究創(chuàng)造了條件施萊登施萊登(Schleiden，MJ 1804-1881)和施旺和施旺(Schwann，Th 1810-1882)微爾嘯l局限忽視了全身性反應(yīng)；忽視了病理現(xiàn)象的發(fā)展過程；忽視局部與全身的關(guān)系，這都是機械唯物主義在理論概括中的反映他把細胞視為基本自主的生命單位，但否認神經(jīng)系統(tǒng)在機體中的主導(dǎo)作用，是對細胞作用的過高估計。微爾嘯微爾嘯(Virchow，R1821-1902)創(chuàng)立細胞病理學(xué)創(chuàng)立細胞病理學(xué)l將顯微技術(shù)和細胞學(xué)的成果應(yīng)用于病理形態(tài)學(xué)研究，使人類對機體結(jié)構(gòu)和疾病形態(tài)改變的認識由組織水平深入到細胞層次，從而確認了疾病的微細物質(zhì)基礎(chǔ)，充實和發(fā)展了形態(tài)病理學(xué)，開辟了病理學(xué)的新領(lǐng)域。l 20 20世紀初，世紀初，William Welsh William Welsh 將系統(tǒng)病理學(xué)帶到了北美將系統(tǒng)病理學(xué)帶到了北美，他和他的學(xué)生們在獸醫(yī)病理學(xué)界影響很大，許多病理學(xué)家都受訓(xùn)于他的醫(yī)學(xué)機構(gòu)。l 后來出現(xiàn)的William Feldman 也是一位杰出的獸醫(yī)病理學(xué)家，他于19481948年與來自美國和加拿大的一批病理學(xué)家年與來自美國和加拿大的一批病理學(xué)家一起共同創(chuàng)立了一起共同創(chuàng)立了美國獸醫(yī)病理學(xué)院美國獸醫(yī)病理學(xué)院。l 這些病理學(xué)家及其機構(gòu)對于獸醫(yī)病理學(xué)的學(xué)科發(fā)展起到獸醫(yī)病理學(xué)的學(xué)科發(fā)展起到了重要的作用。了重要的作用。l從1953年DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn)，細胞超微結(jié)構(gòu)吸引病理學(xué)家將目光集中到DNA，努力探求每種疾病是否與細胞中特定的基因表達有關(guān)，基因水平的疾病定位診斷標準指日可待。6.分子病理學(xué)的開始l 我國秦漢時期的黃帝內(nèi)經(jīng)、隋唐時代巢元方根據(jù)臨床觀察所著的諸病源侯論、南宋時期宋慈的洗冤集錄等世界名著十分細致地記載了疾病的病原和征侯對病理學(xué)的發(fā)展做出了很大的貢獻。l 其后，中國醫(yī)學(xué)由于長期受封建制度的束縛一直未能建立起具有中國特點的病理學(xué)。l 病理學(xué)的研究已深入到亞細胞領(lǐng)域和分子水平，并從過去的經(jīng)典病理形態(tài)進入到與細胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)及遺傳學(xué)等新興基礎(chǔ)學(xué)科互相滲透的新階段，出現(xiàn)了:l超微病理學(xué)（超微病理學(xué)（ultrastrctural pathologyultrastrctural pathology）、）、l分子病理學(xué)（分子病理學(xué)（molecular pathology)molecular pathology)l免疫病理學(xué)免疫病理學(xué)(immunopathology)(immunopathology)、l遺傳病理學(xué)遺傳病理學(xué)(genetic pathology(genetic pathology）l診斷病理學(xué)等診斷病理學(xué)等 等新分支學(xué)科，（二）（二）現(xiàn)代病理學(xué)的特點 隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，病理學(xué)的研究方法隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，病理學(xué)的研究方法和手段也日趨進步。和手段也日趨進步。由于電子顯微鏡技術(shù)的建立和隨后發(fā)明的生物組織超薄切片技術(shù)、相差顯微和偏光顯微技術(shù)、顯微分光光度法、X射線衍射、細胞化學(xué)、細胞勻漿、梯度離心、細胞培養(yǎng)、免疫熒光、免疫電鏡、放射自顯影、掃描電鏡、酶標等研究方法和實驗技術(shù)，使病理學(xué)的研究從細胞水平進入亞細胞水平和分子水平，使人們能從代謝、機能和形態(tài)改變等方面來認識疾病地發(fā)生和發(fā)展。l隨著現(xiàn)代科學(xué)日新月異的發(fā)展許多高新技術(shù)正在不斷地，從而使常規(guī)的病理形態(tài)學(xué)觀察發(fā)展到宏觀與微觀結(jié)合宏觀與微觀結(jié)合起來進行研究，以及定性和定量結(jié)合起來進行研究，以及定性和定量結(jié)合，從而能獲得大量的更多、更全、更新的疾病信息能大大加深人們對疾病本質(zhì)的認識促進病理學(xué)研究走向更深的層次。免疫組化及免疫組化及 分子生分子生 肉眼肉眼光學(xué)顯微鏡光學(xué)顯微鏡 電子顯微鏡電子顯微鏡 免疫電鏡免疫電鏡 物物學(xué)技術(shù)學(xué)技術(shù) 器官病變器官病變 組織及病變組織及病變 細胞超微病變細胞超微病變 細胞內(nèi)大分細胞內(nèi)大分基因基因組織組織 細胞細胞 子結(jié)構(gòu)改變子結(jié)構(gòu)改變 蛋白蛋白 宏觀宏觀微觀微觀 簡單簡單復(fù)雜復(fù)雜l1、研究手段、方法研究手段、方法快速、準確、精細快速、準確、精細 超微病理學(xué)、分子病理學(xué)大發(fā)展超微病理學(xué)、分子病理學(xué)大發(fā)展 2、研究思路上、研究思路上“三結(jié)合三結(jié)合”多學(xué)科融合、滲透多學(xué)科融合、滲透 大病理大病理1 1、超微病理學(xué)、超微病理學(xué)l 從光學(xué)顯微鏡下的細胞病理學(xué)發(fā)展到電子顯微鏡下的超微病理學(xué)是病理學(xué)的一個大飛躍。l 主要從細胞器水平研究疾病時的細胞損傷這不僅使我們能從形態(tài)學(xué)上更加深刻地認識和鑒別疾病而且能從形態(tài)與功能相結(jié)合的角度去更深入地研究疾病的發(fā)生與發(fā)展。2 2、分子病理學(xué)、分子病理學(xué)l將病理學(xué)與細胞生物學(xué)和生物化學(xué)結(jié)合起來在分子水平研究疾病發(fā)生機理的一門病理學(xué)分支。l分子病理學(xué)的發(fā)展將對疾病發(fā)病機理的認識以及為預(yù)防和治療措施提供更深透、更精確的理論。3 3、免疫病理學(xué)、免疫病理學(xué)l將免疫學(xué)基本理論和方法引入病理學(xué)借以闡述許多疾病的病因及發(fā)病機理的病理學(xué)分支。l 如采用免疫熒光法、免疫過氧化物酶法和免疫電鏡法等研究疾病從而揭示出一批未曾被人們認識的與免疫反應(yīng)有關(guān)的疾病等。4 4、遺傳病理學(xué)、遺傳病理學(xué)l研究遺傳因素在疾病發(fā)生發(fā)展中的作用及其所引起疾病的一個病理學(xué)分支。l隨著越來越多的基因定位和功能的闡明，使遺傳性疾病的研究進入了細胞遺傳學(xué)和分子遺傳學(xué)新領(lǐng)域?qū)τ谶z傳性疾病的病因和本質(zhì)的了解達到了新的水平5、實驗病理學(xué)、實驗病理學(xué)l以實驗方法研究疾病的原因、發(fā)生發(fā)展過程及其發(fā)病機理的病理學(xué)分支其目的在于認識疾病的本質(zhì)。l實驗病理學(xué)可彌補普通病理學(xué)不能全面地了解疾病發(fā)生發(fā)展的全過程，尤其難以研究某些疾病的病因?qū)W、發(fā)病機理、形態(tài)發(fā)生學(xué)以及形態(tài)與功能改變的聯(lián)系的缺陷使人們有可能主動地研究疾病發(fā)生發(fā)展的全過程。l實驗病理學(xué)包括體內(nèi)實驗和體外實驗兩種。6、診斷病理學(xué)、診斷病理學(xué)（Diagnostic Pathology）ll 根據(jù)病理形態(tài)改變及其它各種輔助手段，如電鏡、組織化學(xué)、免疫組織化學(xué)、DNA分析及分子生物學(xué)技術(shù)為臨床提供更精確的病理診斷，是病理學(xué)的一個最大分支。l 診斷病理學(xué)是一門以組織形態(tài)學(xué)為基礎(chǔ)的科學(xué),隨著現(xiàn)代科學(xué)的應(yīng)用,目前正處于從單純組織形態(tài)學(xué)時代轉(zhuǎn)向從病理標本中采集各種信息進行綜合分析診斷的新時代。l 三、病理學(xué)研究基本方法三、病理學(xué)研究基本方法（一）尸體剖檢尸體剖檢 (autopsy)（二）組織觀察組織觀察(histopathological slide)（三）細胞培養(yǎng)細胞培養(yǎng) (cell culture)（四）動物實驗動物實驗 (experimental with animal)（一）尸體剖檢（一）尸體剖檢(簡稱尸檢，簡稱尸檢，autopsyautopsy）l尸體剖檢尸體剖檢 是運用病理解剖學(xué)知識檢查尸體各組織器官的病理變化。l動物發(fā)病或死亡后，對其進行解剖檢查，運用病理學(xué)和其他學(xué)科的知識診斷疾病的技術(shù)，稱為尸體剖檢技術(shù)尸體剖檢技術(shù)。l 目的與意義目的與意義l 目的在于查明動物發(fā)病和致死的原因，以及闡明疾病發(fā)生和發(fā)展的規(guī)律。尸體剖檢資料的積累，也可為各種疾病的綜合研究提供重要的依據(jù)。l 尸體剖檢在獸醫(yī)臨床上具有很重要的地位，通過尸體剖檢，可以直接觀察死亡動物尸體各器官的病理變化，初步判斷死亡的原因，迅速對疾病作出診斷。l 在臨床實踐中，特別是對傳染性疾病的防治，具有重大實際意義。如仔豬梭菌性腸炎的診斷可仔豬梭菌性腸炎的診斷可 根根根根據(jù)據(jù)據(jù)據(jù)流流流流行行行行病病病病學(xué)學(xué)學(xué)學(xué)及及及及癥癥癥癥狀狀狀狀:發(fā)發(fā)發(fā)發(fā)生生生生于于于于l l l l周周周周齡齡齡齡仔仔仔仔豬豬豬豬 紅紅紅紅色色色色下下下下 痢痢痢痢、病病病病程程程程短短短短 、死死死死亡亡亡亡率率率率高高高高 病病病病變變變變的的的的特特特特點點點點:腸腸腔腔充充滿滿含含血血液液體體 壞死性腸炎壞死性腸炎（二）（二）組織觀察組織觀察組織觀察組織觀察1 1 1 1、組織病理觀察、組織病理觀察、組織病理觀察、組織病理觀察 制制備備病病理理組組織織切切片片（histopathologicalhistopathological slideslide）或或?qū)⒚撁撁撁撀渎渎渎浼毤毤毤毎浦浦浦瞥沙沙沙赏客客客科?，?jīng)經(jīng)不不同同方方法法染染色色后后，最最常常用用-蘇蘇木木素素伊伊紅紅染染色色（染染色色），在在在在光光光光學(xué)學(xué)學(xué)學(xué)顯顯顯顯微微微微鏡鏡鏡鏡下下下下,通通通通過過過過觀觀觀觀察察察察器器器器官官官官的組織病理學(xué)變化的組織病理學(xué)變化的組織病理學(xué)變化的組織病理學(xué)變化,對疾病作出診斷對疾病作出診斷對疾病作出診斷對疾病作出診斷。2 2 2 2、體組織檢查、體組織檢查、體組織檢查、體組織檢查(Biopsy,(Biopsy,(Biopsy,(Biopsy,簡稱活檢簡稱活檢)即即即即用用用用局局局局部部部部切切切切取取取取、細細細細針針針針吸吸吸吸取取取取、鉗鉗鉗鉗取取取取和和和和手手手手術(shù)術(shù)術(shù)術(shù)摘摘摘摘取取取取等等等等方方方方法法法法，從從從從患病動物活體獲取病變組織進行病理檢查等患病動物活體獲取病變組織進行病理檢查等患病動物活體獲取病變組織進行病理檢查等患病動物活體獲取病變組織進行病理檢查等。3 3、細胞學(xué)檢查、細胞學(xué)檢查(CytilogyCytilogy)通通過過采采取取病病變變處處脫脫落落的的細細胞胞,涂涂片片染染色色后后進進行行細細胞胞學(xué)學(xué)檢檢查查。如如取取血血液液制制作作成成血血細細胞胞涂涂片片,取取口口腔腔分分泌泌物物、消消化化道道排排泄泄物物等等等等作作涂涂/抹抹片片,直直接接或或經(jīng)經(jīng)染染色色后后在在顯顯微微鏡下觀察。鏡下觀察。病病病病理理理理剖剖剖剖檢檢檢檢、組組組組織織織織病病病病理理理理檢檢查查、活活活活檢檢檢檢是是是是病病病病理理理理診診診診斷斷斷斷中中中中最最最最基基基基本、最重要、最常用的方法本、最重要、最常用的方法本、最重要、最常用的方法本、最重要、最常用的方法.。國國國國外外外外把把把把這這這這三三三三種種種種研研研研究究究究方方方方法法法法喻喻喻喻為為為為病病病病理理理理科科科科室室室室和和和和病病病病理理理理醫(yī)醫(yī)醫(yī)醫(yī)學(xué)的學(xué)的學(xué)的學(xué)的“ABCABCABCABC”。（三）三）三）三）細胞培養(yǎng)細胞培養(yǎng)細胞培養(yǎng)細胞培養(yǎng) 指指指指從從從從動動動動物物物物體體體體內(nèi)內(nèi)內(nèi)內(nèi)采采采采取取取取活活活活組組組組織織織織或或或或單單單單細細細細胞胞胞胞,用用用用適適適適宜宜宜宜的的的的培培培培養(yǎng)養(yǎng)養(yǎng)養(yǎng)基基基基(液液液液)和和和和創(chuàng)創(chuàng)創(chuàng)創(chuàng)造造造造相相相相似似似似于于于于體體體體內(nèi)內(nèi)內(nèi)內(nèi)的的的的其其其其他他他他條條條條件件件件,在在在在體體體體外外外外進進進進行行行行培培培培養(yǎng)養(yǎng)養(yǎng)養(yǎng)并并并并進進進進行行行行各各各各種種種種研研研研究究究究的的的的技技技技術(shù)術(shù)術(shù)術(shù)方方方方法法法法。此此此此類類類類方方方方法法法法是是是是生生生生物物物物醫(yī)醫(yī)醫(yī)醫(yī)學(xué)學(xué)學(xué)學(xué)各各各各個個個個領(lǐng)領(lǐng)領(lǐng)領(lǐng)域常用的研究技術(shù)之一。域常用的研究技術(shù)之一。域常用的研究技術(shù)之一。域常用的研究技術(shù)之一。在病理學(xué)研究中，此方法可以研究在各種病因的作用下細胞、組織病變的發(fā)生和發(fā)展的動態(tài)過程和規(guī)律。根據(jù)研究的目的和條件的不同，培養(yǎng)的標本可以是細胞水平的，也可以是組織水平。研究腫瘤代謝、腫瘤分類、病毒病的診斷及發(fā)病機理等研究。l細胞培養(yǎng)的優(yōu)點細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:l l 體外培養(yǎng)條件單純體外培養(yǎng)條件單純體外培養(yǎng)條件單純體外培養(yǎng)條件單純?nèi)菀卓刂疲梢员苊怏w內(nèi)復(fù)雜容易控制，可以避免體內(nèi)復(fù)雜容易控制，可以避免體內(nèi)復(fù)雜容易控制，可以避免體內(nèi)復(fù)雜因素的干擾，故有利于分析結(jié)果和得出結(jié)論。而且比動因素的干擾，故有利于分析結(jié)果和得出結(jié)論。而且比動因素的干擾，故有利于分析結(jié)果和得出結(jié)論。而且比動因素的干擾，故有利于分析結(jié)果和得出結(jié)論。而且比動物實驗和本體觀察周期短物實驗和本體觀察周期短物實驗和本體觀察周期短物實驗和本體觀察周期短見效快見效快見效快見效快節(jié)省時間、節(jié)省開節(jié)省時間、節(jié)省開節(jié)省時間、節(jié)省開節(jié)省時間、節(jié)省開支。支。支。支。l 細胞培養(yǎng)的細胞培養(yǎng)的缺點缺點:l 畢竟體外人工環(huán)境與體內(nèi)環(huán)境有區(qū)別，而且是脫離了體外人工環(huán)境與體內(nèi)環(huán)境有區(qū)別，而且是脫離了體外人工環(huán)境與體內(nèi)環(huán)境有區(qū)別，而且是脫離了體外人工環(huán)境與體內(nèi)環(huán)境有區(qū)別，而且是脫離了機體整體的神經(jīng)機體整體的神經(jīng)機體整體的神經(jīng)機體整體的神經(jīng)體液等因素的調(diào)控，所以其研究結(jié)果體液等因素的調(diào)控，所以其研究結(jié)果體液等因素的調(diào)控，所以其研究結(jié)果體液等因素的調(diào)控，所以其研究結(jié)果不可能與體內(nèi)過程完全一致不可能與體內(nèi)過程完全一致不可能與體內(nèi)過程完全一致不可能與體內(nèi)過程完全一致。l 另外，體外培養(yǎng)要求一定的設(shè)備體外培養(yǎng)要求一定的設(shè)備嚴格的環(huán)境和技術(shù)嚴格的環(huán)境和技術(shù)條件，一般實驗室不易達到。條件，一般實驗室不易達到。l原原代代培培養(yǎng)養(yǎng)：由由體體內(nèi)內(nèi)直直接接取取出出組組織織或或細細胞胞進進行行培培養(yǎng)養(yǎng)。優(yōu)優(yōu)點點：離離體體時時間間短短遺遺傳傳性性和和體體內(nèi)內(nèi)組組織織相相似似。宜宜作作細胞形態(tài)，機能，分化研究。細胞形態(tài)，機能，分化研究。l傳代培養(yǎng)：傳代培養(yǎng)：把細胞自原代培養(yǎng)的培養(yǎng)瓶中分離、把細胞自原代培養(yǎng)的培養(yǎng)瓶中分離、稀釋而移至另一新的培養(yǎng)瓶中的操作程序即為傳稀釋而移至另一新的培養(yǎng)瓶中的操作程序即為傳代或再培養(yǎng)。以便持續(xù)培養(yǎng)，得到大量同種細胞，代或再培養(yǎng)。以便持續(xù)培養(yǎng)，得到大量同種細胞，細胞株，維持細胞種延續(xù)。細胞株，維持細胞種延續(xù)。圖圖 食管癌細胞系腫瘤細胞培養(yǎng)圖片食管癌細胞系腫瘤細胞培養(yǎng)圖片 圖圖 體外神經(jīng)干細胞培養(yǎng)體外神經(jīng)干細胞培養(yǎng)（四）（四）（四）（四）動物實驗動物實驗動物實驗動物實驗(animalstudy)在在人人為為控控制制條條件件下下,運運用用動動物物實實驗驗的的方方法法,在在適適宜宜動動物物身身上上復(fù)復(fù)制制動動物物和和人人類類的的某某些些疾疾病病的的模模型型；是是生生物物醫(yī)醫(yī)學(xué)學(xué)的的各各個個領(lǐng)域均可利用的技術(shù)方法之一領(lǐng)域均可利用的技術(shù)方法之一。通通過過疾疾病病復(fù)復(fù)制制過過程程可可以以研研究究疾疾病病的的病病因因?qū)W學(xué)、發(fā)發(fā)病病學(xué)學(xué)、病病理理變變化化及及疾疾病病的的轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)歸歸。并并可可根根據(jù)據(jù)研研究究的的需需要要,對對其其進進行行各各種種方式的觀察研究。方式的觀察研究。l病理學(xué)的研究不僅還需沿用最基本的對病變的檢查。而且還將放射自顯影技術(shù)、顯微分光技術(shù)、形態(tài)測量圖像分析技術(shù)、分析電鏡技術(shù)、流式細胞儀FCM技術(shù)多聚酶鏈反應(yīng)PCR技術(shù)、分子原位雜交技術(shù)和原位PCR技術(shù)等與病理學(xué)研究結(jié)合起來。四、四、現(xiàn)代病理實驗技術(shù)現(xiàn)代病理實驗技術(shù)(一一)組織細胞化學(xué)組織細胞化學(xué) (hitochemistry or cytochemistry)(hitochemistry or cytochemistry)(二二)免疫組織化學(xué)免疫組織化學(xué)(immunohistochemistry)(immunohistochemistry)免疫熒光、免疫酶標免疫熒光、免疫酶標 膠體金標記技術(shù)膠體金標記技術(shù) (三三)超微結(jié)構(gòu)超微結(jié)構(gòu) (ultrastructural observation)(ultrastructural observation)(四四)流式細胞術(shù)流式細胞術(shù) (flow cytometry,FCM)(flow cytometry,FCM)(五五)圖象分析技術(shù)圖象分析技術(shù) (image analysis)(image analysis)(六六)分子生物學(xué)技術(shù)分子生物學(xué)技術(shù):重組重組DNADNA技術(shù)、核酸分子雜交技術(shù)、技術(shù)、核酸分子雜交技術(shù)、原位雜交（原位雜交（in situ hybridization,ISHin situ hybridization,ISH）聚合酶鏈反應(yīng)聚合酶鏈反應(yīng)（PCR)技術(shù)(一一)組織細胞化學(xué)組織細胞化學(xué) 應(yīng)應(yīng)用用某某些些能能與與組組織織細細胞胞某某些些化化學(xué)學(xué)成成分分進進行行特特異異性性結(jié)結(jié)合合的的顯顯色色試試劑劑,顯顯示示組組織織細細胞胞內(nèi)內(nèi)某某些些化化學(xué)學(xué)成成分分(如如蛋蛋白白質(zhì)質(zhì)、酶類、核酸、糖原、脂肪等酶類、核酸、糖原、脂肪等)的變化的變化。其中,觀察組織切片的稱稱組組織織化化學(xué)學(xué)(histochemistryhistochemistry),觀察涂抹細胞或培養(yǎng)細胞的稱細胞化學(xué)(cytochemistry)。優(yōu)點:可在原位反映出組織細胞化學(xué)成分的變化,初步把純形態(tài)觀察與機能代謝聯(lián)系起來,能加深對疾病本質(zhì)的認識。另外也有利于病變的鑒別診斷。（二）（二）免疫組織化學(xué)免疫組織化學(xué) (免疫細胞化學(xué)免疫細胞化學(xué))。用用標標記記的的抗抗體體（或或抗抗原原）對對細細胞胞或或組組織織內(nèi)內(nèi)的的相相應(yīng)應(yīng)抗抗原原（或或抗抗體體）的的分分布布進進行行細細胞胞和和組組織織原原位位的的定定性性、定定位位或或定定量量檢檢測測，經(jīng)經(jīng)過過組組織織化化學(xué)學(xué)的的呈呈色色反反映映之之后后，用用顯顯微鏡、熒光顯微鏡或電子顯微鏡觀察微鏡、熒光顯微鏡或電子顯微鏡觀察。根據(jù)標記物的不同，可分為根據(jù)標記物的不同，可分為根據(jù)標記物的不同，可分為根據(jù)標記物的不同，可分為:（1 1 1 1）免疫熒光）免疫熒光）免疫熒光）免疫熒光 （2 2 2 2）免疫酶標）免疫酶標）免疫酶標）免疫酶標 （3 3 3 3）膠體金標記技術(shù)。）膠體金標記技術(shù)。）膠體金標記技術(shù)。）膠體金標記技術(shù)。對研究感染性疾病發(fā)病機理具有重要作用。對研究感染性疾病發(fā)病機理具有重要作用。鵝副粘病毒人工感染鵝脾臟鵝副粘病毒人工感染鵝脾臟.箭頭示陽性染色的網(wǎng)狀細胞箭頭示陽性染色的網(wǎng)狀細胞（三）熒光原位分子雜交技術(shù)（三）熒光原位分子雜交技術(shù)l（Fluorescence in situ Hybridization）的發(fā)展為研究染）的發(fā)展為研究染色體上色體上DNA的序列提供了一個最直接的方法。具有經(jīng)濟、的序列提供了一個最直接的方法。具有經(jīng)濟、安全、快速、穩(wěn)定，靈敏度高，多彩安全、快速、穩(wěn)定，靈敏度高，多彩FISH可在同一核內(nèi)顯可在同一核內(nèi)顯示兩種或多種序列，還可對間期核染色體進行研究；應(yīng)用示兩種或多種序列，還可對間期核染色體進行研究；應(yīng)用不同的探針可顯示某一物種的全部基因，某一染色體染色不同的探針可顯示某一物種的全部基因，某一染色體染色片段及單拷貝序列；片段及單拷貝序列；l 結(jié)合共焦激光顯微鏡可對間期核及染色體進行三維結(jié)構(gòu)研結(jié)合共焦激光顯微鏡可對間期核及染色體進行三維結(jié)構(gòu)研究，究，精確檢測雜交信號優(yōu)點。精確檢測雜交信號優(yōu)點。免疫熒光顯微鏡技術(shù)免疫熒光顯微鏡技術(shù)（(四四四四)超微結(jié)構(gòu)觀察超微結(jié)構(gòu)觀察超微結(jié)構(gòu)觀察超微結(jié)構(gòu)觀察 運運用用透透射射和和掃掃描描電電子子顯顯微微鏡鏡技技術(shù)術(shù),對對組組織織細細胞胞的的內(nèi)內(nèi)部部及及表表面面的的超超微微結(jié)結(jié)構(gòu)構(gòu)進進行行觀觀測測,從從亞亞組組織織(細細胞胞器器)甚甚至至是是大大分分子子水水平平上上了了解解組組織織細細胞胞的的形形態(tài)態(tài)和和機機能能變變化化,使使使使之之之之對對對對某某某某些些些些疾疾疾疾病病病病的的的的診診診診斷和鑒別診斷更加確切斷和鑒別診斷更加確切斷和鑒別診斷更加確切斷和鑒別診斷更加確切,而且更能加深對疾病本質(zhì)的認識而且更能加深對疾病本質(zhì)的認識而且更能加深對疾病本質(zhì)的認識而且更能加深對疾病本質(zhì)的認識。將免疫組織化學(xué)與電鏡技術(shù)結(jié)合可形成免疫電鏡技術(shù)，使超微結(jié)構(gòu)觀察對細胞內(nèi)一些物質(zhì)的定位定性，以及病毒的感染和復(fù)制部位等得到顯示。超超超超微微微微病病病病理理理理學(xué)學(xué)學(xué)學(xué)觀觀觀觀察察察察有有有有其其其其局局局局限限限限性性性性：由于放大倍率太高,只見局部不見全局,加之許多超微結(jié)構(gòu)變化沒有特異性,常給診斷帶來困難。因因因因此此此此，必必必必須須須須以以以以肉肉肉肉眼眼眼眼組組組組織織織織學(xué)學(xué)學(xué)學(xué)病病病病變變變變?yōu)闉闉闉榛A(chǔ)礎(chǔ)礎(chǔ)礎(chǔ)，宏宏宏宏觀觀觀觀與與與與微微微微觀觀觀觀密密密密切切切切結(jié)結(jié)結(jié)結(jié)合合合合,才才才才能能能能更更更更好好好好地地地地發(fā)發(fā)發(fā)發(fā)揮揮揮揮其其其其優(yōu)優(yōu)優(yōu)優(yōu)勢勢勢勢,起起起起到到到到較較較較重重重重要要要要的的的的輔輔輔輔助診斷作用。助診斷作用。助診斷作用。助診斷作用。電子顯微鏡檢查電子顯微鏡檢查 l電子顯微鏡（電子顯微鏡（electron microsocope）簡稱電鏡，是）簡稱電鏡，是以電子束為照明源，通過電子流對生物樣品的透射以及以電子束為照明源，通過電子流對生物樣品的透射以及電磁透鏡的多級放大后的熒光屏上成像的大型精密儀電磁透鏡的多級放大后的熒光屏上成像的大型精密儀l透射式電鏡（透射式電鏡（transmission electron microscope,TEM）l掃描式電鏡（掃描式電鏡（scanning electron microscope,SEM）l 電子顯微鏡技術(shù)使病理學(xué)對疾病的認識，從組織細胞的光電子顯微鏡技術(shù)使病理學(xué)對疾病的認識，從組織細胞的光鏡水平深入到細胞內(nèi)的超微結(jié)構(gòu)水平，它可觀察細胞內(nèi)的細鏡水平深入到細胞內(nèi)的超微結(jié)構(gòu)水平，它可觀察細胞內(nèi)的細胞器、細胞骨架或大分子水平的變化，在疾病的病理診斷中，胞器、細胞骨架或大分子水平的變化，在疾病的病理診斷中，已得到廣泛的應(yīng)用。已得到廣泛的應(yīng)用。透射電鏡漿細胞超微結(jié)構(gòu)透射電鏡漿細胞超微結(jié)構(gòu)掃描電鏡血細胞掃描電鏡血細胞(五五五五)流式細胞術(shù)流式細胞術(shù)流式細胞術(shù)流式細胞術(shù) 其其其其原原原原理理理理是是是是將將將將特特特特殊殊殊殊處處處處理理理理的的的的細細細細胞胞胞胞懸懸懸懸液液液液經(jīng)經(jīng)經(jīng)經(jīng)過過過過一一一一細細細細管管管管,同同同同時時時時用用用用特特特特殊殊殊殊光光光光線線線線照照照照射射射射,當當當當細細細細胞胞胞胞通通通通過過過過時時時時,光光光光線線線線發(fā)發(fā)發(fā)發(fā)生生生生不不不不同同同同角角角角度度度度的的的的散散散散射射射射,經(jīng)經(jīng)經(jīng)經(jīng)檢檢檢檢測測測測器器器器變變變變?yōu)闉闉闉殡婋婋婋娪嵱嵱嵱嵦柼柼柼?再再再再經(jīng)經(jīng)經(jīng)經(jīng)電電電電子子子子計計計計算算算算機機機機貯貯貯貯存存存存分分分分析析析析后后后后畫畫畫畫出出出出直直直直方方方方圖圖圖圖等等等等。這這一一方方法法每每秒秒鐘鐘能能分分析析 1,0001,000至至10,00010,000個個細胞。細胞。流流式式細細胞胞術(shù)術(shù)能能進進行行多多種種細細胞胞特特征征分分析析,包包括括細細胞胞大大小小,胞胞漿漿的的顆顆粒粒狀狀態(tài)態(tài),細細胞胞生生長長狀狀態(tài)態(tài)及及所所分分布布的的細細胞胞周周期期,核核型型倍倍體體數(shù)數(shù)與與DNADNA含含量量,胞胞膜膜表表面面標標記記物物變變化化及及細細胞胞內(nèi)內(nèi)酶酶的含量等等。的含量等等。l流式細胞術(shù)是一種能在液流系統(tǒng)中快速測定單個細胞或細胞器的生物學(xué)性質(zhì)并把特定的細胞或細胞器從群體中加以分類收集的技術(shù)。l其特點是通過快速測定庫爾特電阻、熒光、光散射和光吸收來定量測定細胞DNA含量、細胞體積、蛋白質(zhì)含量、酶活性、細胞膜受體和表面抗原等許多重要參數(shù)。根據(jù)這些參數(shù)將不同性質(zhì)的細胞分開以獲得供細胞學(xué)、病理學(xué)和其他生物學(xué)研究用的純細胞群體。l目前流式細胞術(shù)最高分選速度已達到每秒鐘3萬個細胞并在免疫病理學(xué)、腫瘤病理學(xué)、分子病理學(xué)和細胞凋亡等研究方面得到初步應(yīng)用l（六）病理圖象分析技術(shù)（六）病理圖象分析技術(shù)lpathological image analysispathological image analysis l 圖像分析是對于病變中組織、細胞或細胞器等的二維和三維結(jié)構(gòu)進行定量或半定量分析。l用于診斷病理學(xué)的圖像分析技術(shù)，是對病變的形態(tài)結(jié)構(gòu)進行定量或半定量分析（形態(tài)計量分析），是對病變形態(tài)進行定性分析的一種量化性補充，為病理學(xué)診斷提供參考性信息。l圖像分析技術(shù)應(yīng)用計算機圖像分析系統(tǒng)進行操作，并在不斷發(fā)展。l利用成像原理和自動模式識別的方法以電子計算機為工具把不能被肉眼觀察到的以及不易被計算機讀入的、反映生物學(xué)對象所特有的數(shù)據(jù)和結(jié)構(gòu)等轉(zhuǎn)換成有利于使用的直觀圖像包括對圖像的加工處理和對圖像的分析。l對病理學(xué)圖像的分析意指在圖像處理的基礎(chǔ)上對目標的種種特征進行定量描述和比較借以診斷。l例如在識別癌細胞過程中可通過測定其細胞核面積、形狀、總光密度、胞核結(jié)構(gòu)等定量特征再與正常細胞比較確定其性質(zhì)。目前這一技術(shù)已在病理學(xué)中開始運用。可以預(yù)測生物圖像處理技術(shù)將運用于普通病理學(xué)通過對細胞和組織的高分辨率計算機分析技（七）（七）（七）（七）分子生物學(xué)技術(shù)分子生物學(xué)技術(shù) 1 1 1 1、核酸原位雜交核酸原位雜交核酸原位雜交核酸原位雜交 用用用用已已已已知知知知序序序序列列列列核核核核酸酸酸酸作作作作為為為為探探探探針針針針與與與與細細細細胞胞胞胞或或或或組組組組織織織織切切切切片片片片中中中中核核核核酸酸酸酸進進進進行雜交對其實行檢測的方法。行雜交對其實行檢測的方法。行雜交對其實行檢測的方法。行雜交對其實行檢測的方法。適適用用于于石石蠟蠟包包埋埋組組織織切切片片、冰冰凍凍切切片片、細細胞胞涂涂片片、培養(yǎng)細胞等。培養(yǎng)細胞等。染色體原位雜交示意圖染色體原位雜交示意圖2 2、原位原位PCRPCR技術(shù)技術(shù) 將將將將組組組組織織織織切切切切片片片片或或或或細細細細胞胞胞胞涂涂涂涂片片片片中中中中的的的的核核核核酸酸酸酸(DNA(DNA(DNA(DNA或或或或RNARNARNARNA均均均均可可可可以以以以)片片片片段段段段在在在在原原原原位位位位進進進進行行行行擴擴擴擴增增增增,在在在在擴擴擴擴增增增增中中中中摻摻摻摻入入入入示示示示蹤蹤蹤蹤劑劑劑劑,或或或或擴擴擴擴增增增增后后后后再行原位雜交等再行原位雜交等再行原位雜交等再行原位雜交等,以觀察基因表達等以觀察基因表達等以觀察基因表達等以觀察基因表達等。但但但但原原原原位位位位PCRPCRPCRPCR應(yīng)應(yīng)應(yīng)應(yīng)用用用用最最最最廣廣廣廣的的的的還還還還是是是是用用用用來來來來檢檢檢檢測測測測組組組組織織織織或或或或細細細細胞胞胞胞中中中中的的的的病病病病原原原原微微微微生生生生物物物物如如如如禽禽禽禽流流流流感感感感、細細細細菌菌菌菌等等等等.其其其其敏敏敏敏感感感感性性性性比比比比原原原原位位位位雜雜雜雜交交交交有有有有明顯提高明顯提高明顯提高明顯提高。3 3 3 3、生物芯片技術(shù)生物芯片技術(shù)生物芯片技術(shù)生物芯片技術(shù) /基因芯片技術(shù)基因芯片技術(shù)基因芯片技術(shù)基因芯片技術(shù) 近近年年來來發(fā)發(fā)展展起起來來的的一一項項生生物物醫(yī)醫(yī)學(xué)學(xué)高高新新技技術(shù)術(shù)，實實際際上上是一種反向斑點雜交技術(shù)。是一種反向斑點雜交技術(shù)?；蛞蛐拘酒?gene(gene chip)chip)又又稱稱DNADNA芯芯片片 (DNA(DNA chip)chip)，是是指指固固著著在在固固相相載載體體上上的的高高密密度度的的DNADNA微微點點陣陣，即即將將大大量量靶靶基基因因或或寡寡核核苷苷酸酸片片段段有有序序地地、高高密密度度地地（點點與與點點間間距距小小于于500500 m m）排排列列在在如如硅硅片片、玻玻璃璃片片、聚聚丙丙烯烯或或尼尼龍龍膜膜等等載載體體上上。代代表表不不同同檢檢測測基基因因的的探探針針被被固固定定于于固固相相基基板板上上，而而被被檢檢測測的的DNADNA或或cDNAcDNA 用用放放射射性性核核素素或或熒熒光光物標記后與固相陣列雜交物標記后與固相陣列雜交。l生物芯片技術(shù)生物芯片技術(shù) （biochip technology）l是將大量具有生物識別功能的分子或生物樣品有序地點陣是將大量具有生物識別
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